水稻是世界上最主要的糧食作物之一,選育高產、多抗、優(yōu)質的水稻品種一直是水稻育種的目標。水稻的分蘗、每穗粒數(shù)和籽粒大小是產量的構成因素,此外環(huán)境脅迫也是影響水稻穩(wěn)產的因素。水稻產量構成因素受到遺傳和環(huán)境的共同調控,其中包括miRNA、轉錄因子以及下游靶基因。前人的研究表明SPL（SQUAMOSA PROMOTER BINDING-LIKE）轉錄因子可以調控水稻的分蘗、穗型以及籽粒大小等性狀,而SPL基因受到包括miR156和miR529a等miRNA的調控。水稻miR529a與miR156的序列具有很高的相似性,之前我們已經(jīng)預測到miR529a有5個SPL靶基因OsSPL2、OsSPL14、OsSPL16、OsSPL17和 OsSPL18。同時,5個SPL基因也受到miR156的共同調控。之前的研究大多集中在miR156靶向SPL轉錄因子對水稻生長發(fā)育的調控,本實驗室通過過表達miR529a（miR529a-OE）也發(fā)現(xiàn)miR529a對水稻分蘗和穗型有影響。本研究通過構建miR529a功能沉默型MIMIC載體（miR529a-MIMIC）,通過轉基因方法獲得轉基因株系,并且與野生型（WT... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１．轉基因植株的鑒定

期植株的ｍｉＲ５２９ａ的表達量，結果顯示，在ｍｉＲ５２９ａ－ＯＥ過表迗植株中ｍｉＲ５２９ａ??的表達顯著增加，比ＷＴ增加了?３０倍左右，而ｍｉＲ５２９ａ－ＭＩＭＩＣ植株中的ｍｉＲ５２９ａ??表達則降低了?２倍左右（圖２－３Ｃ）。由于ｍｉＲ１５６與ｍｉＲ５２９ａ的序列高度相似并且??有５個共同的靶基因，同時已有的研究表明，ｍｉＲ１５６主要作用于水稻營養(yǎng)??生長階段，特別是在分蘗期之前有非常高的表達，因此對ｍｉＲ１５６的表迖進行檢??２１??

２．２．４?ｍｉＲ５２９ａ在分窠期對水箱的影響??隨著植株的生長，過表達株系ｍｉＲ５２９ａ－ＯＥ與ＷＴ株高差距加大，而??ｍｉＲ５２９ａ－ＭＩＭＩＣ的株高逐漸超過ＷＴ。在分蘗期（圖２－４Ａ），ｍｉＲ５２９ａ－ＯＥ的株高??在６０ｃｍ左右，顯著低于ＷＴ的株高８２ｃｍ左右，而ｍｉＲ５２９ａ－ＭＩＭＩＣ的株高８６ｃｍ??左右，顯著高于ＷＴ。除株高外，分蘗數(shù)也出現(xiàn)了差異（圖２－４Ｂ），ｍｉＲ５２９ａ－ＯＥ??植株大約有４０個分蘗，遠遠高于ＷＴ的２３個分蘗，而ｍｉＲ５２９ａ－ＭＩＭＩＣ植株大??約有１８個分蘗，顯著低于ＷＴ。在葉型上（圖２－４Ｃ），?ｍｉＲ５２９ａ－ＯＥ植株的葉片明??顯比野生型細窄，而ｍｉＲ５２９ａ－ＭＩＭＩＣ植株的葉片明顯比ＷＴ的寬。這些結果表??明，ｍｉＲ５２９ａ－ＯＥ和ｍｉＲ５２９ａ－ＭＩＭＩＣ的轉基因植株與ＷＴ在營養(yǎng)生長階段，特??別是分蘗期出現(xiàn)了明顯的表型差異。??２４??

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]提高中國稻田氮肥利用率的研究策略[J]. 彭少兵,黃見良,鐘旭華,楊建昌,王光火,鄒應斌,張福鎖,朱慶森,Roland Buresh,Christian Witt.  中國農業(yè)科學. 2002(09)



本文編號：3208642