發(fā)布時(shí)間：2021-06-29 09:09

　　背景:組蛋白乙�；揎検侵夤芟匾陌l(fā)病機(jī)制,由組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶（histone acetyltransferase,HAT）及組蛋白去乙酰化酶（histone deacetylases,HDAC）介導(dǎo),P300是典型的組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶。支氣管哮喘的病理特征之一是氣道黏液高分泌,黏蛋白5AC（mucin 5AC,MUC5AC）是氣道最主要的黏蛋白。目前,許多研究表明MUC5AC基因的表達(dá)與組蛋白乙酰化作用相關(guān),所以提出科學(xué)假設(shè):組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶P300與MUC5AC基因的表達(dá)調(diào)控相關(guān)。目的:克隆MUC5AC基因的啟動(dòng)子,并尋找該啟動(dòng)子的核心區(qū)域;探討組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶P300對MUC5AC基因表達(dá)的影響。方法:1.采用PCR法構(gòu)建人MUC5AC基因5’端非翻譯區(qū)大小為1348bp的片段并進(jìn)行測序鑒定。2.以上述成功構(gòu)建的產(chǎn)物為模板對啟動(dòng)子進(jìn)行5’端截短分析,分別擴(kuò)增983bp（-935/+48）,631bp（-583/+48）,253bp（-205/+48）,164bp（-116/+48）,71bp（-23/+48）的片段,與pGL3-Basic載體重新連接,并通過雙熒光素酶報(bào)告基因... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

含有MUC5AC基因啟動(dòng)子的重組報(bào)告質(zhì)粒(pGL-1300/+48)酶切鑒定圖

bp、164 bp及71 bp（圖 3）。經(jīng)測序比對后，證明序列正確（圖 4）。圖 2 不同片段大小MUC5AC基因5’側(cè)翼區(qū)缺失體克隆至pGL3-Basic載體示意圖。注：數(shù)字代表TSS的位置

南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文動(dòng)子質(zhì)粒 P2、P3、P4、P5、P6的特異性條帶，分別為983 bp、631 bp、252bp、164 bp及71 bp（圖 3）。經(jīng)測序比對后，證明序列正確（圖 4）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國16城市兒童哮喘患病率20年對比研究[J]. 劉傳合,洪建國,尚云曉,孫王君,多力坤·木扎帕爾,扇敏娜,高云,任筱郿,劉長山,張亞京,陰懷清,劉恩梅,農(nóng)光民,陳強(qiáng),盛錦云,唐素萍,邵明軍,陳育智.  中國實(shí)用兒科雜志. 2015(08)
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本文編號：3256169