目的通過(guò)基因芯片技術(shù)篩選特異性的肺癌干細(xì)胞標(biāo)志分子,為后續(xù)肺癌干細(xì)胞的篩選和功能研究奠定基礎(chǔ),為肺癌的發(fā)生機(jī)制和靶向治療提供依據(jù)。方法將人肺腺癌SPC-A-1貼壁細(xì)胞（SPC-A-1monolayer cells,SPC-A-1-MC）作為對(duì)照組,將SPC-A-1-MC細(xì)胞培養(yǎng)于含20μg/L的重組人表皮生長(zhǎng)因子（epidermal growth factor,EGF）和重組人堿性成纖維因子（basic fibroblast growth factor,b-FGF）及2%B27三種誘導(dǎo)因子的DMEM/F12培養(yǎng)基中誘導(dǎo)得到SPC-A-1干細(xì)胞樣細(xì)胞（SPC-A-1stem-like cells,SPC-A-1-SC）,作為實(shí)驗(yàn)組。收取兩組細(xì)胞樣本RNA,采用基因芯片技術(shù)篩選兩組間差異表達(dá)基因,進(jìn)一步對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行GO富集分析和KEGG通路富集分析。實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR）驗(yàn)證部分關(guān)鍵差異表達(dá)基因在兩組間的表達(dá)水平;采用兩組獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)對(duì)兩組間差異基因的表達(dá)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析... 

【文章來(lái)源】：中華腫瘤防治雜志. 2020,27(22)北大核心

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人肺腺癌SPC-A-1貼壁細(xì)胞與干細(xì)胞樣細(xì)胞RNA探針信號(hào)強(qiáng)度分布曲線

對(duì)差異表達(dá)上調(diào)基因SPRY1、ANTXR2、SER-PINE2及下調(diào)基因KRT7和DKK1進(jìn)行qRT-PCR驗(yàn)證。圖4示，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組上調(diào)基因SPRY1上調(diào)（77.404±23.247）倍，t=-68.77,P<0.001;ANTXR2上調(diào)（17.454±1.163）倍，t=-34.22,P<0.001;SERPINE2上調(diào)（66.744±7.537）倍，t=-15.10,P<0.001；下調(diào)基因KRT7下調(diào)（53.328±0.932）倍，t=69.70,P<0.001;DKK1下調(diào)（16.800±0.482）倍，t=199.37,P<0.001；組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，qRT-PCR驗(yàn)證結(jié)果與芯片結(jié)果一致。圖3 人肺腺癌SPC-A-1貼壁細(xì)胞與干細(xì)胞樣細(xì)胞差異表達(dá)基因的主要生物學(xué)功能

圖2 人肺腺癌SPC-A-1貼壁細(xì)胞與干細(xì)胞樣細(xì)胞差異表達(dá)基因散點(diǎn)圖圖4 人肺腺癌SPC-A-1貼壁細(xì)胞與干細(xì)胞樣細(xì)胞差異表達(dá)基因參與的主要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人肺腺癌A549干樣細(xì)胞富集及其自噬表達(dá)水平研究[J]. 劉長(zhǎng)路,李才弘,代森林,李亞軍,劉代順.  中華腫瘤防治雜志. 2020(02)
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本文編號(hào)：3329512