棉花作為一種重要的天然紡織資源,在其生長發(fā)育過程中總是面臨著各種各樣植食性害蟲的取食,造成大幅度減產(chǎn)。隨著BT棉的大面積推廣種植,BT非靶標(biāo)害蟲煙粉虱（Bemisia tabaci）、盲椿象等刺吸式昆蟲已由次生害蟲逐漸上升為主要害蟲,因此,研究煙粉虱與棉花互作的分子機(jī)制,挖掘潛在的抗蟲基因具有重要意義。本課題從棉花與煙粉虱互作的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)中選擇了棉花與煙粉虱互作相關(guān)的8個基因,分別是GhWRKY18、GhWRKY21、GhWRKY32、GhWRKY40、GhWRKY46、GhWRKY70、GhERF105、Gh6PGL2,通過創(chuàng)造這8個基因的RNAi和超表達(dá)轉(zhuǎn)基因材料來驗證它們在棉花抗蟲信號路徑中所起的作用。1、通過構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹對陸地棉中的WRKY轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行分組,結(jié)果顯示GhWRKY32屬于第Ⅰ組,GhWRKY18和GhWRKY40都屬于第II-a組,GhWRKY21屬于第Ⅱ-d組,GhWRKY46和GhWRKY70屬于第III組。通過分析WRKY轉(zhuǎn)錄因子在煙粉虱誘導(dǎo)下的表達(dá)模式,結(jié)果顯示這6個WRKY轉(zhuǎn)錄因子在陸地棉中可能積極地響應(yīng)煙粉虱的脅迫。本研究共構(gòu)建6個RNAi載體和4個... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

RNAi干涉載體和超表達(dá)載體的示意圖

蟲鑒定試驗設(shè)計間播種試驗設(shè)計獲得的各株系的種子剝好用升汞殺菌后，播種于加入基中，28℃暗培養(yǎng) 1 天之后扶苗，放入光照培養(yǎng)室繼養(yǎng)基中拿出，在光照培養(yǎng)室水培 5-6 天之后播種在營給與合適的生長條件；待到 5 月初，選擇生長健壯入華中農(nóng)業(yè)大學(xué)轉(zhuǎn)基因試驗基地。據(jù)情況進(jìn)行防蟲用藥，為了客觀科學(xué)地反映轉(zhuǎn)基因68（對照）對于抗蟲性狀的變化，在田間種植時采用相間種植（如圖 2-2）以及作為整個試驗田的保護(hù)行3 株陽性材料作為生物學(xué)重復(fù)。

華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018 屆碩士研究生學(xué)位（畢業(yè)）論文2）陸地棉 WRKY 轉(zhuǎn)錄因子的系統(tǒng)進(jìn)化樹從陸地棉基因組注釋文件中共篩選出 265 個 WRKY 轉(zhuǎn)錄因子，除去沒有完整 WRKY 結(jié)構(gòu)域的的基因和錨定在 scaffold 上的 5 個基因，共篩選出 224 個WRKY 轉(zhuǎn)錄因子，從 TAIR 數(shù)據(jù)庫中共篩選出 72 個擬南芥 WRKY 轉(zhuǎn)錄因子。利用 MEGA5 對陸地棉中的 224 個 WRKY 轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹分析，如圖 4 所示，這 224 個 WRKY 轉(zhuǎn)錄因子中的按照第 I 組、第 II 組和第 III 組分別聚類到一起，第 II 組又繼續(xù)可以分為Ⅱ-a、Ⅱ-b、Ⅱ-c、Ⅱ-d 和Ⅱ-e 五個亞組。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]海島棉乙烯響應(yīng)因子GbERF1-like在抗黃萎病反應(yīng)中的功能解析[D]. 郭偉鋒.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016

碩士論文
[1]棉花轉(zhuǎn)錄因子GhWRKY40-like和GhWRKY70在抗黃萎病中的功能研究[D]. 張坤.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015



本文編號：3269152