水稻是最重要的糧食作物之一,提高水稻的產(chǎn)量對(duì)從世界范圍內(nèi)消除饑餓、解決溫飽的重要性不言而喻。抽穗期是水稻的重要農(nóng)藝性狀,研究和改良水稻抽穗期,對(duì)于水稻的穩(wěn)產(chǎn)和高產(chǎn)具有意義。油菜素內(nèi)酯途徑可從多方面影響水稻的株型發(fā)育,進(jìn)而影響水稻的產(chǎn)量。之前研究中,我們克隆了一個(gè)早抽穗基因Se14,為了進(jìn)一步分析Se14的功能,我們利用CRISPR/Cas9技術(shù)在野生型日本晴背景下對(duì)Se14基因進(jìn)行敲除實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證了Se14的一因多效性;同時(shí),對(duì)se14進(jìn)行了BR處理,并對(duì)BR合成和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)基因的表達(dá)量情況進(jìn)行了分析。另一方面,我們利用MutMp技術(shù)a克隆了水稻早抽穗基因E22;利用酵母雙雜技術(shù)篩選到ZM17轉(zhuǎn)錄因子的多個(gè)互作蛋白。主要結(jié)果如下:1.突變體se14除抽穗期早于日本晴外,還表現(xiàn)出矮化、穗頸縮短、葉片直立的突變表型。利用CRISPR/Cas9技術(shù),我們獲得了6個(gè)獨(dú)立的Se14的敲除植株,這些株系抽穗期均早于野生型日本晴,同時(shí)表現(xiàn)出葉片直立、稻穗長(zhǎng)和節(jié)間長(zhǎng)度縮短、株高降低等表型。這說(shuō)明Se14可能具有一因多效性,可同時(shí)控制水稻的多個(gè)性狀。2.當(dāng)施加24-eBL進(jìn)行處理時(shí),隨著濃度的增加,突變... 

【文章來(lái)源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一部分 Se14在油菜素內(nèi)酯調(diào)控途徑中的功能研究
    1 綜述
        引言
        1.1 油菜素內(nèi)酯的生物合成及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究進(jìn)展
            1.1.1 OsBRI1的調(diào)控機(jī)制
            1.1.2 OsBZR1的調(diào)控機(jī)制
            1.1.3 GSK2的調(diào)控機(jī)制
            1.1.4 DLT的調(diào)控機(jī)制
            1.1.5 RLA1的調(diào)控機(jī)制
            1.1.6 OsLIC的調(diào)控機(jī)制
            1.1.7 BU1的調(diào)控機(jī)制
        1.2 表觀遺傳學(xué)與組蛋白修飾
            1.2.1 表觀遺傳學(xué)概述
            1.2.2 水稻中組蛋白甲基化修飾研究進(jìn)展
        1.3 CRISPR/Cas9敲除技術(shù)
    2 本研究的目的與意義
    3 材料與方法
        3.1 實(shí)驗(yàn)材料
            3.1.1 植物材料
            3.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
            3.1.3 主要的試劑
        3.2 實(shí)驗(yàn)方法
            3.2.1 se14突變體、敲除突變體材料主要農(nóng)藝性狀調(diào)查
            3.2.2 DNA粗提(CTAB法)
            3.2.3 PCR擴(kuò)增及電泳檢測(cè)
            3.2.4 水稻總RNA的提取及反轉(zhuǎn)錄
            3.2.5 油菜素內(nèi)酯對(duì)水稻幼苗的處理
            3.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 Se14在油菜素內(nèi)酯調(diào)控途徑中的功能研究
            4.1.1 se14突變體表型鑒定和遺傳分析
            4.1.2 CRISPR/Cas9敲除突變體的表型鑒定
            4.1.3 突變體se14對(duì)油菜素內(nèi)酯的響應(yīng)
    5 討論
        5.1 Se14調(diào)控水稻開(kāi)花并介導(dǎo)BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
第二部分 水稻早抽穗基因E22的MutMap克隆
    1 綜述
        1.1 擬南芥開(kāi)花的研究進(jìn)展
        1.2 水稻抽穗期的研究進(jìn)展
        1.3 MutMap克隆
    2 本研究的目的與意義
    3 材料與方法
        3.1 實(shí)驗(yàn)材料
            3.1.1 植物材料
            3.1.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
            3.1.3 主要的試劑
    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 水稻早抽穗基因E22的MutMap克隆
            4.1.1 e22突變體表型分析
            4.1.2 e22突變性狀的遺傳分析
            4.1.3 E22的MutMap克隆
    5 討論
        5.1 水稻早抽穗基因的MutMap克隆
第三部分 轉(zhuǎn)錄因子ZM17互作蛋白的篩選
    1 綜述
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
            2.1.1 水稻材料
            2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
            2.1.3 實(shí)驗(yàn)所用載體和菌株
            2.1.4 主要的試劑及培養(yǎng)基
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 載體構(gòu)建
                2.2.1.1 酶切
                2.2.1.2 連接
                2.2.1.3 轉(zhuǎn)化
            2.2.2 酵母雙雜交技術(shù)
                2.2.2.1 酵母感受態(tài)的制備(確保整個(gè)過(guò)程在無(wú)菌條件下操作)
                2.2.2.2 酵母轉(zhuǎn)化
                2.2.2.3 互作蛋白的篩選
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 轉(zhuǎn)錄因子ZM17互作蛋白的篩選
    4 討論
        4.1 轉(zhuǎn)錄因子ZM17互作蛋白的篩選
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3261838