為分析DCP2基因的特點(diǎn),研究其編碼蛋白的生物學(xué)功能及其在病毒復(fù)制中的作用機(jī)制。本試驗(yàn)擬獲取Marc145細(xì)胞源DCP2基因序列,構(gòu)建其原核表達(dá)質(zhì)粒,獲得重組蛋白,制備高免血清。結(jié)果顯示,成功獲得了DCP2基因的兩種轉(zhuǎn)錄變異體編碼區(qū),即長度為1 263 bp的X1亞型和1 158 bp的X2亞型,X1亞型基因序列與X2亞型相比,除了第576位堿基A變成G,第613位堿基C變成T,第945¹ 049位多出105 bp堿基外,其他地方完全一致。DCP2X1亞型基因編碼氨基酸序列與X2亞型相比,除945¹ 049位多出的105 bp基因造成的第314³49個(gè)氨基酸的位置多出36個(gè)氨基酸外,其余完全一致,第576位、第613位堿基的不同并沒有造成氨基酸的變化。DCP2 X1亞型蛋白二級結(jié)構(gòu)與X2相比,除了多出的36個(gè)氨基酸不同外,其余地方也不一樣。構(gòu)建的攜帶DCP2 X1亞型基因的原核表達(dá)質(zhì)粒,誘導(dǎo)表達(dá)的蛋白為不可溶性蛋白,純化后免疫兔子,成功獲得了針對DCP2 X1亞型原核表達(dá)蛋白的兔源高免血清,效價(jià)為1∶6 400。本試驗(yàn)成... 

【文章來源】：基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2020,39(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

DCP2基因的PCR產(chǎn)物

DCP2 X1,X2亞型核苷酸序列及比對

X1,X2亞型蛋白二級結(jié)構(gòu)預(yù)測

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]選擇性剪接調(diào)控蛋白PTB及同源蛋白的研究進(jìn)展[J]. 陳偉霞,陳彬,徐燕,丁亞杰,趙愛光.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2017(33)
[2]XAF1轉(zhuǎn)錄變異體在胃腸道腫瘤細(xì)胞株中的表達(dá)及意義[J]. 周永柏,張亞歷,王繼德,楊兵.  胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志. 2015(11)
[3]人Dcp2基因克隆表達(dá)、多克隆抗體的制備及其應(yīng)用[J]. 劉利新,劉樹峰,常乃柏,劉輝,王嵬.  中國科學(xué)院研究生院學(xué)報(bào). 2007(03)

碩士論文
[1]水貂杯狀病毒分離鑒定與生物學(xué)特性研究[D]. 徐貴財(cái).中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009



本文編號：3314878