微藻富含油脂、易于培養(yǎng)、生長周期短,可作為功能食品、飼料添加劑的替代來源。然而,培養(yǎng)過程中存在生物質(zhì)濃度低、規(guī)�；囵B(yǎng)難、收獲耗能高、新鮮水消耗大、特定多不飽和脂肪酸含量低等問題,導致微藻生物質(zhì)及其組分成本高,限制了其商業(yè)化應用。本論文以湛江等鞭金藻、假微型海鏈藻和聚球藻7002為研究對象,對微藻培養(yǎng)條件優(yōu)化、光生物反應器設計、生物絮凝收獲和絮凝上清再利用、基因工程藍藻產(chǎn)不飽和脂肪酸等進行探索研究。（1）湛江等鞭金藻和假微型海鏈藻的優(yōu)化培養(yǎng)。探討了培養(yǎng)方式、光強和NaN03濃度對微藻生長和產(chǎn)物積累的影響以及培養(yǎng)過程中氮消耗與微藻生長間的關(guān)系。結(jié)果表明,湛江等鞭金藻和假微型海鏈藻生長越快,對氮的吸收越多,兼養(yǎng)較光自養(yǎng)和光異養(yǎng)消耗更多的氮以滿足生長需要。充足的氮源和兼養(yǎng)培養(yǎng)時,蛋白質(zhì)積累較多;NaN03濃度較低時,油脂積累較多。綜合考慮油脂產(chǎn)率和節(jié)約資源等因素,湛江等鞭金藻最佳油脂產(chǎn)率80.06mg/L/d 在光強為 100μmol/m2/s、NaN03 濃度為 375mg/L、兼養(yǎng)培養(yǎng)條件下獲得。光強為100μmol/m2/s,NaN03濃度為375mg/L,兼養(yǎng)培養(yǎng),以更新率35%、更... 

【文章來源】：廣西大學廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１－２微藻的培養(yǎng)方式［２５）??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ?ｍｏｄｅ?ｏｆ?ｍｉｃｒｏａｌｇａｅ??１．２．２．５不同培養(yǎng)條件的優(yōu)劣??不同培養(yǎng)方式特征見圖１－２

通過Ａ５脫氫轉(zhuǎn)換成ＡＡ和ＥＰＡ。另一種酶Ａ１７脂肪酸脫氫酶，能夠?qū)ⅲ粒链呋桑牛校粒??然后在Ａ５延長酶作用下將ＥＰＡ轉(zhuǎn)換成ＤＰＡ，最后在Ａ４脂肪酸脫氫酶作用下轉(zhuǎn)換成ＤＨＡ??（圖１－４）。另一方面，在含油真菌裂殖壺菌和海洋細菌中證實存在替代的長鏈不飽和脂??肪酸途徑（聚酮合酶途徑）??與真核藻相比，藍藻遺傳操作更直接和完善。１９７０ｓ首例藍藻外源基因的轉(zhuǎn)化及重??組ＤＮＡ技術(shù)研究，構(gòu)建了工程藍藻。藍藻的多數(shù)遺傳操作是在獲得代謝、遺傳、光合??作用信息后進行的［９８］。穿梭載體、整合載體、轉(zhuǎn)座子及噬菌體載體等常用來構(gòu)建藍藻基??因工程載體［９９］。藍藻具有將外源基因通過一些未知機制穿過細胞膜的能力。集胞藻??Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓ?ｓｐ．?ＰＣＣ?６８０３．?ＷＷＷ：?Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓ?ｅｌｏｎｇａｔｕｓ?ＰＣＣ?７９４２?Ｓ．?Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓ??ｓｐ．ＰＣＣ?７００２等具有自然轉(zhuǎn)化能力，是基因工程的理想宿主［９３］。有些藍藻具有特定表型??或代謝過程中固氮產(chǎn)氫，使用結(jié)合轉(zhuǎn)化和電轉(zhuǎn)化用于轉(zhuǎn)化。對真核微藻來說，綠藻、紅??藻和褐藻及硅藻已成功轉(zhuǎn)化，大部分由核轉(zhuǎn)化［９４］。??轉(zhuǎn)基因微藻可作為生物反應器過量或特定表達基因，產(chǎn)生新代謝物。２０１３年＿晉飛??＿將大腸桿菌乙酰輔酶Ａ合成酶基因（ａｃｅｔｙｌ－ｃｏＡｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ，ＡＣＳ）引入裂殖壺藻??？ＳｃＡｉｚｏｃ／ｉ＾ｒ／ｗｍ?ｓｐ．ＴＩＯｌｌＯｌ

￣?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ／?ｕＭ??圖２－３人工海水中ＮＯｒ濃度與其在２２０ｎｍ下吸收值的關(guān)系曲線??Ｆｉｇ．?２－３?Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ?ｂｅｔｗｅｅｎ?ｎｉｔｒａｔｅ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ?ａｔ?２２０?ｎｍ?ｉｎ?ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ?ｓｅａｗａｔｅｒ??ｍｅｄｉｕｍ．??２．１．７統(tǒng)計學分析??所有結(jié)果以平均值±標準偏差表示。所有數(shù)據(jù)用ＳＰＳＳ?１０（ＳＰＳＳ，Ｃｈｉｃａｇｏ，?ＩＬ，ＵＳＡ）??中的單向ＡＮＯＶＡ?（方差分析）和多重范圍試驗（ｐ＜?０．０５）進行評估。０．０５為差異??顯著，ｐ＜０．０１為差異極顯著。??２．２結(jié)果與討論??２．２．１培養(yǎng)條件和培養(yǎng)方式對湛江等鞭金藻生物量濃度影響??如圖２－４所示，光強分別為１００和２００?｜ｘｍｏｌ／ｍ２／ｓ時，不同培養(yǎng)方式下，隨ＮａＮ〇３??濃度升高（從７５ｍｇ／Ｌ升高到７５０ｍｇ／Ｌ），微藻生物量濃度在逐步增大，差異性顯著（ｐ??〈０．０５）。培養(yǎng)９ｄ后，ＮａＮ０３濃度為乃ｍｇ／Ｌ，光強為１０〇Ｍｍｏｌ／ｍ２／ｓ光異養(yǎng)時生物量濃??度最低為０．４６?ｇ／Ｌ，ＮａＮ０３濃度為７５０?ｍｇ／Ｌ，光強為１００?ｎｍｏｌ／ｍ２／ｓ兼養(yǎng)時生物量濃度最??高為２．２０?ｇ／Ｌ。氮是合成蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的必需元素，增加氮供應生物量濃??度將增加

【參考文獻】：
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本文編號：3261623