葡萄風(fēng)信子糖基轉(zhuǎn)移酶基因MaGT1的克隆與功能研究
發(fā)布時(shí)間:2021-07-06 15:16
目前關(guān)于參與藍(lán)色花青素合成的修飾基因及其作用方式知之甚少,深入理解不同花青苷形成和修飾的分子機(jī)理,發(fā)現(xiàn)其中的規(guī)律,是當(dāng)前亟待解決的問題。本研究在課題組研究基礎(chǔ)上,首次克隆得到葡萄風(fēng)信子中的一個(gè)類黃酮糖苷轉(zhuǎn)移酶基因MaGT1。對(duì)其進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn),探究了MaGT1基因在花青素呈色中的功能,為花色基因工程提供理論依據(jù)。研究結(jié)果如下:1.克隆得到葡萄風(fēng)信子中的一個(gè)類黃酮糖苷轉(zhuǎn)移酶基因MaGT1,cDNA全長(zhǎng)1338bp,編碼445個(gè)氨基酸,GenBank登錄號(hào)為:MK652470。理論分子量約為49.301KD,pI為5.40。2.MaGT1編碼的氨基酸序列分析顯示,MaGT1屬于GT-B類,其C末端包含典型的由44個(gè)氨基酸組成的PSPG糖基轉(zhuǎn)移酶結(jié)構(gòu)域。MaGT1與油棕(Elaeis guineensis)、海棗(Phoenix dactylifera)、葡萄(Vitis vinifera)等單子葉植物的相似性較高,約在51%54%之間。3.系統(tǒng)發(fā)育樹顯示MaGT1聚集在進(jìn)化枝FGGT(類黃酮糖苷糖基酶類)中,FGGT是使用花青素3-葡萄糖苷作為底物,將葡萄糖或鼠李糖...
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:79 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
花青苷的合成途徑(Frydmanetal.2013)
西北農(nóng)林科技大學(xué)碩士學(xué)位論文二章 葡萄風(fēng)信子類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶基因 MaGT1 的克隆及生物信息學(xué)分析.1 材料1.1 植物材料本實(shí)驗(yàn)以葡萄風(fēng)信子(Muscari ameniacum) 為材料,栽植于西北林學(xué)院竹園苗圃。依據(jù)焦淑珍等(2014)的方式,將葡萄風(fēng)信子按不同的生長(zhǎng)和花發(fā)育時(shí)期,將花分為 5 個(gè)發(fā)育時(shí)期(圖 2-1),分別為:S1,未著色的花蕾;S2,花瓣開始著色;S3,瓣著色完全,但未開放;S4,花瓣著色且完全開放 ;S5,衰敗的花。于葡萄風(fēng)信開花期間(3~4 月),分別采集不同發(fā)育時(shí)期的花,并在液 N2 速凍后超低溫貯存。
黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶基因 MaGT1 的克隆及生物序后的序列表明,所得序列與轉(zhuǎn)錄組其開放閱讀框?yàn)?1338 bp 和 1386bp,BI 中 BLAST-Conserved Domains 功能aGT1 基因編碼的蛋白序列完整(圖 構(gòu)類型為 GT-B 類(圖 2-3),具有典結(jié)構(gòu)域(PLN02670)和 UDP-葡萄編碼 445 個(gè)氨基酸(圖 2-4),提交到白序列不完整(圖 2-3),蛋白屬于 G02555)和 UDPGT 保守域。1 M 2
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]優(yōu)化大腸桿菌表達(dá)外源蛋白的研究進(jìn)展[J]. 蘇鵬,龔國(guó)利. 生物技術(shù)通報(bào). 2017(02)
[2]重組蛋白表達(dá)技術(shù)的研究進(jìn)展[J]. 蘇鵬,龔國(guó)利. 中國(guó)釀造. 2016(10)
[3]基于花青素苷合成和呈色機(jī)理的觀賞植物花色改良分子育種[J]. 戴思蘭,洪艷. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(03)
[4]大腸桿菌外源蛋白表達(dá)載體穩(wěn)定性的研究進(jìn)展[J]. 江偉華,劉益麗,江明鋒. 生物技術(shù)通報(bào). 2014(05)
[5]大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的影響因素[J]. 許崇利,楊梅,許崇波. 中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2010(08)
[6]增強(qiáng)組成型重組大腸桿菌質(zhì)粒穩(wěn)定性的發(fā)酵策略[J]. 茍斌全,張嗣良,儲(chǔ)炬,王永紅,莊英萍,黃華,李震,袁中一. 化學(xué)與生物工程. 2008(10)
[7]大腸桿菌高效表達(dá)載體pSY621的構(gòu)建[J]. 沈蕓,應(yīng)康,徐萬祥,謝毅. 復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2000(03)
博士論文
[1]羅漢果苷代謝酶基因轉(zhuǎn)錄組研究及葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因克隆與表達(dá)[D]. 莫長(zhǎng)明.廣西大學(xué) 2016
[2]葡萄風(fēng)信子(Muscari)花色形成與相關(guān)基因研究[D]. 婁倩.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
[3]香雪蘭UDP-葡萄糖:類黃酮3-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆及其功能鑒定[D]. 隋昕.東北師范大學(xué) 2011
[4]菊花花色形成的表型分析[D]. 白新祥.北京林業(yè)大學(xué) 2007
本文編號(hào):3268479
【文章來源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:79 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
花青苷的合成途徑(Frydmanetal.2013)
西北農(nóng)林科技大學(xué)碩士學(xué)位論文二章 葡萄風(fēng)信子類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶基因 MaGT1 的克隆及生物信息學(xué)分析.1 材料1.1 植物材料本實(shí)驗(yàn)以葡萄風(fēng)信子(Muscari ameniacum) 為材料,栽植于西北林學(xué)院竹園苗圃。依據(jù)焦淑珍等(2014)的方式,將葡萄風(fēng)信子按不同的生長(zhǎng)和花發(fā)育時(shí)期,將花分為 5 個(gè)發(fā)育時(shí)期(圖 2-1),分別為:S1,未著色的花蕾;S2,花瓣開始著色;S3,瓣著色完全,但未開放;S4,花瓣著色且完全開放 ;S5,衰敗的花。于葡萄風(fēng)信開花期間(3~4 月),分別采集不同發(fā)育時(shí)期的花,并在液 N2 速凍后超低溫貯存。
黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶基因 MaGT1 的克隆及生物序后的序列表明,所得序列與轉(zhuǎn)錄組其開放閱讀框?yàn)?1338 bp 和 1386bp,BI 中 BLAST-Conserved Domains 功能aGT1 基因編碼的蛋白序列完整(圖 構(gòu)類型為 GT-B 類(圖 2-3),具有典結(jié)構(gòu)域(PLN02670)和 UDP-葡萄編碼 445 個(gè)氨基酸(圖 2-4),提交到白序列不完整(圖 2-3),蛋白屬于 G02555)和 UDPGT 保守域。1 M 2
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]優(yōu)化大腸桿菌表達(dá)外源蛋白的研究進(jìn)展[J]. 蘇鵬,龔國(guó)利. 生物技術(shù)通報(bào). 2017(02)
[2]重組蛋白表達(dá)技術(shù)的研究進(jìn)展[J]. 蘇鵬,龔國(guó)利. 中國(guó)釀造. 2016(10)
[3]基于花青素苷合成和呈色機(jī)理的觀賞植物花色改良分子育種[J]. 戴思蘭,洪艷. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(03)
[4]大腸桿菌外源蛋白表達(dá)載體穩(wěn)定性的研究進(jìn)展[J]. 江偉華,劉益麗,江明鋒. 生物技術(shù)通報(bào). 2014(05)
[5]大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的影響因素[J]. 許崇利,楊梅,許崇波. 中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2010(08)
[6]增強(qiáng)組成型重組大腸桿菌質(zhì)粒穩(wěn)定性的發(fā)酵策略[J]. 茍斌全,張嗣良,儲(chǔ)炬,王永紅,莊英萍,黃華,李震,袁中一. 化學(xué)與生物工程. 2008(10)
[7]大腸桿菌高效表達(dá)載體pSY621的構(gòu)建[J]. 沈蕓,應(yīng)康,徐萬祥,謝毅. 復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2000(03)
博士論文
[1]羅漢果苷代謝酶基因轉(zhuǎn)錄組研究及葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因克隆與表達(dá)[D]. 莫長(zhǎng)明.廣西大學(xué) 2016
[2]葡萄風(fēng)信子(Muscari)花色形成與相關(guān)基因研究[D]. 婁倩.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
[3]香雪蘭UDP-葡萄糖:類黃酮3-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆及其功能鑒定[D]. 隋昕.東北師范大學(xué) 2011
[4]菊花花色形成的表型分析[D]. 白新祥.北京林業(yè)大學(xué) 2007
本文編號(hào):3268479
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