目的:探討在人前列腺癌PC3細胞系中高表達的己糖激酶-2基因（HK2基因）對與PC3細胞系共培養(yǎng)體系里的輔助性T細胞1和輔助性T細胞2（TH1/TH2）的影響。方法:通過sh RNA構建慢病毒感染PC3細胞系產(chǎn)生HK2基因敲低的PC3細胞系的穩(wěn)轉株（sh-HK2）,同時使用無義序列構建慢病毒感染PC3細胞系獲得陰性對照細胞（NC）,q PCR與Western blot驗證敲低結果。培養(yǎng)前列腺癌細胞（NC和sh-HK2）48 h后分離癌細胞獲得上清液,提取健康人外周血單個核細胞（PBMCs）,TH1實驗組（sh-HK2組）:PBMCs在TH1誘導條件下使用培養(yǎng)過穩(wěn)轉株的上清液共培養(yǎng)48h,TH1陰性對照組（NC組）:PBMCs在TH1誘導條件下使用培養(yǎng)過陰性對照細胞的上清液共培養(yǎng)48h。TH2實驗組（sh-HK2組）,TH2陰性對照組（NC組）誘導條件變更為TH2誘導條件,其他不變。48h后分光光度儀檢測各共培養(yǎng)體系中乳酸水平。然后提取各組中PBMCs使用植物血凝素-M（PHA-M）另外培養(yǎng)24 h,Elisa法檢測TH1誘導條件下各組中PBMCs的IFN-γ和TH2誘導條件下各組PBM... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

實時熒光定量PCR測定HK2基因mRNA表達Figure1DetectionofHK2mRNAexpressionbyreal-timequantitativePCR

安徽醫(yī)科大學研究生學位論文12sh-RNA干擾HK2基因后，HK2蛋白表達降低圖2WB測定HK2蛋白表達Figure2WBdeterminationofHK2proteinexpressionNC組：陰性對照組PC3細胞；sh-RNA組：HK2基因敲低實驗組PC3細胞；NCgroup：NegativecontrolgroupPC3cellline；sh-HK2group：HK2geneknockdownPC3cellline3.3TH1培養(yǎng)體系中乳酸含量圖3TH1共培養(yǎng)體系中乳酸含量Figure3Lacticacidcontentinco-culturesystemofTH1

安徽醫(yī)科大學研究生學位論文12sh-RNA干擾HK2基因后，HK2蛋白表達降低圖2WB測定HK2蛋白表達Figure2WBdeterminationofHK2proteinexpressionNC組：陰性對照組PC3細胞；sh-RNA組：HK2基因敲低實驗組PC3細胞；NCgroup：NegativecontrolgroupPC3cellline；sh-HK2group：HK2geneknockdownPC3cellline3.3TH1培養(yǎng)體系中乳酸含量圖3TH1共培養(yǎng)體系中乳酸含量Figure3Lacticacidcontentinco-culturesystemofTH1

【參考文獻】：
期刊論文
[1]HK2基因在前列腺癌中的表達及其對前列腺癌細胞惡性表型的影響[J]. 陶陶,沈洲,項平,黃濤,陳恕求,宣強,肖峻.  臨床與實驗病理學雜志. 2017(02)
[2]惡性腫瘤患者外周血調(diào)節(jié)性T細胞及Th1、Th2細胞的檢測和臨床意義[J]. 張瑞萍,徐冰心,王社論,鄭成中,董青,翟樹森,周學慧,高云閣.  中國臨床醫(yī)學. 2012(06)



本文編號：3255937