水稻是世界上最主要的糧食作物之一,選育高產(chǎn)、多抗、優(yōu)質(zhì)的水稻品種一直是水稻育種的目標(biāo)。水稻的分蘗、每穗粒數(shù)和籽粒大小是產(chǎn)量的構(gòu)成因素,此外環(huán)境脅迫也是影響水稻穩(wěn)產(chǎn)的因素。水稻產(chǎn)量構(gòu)成因素受到遺傳和環(huán)境的共同調(diào)控,其中包括miRNA、轉(zhuǎn)錄因子以及下游靶基因。前人的研究表明SPL（SQUAMOSA PROMOTER BINDING-LIKE）轉(zhuǎn)錄因子可以調(diào)控水稻的分蘗、穗型以及籽粒大小等性狀,而SPL基因受到包括miR156和miR529a等miRNA的調(diào)控。水稻miR529a與miR156的序列具有很高的相似性,之前我們已經(jīng)預(yù)測(cè)到miR529a有5個(gè)SPL靶基因OsSPL2、OsSPL14、OsSPL16、OsSPL17和 OsSPL18。同時(shí),5個(gè)SPL基因也受到miR156的共同調(diào)控。之前的研究大多集中在miR156靶向SPL轉(zhuǎn)錄因子對(duì)水稻生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)控,本實(shí)驗(yàn)室通過(guò)過(guò)表達(dá)miR529a（miR529a-OE）也發(fā)現(xiàn)miR529a對(duì)水稻分蘗和穗型有影響。本研究通過(guò)構(gòu)建miR529a功能沉默型MIMIC載體（miR529a-MIMIC）,通過(guò)轉(zhuǎn)基因方法獲得轉(zhuǎn)基因株系,并且與野生型（WT... 

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圖２－１．轉(zhuǎn)基因植株的鑒定

期植株的ｍｉＲ５２９ａ的表達(dá)量，結(jié)果顯示，在ｍｉＲ５２９ａ－ＯＥ過(guò)表迗植株中ｍｉＲ５２９ａ??的表達(dá)顯著增加，比ＷＴ增加了?３０倍左右，而ｍｉＲ５２９ａ－ＭＩＭＩＣ植株中的ｍｉＲ５２９ａ??表達(dá)則降低了?２倍左右（圖２－３Ｃ）。由于ｍｉＲ１５６與ｍｉＲ５２９ａ的序列高度相似并且??有５個(gè)共同的靶基因，同時(shí)已有的研究表明，ｍｉＲ１５６主要作用于水稻營(yíng)養(yǎng)??生長(zhǎng)階段，特別是在分蘗期之前有非常高的表達(dá)，因此對(duì)ｍｉＲ１５６的表迖進(jìn)行檢??２１??

２．２．４?ｍｉＲ５２９ａ在分窠期對(duì)水箱的影響??隨著植株的生長(zhǎng)，過(guò)表達(dá)株系ｍｉＲ５２９ａ－ＯＥ與ＷＴ株高差距加大，而??ｍｉＲ５２９ａ－ＭＩＭＩＣ的株高逐漸超過(guò)ＷＴ。在分蘗期（圖２－４Ａ），ｍｉＲ５２９ａ－ＯＥ的株高??在６０ｃｍ左右，顯著低于ＷＴ的株高８２ｃｍ左右，而ｍｉＲ５２９ａ－ＭＩＭＩＣ的株高８６ｃｍ??左右，顯著高于ＷＴ。除株高外，分蘗數(shù)也出現(xiàn)了差異（圖２－４Ｂ），ｍｉＲ５２９ａ－ＯＥ??植株大約有４０個(gè)分蘗，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于ＷＴ的２３個(gè)分蘗，而ｍｉＲ５２９ａ－ＭＩＭＩＣ植株大??約有１８?jìng)�(gè)分蘗，顯著低于ＷＴ。在葉型上（圖２－４Ｃ），?ｍｉＲ５２９ａ－ＯＥ植株的葉片明??顯比野生型細(xì)窄，而ｍｉＲ５２９ａ－ＭＩＭＩＣ植株的葉片明顯比ＷＴ的寬。這些結(jié)果表??明，ｍｉＲ５２９ａ－ＯＥ和ｍｉＲ５２９ａ－ＭＩＭＩＣ的轉(zhuǎn)基因植株與ＷＴ在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)階段，特??別是分蘗期出現(xiàn)了明顯的表型差異。??２４??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]重穗型水稻植株抗倒伏能力的研究[J]. 馬均,馬文波,田彥華,楊建昌,周開(kāi)達(dá),朱慶森.  作物學(xué)報(bào). 2004(02)
[2]東北地區(qū)超級(jí)雜交粳稻倒伏性狀的研究[J]. 華澤田,郝憲彬,沈楓,張忠旭,王巖,王彥榮,馬秀芳.  沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2003(03)
[3]提高中國(guó)稻田氮肥利用率的研究策略[J]. 彭少兵,黃見(jiàn)良,鐘旭華,楊建昌,王光火,鄒應(yīng)斌,張福鎖,朱慶森,Roland Buresh,Christian Witt.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2002(09)



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