心力衰竭是多種心臟疾病的終末階段,而心肌梗死又是導致心力衰竭的一個重要的因素,心肌梗死后慢性心力衰竭的防治仍然是我國乃至全球重要的健康問題。惡性心律失常導致的心源性猝死是慢性心力衰竭的主要死亡原因之一,改善心肌細胞的電活動,降低惡性心律失常的發(fā)生是慢性心力衰竭患者改善預后、延長預期壽命,提高生活質(zhì)量的重要措施。本研究針對鈉通道蛋白Nav1.5,研究剪接因子RBM25和LUC7L3對SCN5A pre mRNA的剪接作用機制,以及這種異常剪接對心臟鈉通道功能的影響；通過利用siRNA慢病毒心肌原位注射干預RBM25/LUC7L3的表達,觀察基因干預是否可能成為降低Nav1.5相關惡性心律失常、提高生存率的有效治療手段。本研究的目的還在于觀察RAAS激活與RBM25表達的關系,探索RBM25剪接因子的升高是否是RAAS系統(tǒng)影響Natv1.5表達的又一機制；并通過卡托普利、纈沙坦等抑制RAAS,觀察能否通過降低RBM25表達以降低Nav1.5的異常剪接。我們的主要研究結果顯示：1)無論細胞或是動物水平上,RBM25/LUC7L3的表達與全長Nav1.5的表達呈負相關；2) siRNA慢病毒干... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：132 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１?－?１．各期納電流示意圖

圖６－?１?ＢＮＰ標準品配制過程??ｖｉｉ）陽性對照準備：快速離心陽性對照試劑，用ｌ〇（ＶＬ蒸偕水溶解，配成Ｉｔｅｍ?Ｍ。??向Ｉｔｅｍ?Ｍ中加入１０１（ＪｉＬ?ｌｘ?Ａｓｓａｙ?Ｄｉｌｕｅｎｔ，添加２｜ａＬ?１０倍稀釋Ｉｔｅｍ?Ｆ，配成２倍稀釋??

?０??ｐｇ／ｍｌ?ｐｇ／ｍｌ?ｐｇ／ｍｌ?ｐｇ／ｍｌ?ｐｇ／ｍｌ?ｐｇ／ｍｌ??圖６－?１?ＢＮＰ標準品配制過程??ｖｉｉ）陽性對照準備：快速離心陽性對照試劑，用ｌ〇（ＶＬ蒸偕水溶解，配成Ｉｔｅｍ?Ｍ。??向Ｉｔｅｍ?Ｍ中加入１０１（ＪｉＬ?ｌｘ?Ａｓｓａｙ?Ｄｉｌｕｅｎｔ，添加２｜ａＬ?１０倍稀釋Ｉｔｅｍ?Ｆ，配成２倍稀釋??陽性對照，充分混勻。本陽性對照是細胞培養(yǎng)上清液，預計信號強度為ｔｏｔｏｌ?ｂｉｎｄｉｎｇ??組的１０－３０％，本品可繼續(xù)稀釋使用，但必須保證最終溶液中的生物素標記ＢＮＰ的??濃度為ｌＯｐｇ／ｍＬ。??ｖｉｉｉ）若Ｉｔｅｍ?Ｂ（即２０?Ｘ洗徹含有可見晶體，將其均衡至室溫并輕柔震蕩使沉淀消??失。用去離子水將２〇ｍＬ的洗液稀釋成４〇ＯｍＬ的１?Ｘ洗液。??ｉｘ）樣品準備：用含有生物素標記ＢＮＰ的１?Ｘ?Ａｓｓａｙ?Ｄｉｌｕｅｎｔ?Ｅ稀釋樣品，包括血??清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液或其他樣品。必須保證每個樣品中的生物素標記ＢＮＰ??含量為ｌＯｐｇ／ｍＬ。例如，對樣品進行４倍稀釋時，混合２．５陣１〇倍稀釋ＩｔｅｍＦ，??１８５陣ＩＸ?Ａｓｓａｙ?Ｄｉｌｕｅｎｔ?￡１＾及６２．５沖樣品


本文編號：3208154