【目的】克隆和分析褐飛虱Nilaparvata lugens絲氨酸蛋白酶抑制劑基因Nlserpin4,并探明其時(shí)空表達(dá)譜和病原真菌誘導(dǎo)表達(dá)模式。【方法】基于褐飛虱轉(zhuǎn)錄組和全基因組序列數(shù)據(jù),利用PCR技術(shù)克隆得到褐飛虱Nlserpin4基因的全長cDNA序列;利用生物信息學(xué)手段分析其核苷酸和蛋白質(zhì)序列特征;通過qRT-PCR技術(shù)檢測其在褐飛虱不同發(fā)育時(shí)期（卵、1-5齡若蟲和初羽化雌雄成蟲）和5齡若蟲不同組織（脂肪體、腸道、血淋巴和剩余蟲體）中的時(shí)空表達(dá)譜,以及金龜子綠僵菌Metarhizium anisopliae注射感染褐飛虱5齡若蟲不同時(shí)間后的誘導(dǎo)表達(dá)模式�！窘Y(jié)果】克隆獲得褐飛虱Nlserpin4基因全長cDNA序列（GenBank登錄號(hào):MN822802）,其開放閱讀框長1 227 bp,編碼408個(gè)氨基酸,蛋白的相對(duì)分子質(zhì)量和等電點(diǎn)分別為45.91 kD和6.23。氨基酸序列分析表明,Nlserpin4蛋白無糖基化位點(diǎn),N端包含一段由23個(gè)氨基酸殘基組成的信號(hào)肽,C端具有serpin蛋白家族典型的RCL區(qū),且含有能被靶標(biāo)蛋白酶識(shí)別的活性裂解位點(diǎn)。系統(tǒng)發(fā)育分析表明,Nlserpin... 

【文章來源】：昆蟲學(xué)報(bào). 2020,63(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

褐飛虱Nlserpin4基因cDNA序列及其編碼氨基酸序列

圖1 褐飛虱Nlserpin4基因cDNA序列及其編碼氨基酸序列圖3 基于氨基酸序列采用鄰接法構(gòu)建的褐飛虱和其他昆蟲serpin蛋白系統(tǒng)發(fā)育樹(1 000次重復(fù))

圖2 褐飛虱Nlserpin4與其他昆蟲同源蛋白質(zhì)序列RCL區(qū)多序列比對(duì)圖4 Nlserpin4在褐飛虱不同發(fā)育時(shí)期(A)和5齡若蟲不同組織(B)中的表達(dá)模式

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]稻飛虱災(zāi)變和治理研究透析[J]. 呂進(jìn),祝增榮,婁永根,程家安.  應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào). 2013(03)
[2]共生菌在褐飛虱防治中的應(yīng)用[J]. 陳列忠,俞曉平,陳建明,呂仲賢,鄭許松,張玨鋒.  農(nóng)藥. 2006(11)

碩士論文
[1]Serpin2和βGRP3在亞洲玉米螟免疫識(shí)別和防衛(wèi)過程中的功能研究[D]. 趙雅.揚(yáng)州大學(xué) 2018
[2]煙粉虱絲氨酸蛋白酶抑制劑Serpin的克隆、原核表達(dá)及表達(dá)分析[D]. 馮佳穎.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3219652