肝癌是世界上最常見(jiàn)的癌癥之一,是消化系統(tǒng)常見(jiàn)的惡性腫瘤,早期很難察覺(jué),一旦發(fā)現(xiàn)大多是晚期,死亡率極高。因此,早診斷早治療顯得尤為重要。腫瘤標(biāo)志物和基因檢測(cè)可用于癌癥的早期篩查。基因CYP1A1與癌癥的發(fā)生密切相關(guān),腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白（AFP）也是肝癌普查的重要指標(biāo)之一,因此檢測(cè)這兩種物質(zhì)具有重要意義。傳統(tǒng)的檢測(cè)SNP的方法依賴于凝膠電泳或基因測(cè)序技術(shù),對(duì)儀器要求高,限制了應(yīng)用范圍。廣泛用于臨床的AFP檢測(cè)方法有酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定、熒光免疫分析、質(zhì)譜等,這些方法靈敏度高,均能實(shí)現(xiàn)對(duì)血清中腫瘤標(biāo)志物的快速、準(zhǔn)確、半定量檢測(cè),但是儀器昂貴,需專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員操作,檢測(cè)成本高,不能實(shí)現(xiàn)即時(shí)檢測(cè)。因此,探索即時(shí)檢測(cè)方法具有研究?jī)r(jià)值。膠體金層析試紙條是一種基于比色法的檢測(cè)方法,利用膠體金的顏色深淺,實(shí)現(xiàn)裸眼半定量檢測(cè)。膠體金層析試紙條具有操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)快速、應(yīng)用成本低、能用于即時(shí)檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn),被廣泛用于醫(yī)學(xué)診斷、環(huán)境監(jiān)測(cè)和食品安全檢測(cè)等領(lǐng)域。酶信號(hào)放大技術(shù)是一種優(yōu)良的信號(hào)放大手段,利用酶的催化效果,能夠提高檢測(cè)的靈敏度。辣根過(guò)氧化物酶（HRP）能催化底物3-氨基-9-乙基咔唑（AEC）生成紅色不溶物,將H... 

【文章來(lái)源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 肝癌概述
    1.2 SNP及常見(jiàn)的檢測(cè)方法
    1.3 腫瘤標(biāo)志物AFP及檢測(cè)
    1.4 膠體金層析試紙條
    1.5 酶信號(hào)放大技術(shù)
    1.6 本研究的目的、意義及主要內(nèi)容
2 實(shí)驗(yàn)部分
    2.1 試劑和材料
    2.2 儀器
    2.3 制備膠體金
    2.4 制備膠體金標(biāo)記核酸探針
    2.5 制備膠體金雙標(biāo)記AFP抗體和核酸復(fù)合探針(Anti-AFP-AuNP-A-4)
    2.6 制備膠體金雙標(biāo)記HRP和核酸復(fù)合探針(HRP-AuNP-T-4)
    2.7 制備膠體金雙標(biāo)記AFP單抗和生物化核酸探針偶聯(lián)SA·HRP(Anti-AFP-AuNP-DNA-Biotin-SA·HRP)
    2.8 人類(lèi)基因組DNA的提取及相關(guān)片段單鏈擴(kuò)增
    2.9 膠體金層析試紙條的制備及組裝
    2.10 樣品檢測(cè)過(guò)程
    2.11 本章小結(jié)
3 結(jié)果與分析
    3.1 檢測(cè)策略
    3.2 膠體金雙標(biāo)記AFP單抗和生物化核酸偶聯(lián)SA·HRP(Anti-AFP-AuNP-DNA-Biotin-SA·HRP)檢測(cè)易感基因和AFP
    3.3 酶信號(hào)放大效果分析
    3.4 膠體金及金標(biāo)復(fù)合探針的表征
    3.5 優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件
    3.6 靈敏度
    3.7 選擇性
    3.8 重現(xiàn)性
    3.9 實(shí)際樣品的檢測(cè)
    3.10 本章小結(jié)
4 總結(jié)與展望
    4.1 全文總結(jié)
    4.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄1 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文目錄
附錄2 主要縮略詞表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]小地域范圍內(nèi)肝癌的空間流行病學(xué)特征分析[D]. 曲靜.山東大學(xué) 2018
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[5]CYP1A1基因多態(tài)性與新疆維、漢民族女性乳腺癌相關(guān)性研究[D]. 帕孜來(lái)提·阿布都熱西提（Pazilat Abdurixit）.新疆醫(yī)科大學(xué) 2016
[6]基于適配子的小肝癌診斷研究[D]. 黃增勇.南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院 2015
[7]原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者癌組織、癌旁肝組織及血清中HBV BCP區(qū)變異位點(diǎn)的研究[D]. 韓學(xué)文.蘇州大學(xué) 2013



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