鉀離子（K⁺）是植物細(xì)胞中大量存在的陽離子,在植物生長過程中具有重要作用。目前,我國耕地土壤鉀素含量不足,需進(jìn)口大量鉀肥。玉米在糧食、飼料以及工業(yè)等方面具有重要作用,然而供鉀不足會(huì)使玉米植株出現(xiàn)矮小纖弱及籽粒不飽滿等問題,嚴(yán)重影響了玉米的產(chǎn)量和品質(zhì)。因此,如何在低鉀條件下提高玉米對(duì)鉀營養(yǎng)的吸收能力已成為迫切需要解決的問題。鉀離子通道是植物吸收鉀離子的主要途徑,過表達(dá)鉀離子通道蛋白基因AKT1提高了植物對(duì)鉀離子的吸收能力。實(shí)驗(yàn)室前期從鹽角草中克隆得到了鉀離子通道蛋白基因SeAKT1,并將其轉(zhuǎn)入到擬南芥中驗(yàn)證了其功能。采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的幼胚侵染法將重組質(zhì)粒ubi:SeAKT1轉(zhuǎn)入玉米中,獲得5個(gè)陽性轉(zhuǎn)化事件。對(duì)T0代轉(zhuǎn)化植株進(jìn)行了PCR和bar試紙條檢測(cè),表明目的基因SeAKT1和標(biāo)記基因bar均已轉(zhuǎn)入玉米基因組中,且bar基因在蛋白水平上表達(dá)。對(duì)與玉米骨干自交系PH6WC雜交獲得的3個(gè)T1代玉米進(jìn)行了半定量RT-PCR檢測(cè),結(jié)果表明SeAKT1基因在3個(gè)株系中均有表達(dá)。對(duì)3個(gè)株系的SeAKT1基因進(jìn)行了PCR檢測(cè),并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行卡方檢驗(yàn),結(jié)果表明其后代基因分離比均符... 

【文章來源】：大連理工大學(xué)遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 鉀營養(yǎng)與土壤缺鉀
        1.1.1 鉀營養(yǎng)概述
        1.1.2 土壤鉀營養(yǎng)概況
    1.2 鉀離子通道概述
        1.2.1 鉀離子通道簡介
        1.2.2 Shaker家族通道概述
    1.3 植物AKT1的研究進(jìn)展
    1.4 轉(zhuǎn)基因玉米簡介
    1.5 目的與意義
2 玉米轉(zhuǎn)化及檢測(cè)
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器設(shè)備
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 玉米轉(zhuǎn)化所用試劑及培養(yǎng)基
        2.2.2 玉米轉(zhuǎn)化
        2.2.3 T0代轉(zhuǎn)SeAKT1基因玉米的PCR檢測(cè)
        2.2.4 T0代轉(zhuǎn)SeAKT1基因玉米的bar試紙條檢測(cè)
        2.2.5 T1代轉(zhuǎn)SeAKT1基因玉米的RT-PCR檢測(cè)
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 玉米轉(zhuǎn)基因植株的獲得
        2.3.2 T0代轉(zhuǎn)化植株的PCR檢測(cè)
        2.3.3 T0代轉(zhuǎn)化植株的bar試紙條檢測(cè)
        2.3.4 T1代轉(zhuǎn)基因植株的PCR和半定量RT-PCR檢測(cè)
        2.3.5 T1 轉(zhuǎn)基因植株遺傳分析
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
3 轉(zhuǎn)基因玉米的生理檢測(cè)
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器設(shè)備
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 玉米鉀離子耗竭實(shí)驗(yàn)
        3.2.2 玉米液培實(shí)驗(yàn)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 鉀離子耗竭實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.2 液培實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
4 轉(zhuǎn)基因玉米農(nóng)藝性狀分析
    4.1 實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        4.3.2 試驗(yàn)材料處理
        4.3.3 測(cè)定指標(biāo)及方法
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 植株生長狀態(tài)
        4.4.2 植株性狀測(cè)量結(jié)果
        4.4.3 穗部性狀測(cè)量結(jié)果
    4.5 討論
    4.6 小結(jié)
結(jié)論
展望
參考文獻(xiàn)
附錄A 縮略語
附錄B 論文中所用的DNA Marker
附錄C 論文中所用的重組植物表達(dá)載體圖譜
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]國內(nèi)外鉀資源及鉀肥生產(chǎn)現(xiàn)狀[J]. 王鑫,李恩澤,程芳琴.  廣州化工. 2018(14)
[2]中國鉀鹽資源發(fā)展現(xiàn)狀及建議[J]. 王棟,馮明偉,李慧英.  中國礦業(yè). 2017(S2)
[3]低鉀脅迫對(duì)玉米干物質(zhì)和養(yǎng)分積累與分配的影響[J]. 杜琪,趙新華,王華杰,李艷杰,王曉光,于海秋.  沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2017(03)
[4]植物K+通道AKT1的研究進(jìn)展[J]. 伍國強(qiáng),水清照,馮瑞軍.  植物學(xué)報(bào). 2017(02)
[5]植物響應(yīng)缺鉀脅迫的機(jī)制及提高鉀利用效率的策略[J]. 陳光,高振宇,徐國華.  植物學(xué)報(bào). 2017(01)
[6]生物炭對(duì)土壤鉀素生物有效性影響的研究進(jìn)展[J]. 聶新星,陳防.  中國土壤與肥料. 2016(02)
[7]世界鉀鹽產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀[J]. 孫小虹,唐堯,陳春琳,屈云燕.  現(xiàn)代化工. 2015(12)
[8]超聲波輔助花粉介導(dǎo)法獲得轉(zhuǎn)BtCry1Ac基因玉米的研究[J]. 南芝潤,惠國強(qiáng),羅綺,宋紅霞,吳家和,孫毅,張紅梅.  黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(09)
[9]植物鉀素研究進(jìn)展[J]. 王立梅,劉奕清,阮玉娟.  中國園藝文摘. 2015(05)
[10]水分對(duì)土壤鉀素植物有效性的影響研究進(jìn)展[J]. 霍娜,王宏庭.  山西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(12)



本文編號(hào)：3231639