研究背景和目的:結(jié)腸癌是常見的消化道惡性腫瘤之一。世界范圍內(nèi)其發(fā)病率、死亡率居所有惡性腫瘤的第3位。近年亞洲國家結(jié)腸癌發(fā)病率呈明顯上升趨勢。我國最新的腫瘤流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示其發(fā)病率居第4位,死亡率居第5位。左右半結(jié)腸癌生物學(xué)行為的不同很早就被臨床所關(guān)注。1990年Bufill等學(xué)者首次提出左半結(jié)腸癌（LCC）和右半結(jié)腸癌（RCC）是兩種不同腫瘤,在解剖結(jié)構(gòu)生理功能、臨床病理特征、致癌機(jī)制等方面闡明了兩者差異。EGFR是經(jīng)過臨床證實(shí)的跟結(jié)直腸癌密切相關(guān)的治療靶點(diǎn),用于結(jié)腸癌精準(zhǔn)治療。KRAS基因是EGFR信號通路中一個(gè)重要調(diào)控基因,突變時(shí)會使結(jié)腸癌患者對抗EGFR抗體類藥物產(chǎn)生耐藥。2016版NCCN明確規(guī)定:一、所有結(jié)腸癌患者都應(yīng)該檢測Kras基因狀態(tài);二、Kras基因野生型患者才建議使用EGFR抑制劑進(jìn)行治療。因此KRAS基因突變檢測是目前篩選抗EGFR靶向藥物治最有效最直接的方法。左右半結(jié)腸癌臨床病理特征及與KRAS基因相關(guān)性分析,國內(nèi)報(bào)道不一致,大都來自非隨機(jī)的,小樣本的回顧性研究,本研究意在揭示不同部位結(jié)腸癌的腫瘤生物學(xué)差異,尤其分子水平,為實(shí)現(xiàn)腫瘤個(gè)體化治療及精準(zhǔn)治療提供理論依... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２：左半結(jié)腸癌ＨＥ染色圖??

１．３ＤＮＡ提取??采用德國ＱＩＡＧＥＮ石蠟組織ＤＮＡ提取試劑盒抽提組織ＤＮＡ。由專業(yè)的病??理醫(yī)師顯微鏡下觀察ＨＥ切片（左右半結(jié)腸癌ＨＥ染色圖見圖１，２），選取腫瘤??成分７０％以上的蠟塊，不含壞死組織，以ｌＯｊｕｎ厚度進(jìn)行連續(xù)切片６張，嚴(yán)格按??照ＱＩＡＧＥＮ石蠟組織ＤＮＡ提取試劑盒ＳＯＰ進(jìn)行操作：??１．３．１抽提前準(zhǔn)備：二甲苯、乙醇（９６％？１００％）、１．５ｍｌ或２ｍｌ離心管、水浴鍋??或金屬加熱器、高速離心機(jī)；檢查ＡＴＬ和ＡＬ是否有沉淀，如有，可在７０°Ｃ進(jìn)??行溶解；首次使用時(shí)，加入２５ｍｌ無水乙醇至ＡＷ１，加３０ｍｌ無水乙醇至ＡＷ２，??使用前混勻；??１．３．２提取步驟??（１）

Stinger鍘序法檢測ICRAS基因測序圖:Fig3:DetectionofKR

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]從左右半結(jié)腸癌的生物學(xué)差異談結(jié)直腸癌[J]. 徐建明.  中華腫瘤雜志. 2016 (05)
[2]加快中國特色的精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展[J]. 徐萍,桂永浩,金力.  中華兒科雜志. 2016 (05)
[3]中國精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)發(fā)展的需求和任務(wù)[J]. 付文華,錢海利,詹啟敏.  中國生化藥物雜志. 2016(04)
[4]結(jié)直腸癌KRAS、NRAS和BRAF基因突變及其與臨床病理相關(guān)性研究[J]. 孫屏,萬佳藝,吳靚驊,肖燕,呂慧,張熔熔.  中華普通外科雜志. 2016 (01)
[5]結(jié)直腸癌KRAS基因突變檢測方法的應(yīng)用和評價(jià)[J]. 葉美華,何向蕾,來茂德.  中華病理學(xué)雜志. 2015 (06)
[6]中國6364例結(jié)直腸癌患者KRAS基因突變檢測分析[J]. 王東,梁旺,段笑微,劉玲,申浩,彭永濟(jì),李賓.  中華病理學(xué)雜志. 2014 (09)
[7]廣西3720例結(jié)直腸癌臨床流行病學(xué)分析[J]. 趙波,鐘華戈,高楓,唐衛(wèi)中.  廣東醫(yī)學(xué). 2013(14)
[8]中國結(jié)直腸癌患者966例中KRAS和BRAF基因突變分析[J]. 高靜,孫志偉,李艷艷,沈琳.  中華病理學(xué)雜志. 2012 (09)
[9]中國結(jié)直腸癌患者中KRAS與BRAF基因突變特征及其臨床病理相關(guān)性[J]. 朱曉麗,蔡旭,張玲,楊飛,盛偉琪,陸永明,杜祥,周曉燕.  中華病理學(xué)雜志. 2012 (09)
[10]2003～2007年中國結(jié)直腸癌發(fā)病與死亡分析[J]. 陳瓊,劉志才,程蘭平,宋國慧,孫喜斌,鄭榮壽,張思維,陳萬青.  中國腫瘤. 2012(03)



本文編號：3217910