為明確馬鈴薯StPR1基因在抗病中的作用,構(gòu)建了植物表達(dá)載體pBI121-StPR1,并通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將StPR1基因?qū)霟煵葜?采用不同的致病菌對(duì)轉(zhuǎn)基因煙草進(jìn)行處理,對(duì)其抗病性及生理特性進(jìn)行研究,包括細(xì)菌病害軟腐病（胡蘿卜軟腐歐文氏菌、菊歐氏菌和胡蘿卜軟腐歐文氏菌馬鈴薯黑脛亞種）和青枯病（茄科雷爾氏菌）、真菌病害干腐病（接骨木鐮孢、燕麥鐮孢）致病菌。結(jié)果表明,接種致病菌后,轉(zhuǎn)基因型煙草和野生型煙草葉片上的病斑直徑會(huì)隨著病菌脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)而增大,并且轉(zhuǎn)基因型煙草病斑直徑明顯小于野生型煙草;在生理特性分析中,野生型煙草和轉(zhuǎn)基因煙草葉片中生理指標(biāo)都會(huì)隨著病菌脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)而呈上升趨勢(shì),但轉(zhuǎn)基因煙草SOD、POD和CAT活性較野生型煙草均有不同程度的提高。抗病性及生理特性分析結(jié)果均表明,轉(zhuǎn)基因煙草對(duì)于致病細(xì)菌和真菌均具有更強(qiáng)的抗性,說(shuō)明StPR1基因在馬鈴薯植物抗病中起著重要的作用,為PR1基因在植物的抗病方面提供了理論基礎(chǔ)。 

【文章來(lái)源】：華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2020,35(03)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

RNA 瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果

含酶切位點(diǎn) StPR1 基因的 PCR 產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)

對(duì)菌液進(jìn)行陽(yáng)性篩選,菌液PCR結(jié)果獲得了目的性片段,其長(zhǎng)度在540 bp(圖 3),大小與基因相同。使用 XbaⅠ和 BamHⅠ對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行雙酶切,結(jié)果在 540 bp 處獲得目的片段(圖4),確定表達(dá)載體構(gòu)建成功,命名為進(jìn)行pBI121-StPR1。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]馬鈴薯StPR1基因克隆及表達(dá)特異性分析[J]. 李秀鈺,賀付蒙,韓瑛琪,趙瀟璨,武佳文,朱元芳,周磊,石奇海,馮哲,李鳳蘭.  華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2019(02)
[2]東北地區(qū)馬鈴薯常見(jiàn)病害的發(fā)生及防治[J]. 孫海軍.  吉林農(nóng)業(yè). 2016(15)
[3]湖北海棠病程相關(guān)蛋白MhPR8基因的克隆與表達(dá)[J]. 張計(jì)育,渠慎春,薛華柏,高志紅,郭忠仁,章鎮(zhèn).  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(08)
[4]植物病程相關(guān)蛋白研究進(jìn)展[J]. 劉紀(jì)元,佟少明,侯和勝.  黑龍江科技信息. 2012(05)
[5]我國(guó)馬鈴薯貯藏加工產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及其發(fā)展建議[J]. 陳彥云,曹君邁,陳曉軍,任曉月,劉喜平,丁紅瑾.  保鮮與加工. 2011(06)
[6]根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)外源基因轉(zhuǎn)化煙草體系的優(yōu)化[J]. 律鳳霞.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(19)
[7]煙草無(wú)菌苗培養(yǎng)前的種子消毒技術(shù)研究[J]. 胡重怡,鄭少清,陳興江,陳麗莉,程艷.  中國(guó)煙草科學(xué). 2007(02)

碩士論文
[1]棉花黃萎病菌和HarpinXoo蛋白對(duì)轉(zhuǎn)hpalXoo基因棉部分抗病生理指標(biāo)的影響[D]. 喬子辰.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3259553