肝癌是世界上最常見的癌癥之一,是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤,早期很難察覺,一旦發(fā)現(xiàn)大多是晚期,死亡率極高。因此,早診斷早治療顯得尤為重要。腫瘤標(biāo)志物和基因檢測可用于癌癥的早期篩查�；駽YP1A1與癌癥的發(fā)生密切相關(guān),腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白（AFP）也是肝癌普查的重要指標(biāo)之一,因此檢測這兩種物質(zhì)具有重要意義。傳統(tǒng)的檢測SNP的方法依賴于凝膠電泳或基因測序技術(shù),對儀器要求高,限制了應(yīng)用范圍。廣泛用于臨床的AFP檢測方法有酶聯(lián)免疫吸附測定、熒光免疫分析、質(zhì)譜等,這些方法靈敏度高,均能實現(xiàn)對血清中腫瘤標(biāo)志物的快速、準(zhǔn)確、半定量檢測,但是儀器昂貴,需專業(yè)技術(shù)人員操作,檢測成本高,不能實現(xiàn)即時檢測。因此,探索即時檢測方法具有研究價值。膠體金層析試紙條是一種基于比色法的檢測方法,利用膠體金的顏色深淺,實現(xiàn)裸眼半定量檢測。膠體金層析試紙條具有操作簡單、檢測快速、應(yīng)用成本低、能用于即時檢測等優(yōu)點,被廣泛用于醫(yī)學(xué)診斷、環(huán)境監(jiān)測和食品安全檢測等領(lǐng)域。酶信號放大技術(shù)是一種優(yōu)良的信號放大手段,利用酶的催化效果,能夠提高檢測的靈敏度。辣根過氧化物酶（HRP）能催化底物3-氨基-9-乙基咔唑（AEC）生成紅色不溶物,將H... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 肝癌概述
    1.2 SNP及常見的檢測方法
    1.3 腫瘤標(biāo)志物AFP及檢測
    1.4 膠體金層析試紙條
    1.5 酶信號放大技術(shù)
    1.6 本研究的目的、意義及主要內(nèi)容
2 實驗部分
    2.1 試劑和材料
    2.2 儀器
    2.3 制備膠體金
    2.4 制備膠體金標(biāo)記核酸探針
    2.5 制備膠體金雙標(biāo)記AFP抗體和核酸復(fù)合探針(Anti-AFP-AuNP-A-4)
    2.6 制備膠體金雙標(biāo)記HRP和核酸復(fù)合探針(HRP-AuNP-T-4)
    2.7 制備膠體金雙標(biāo)記AFP單抗和生物化核酸探針偶聯(lián)SA·HRP(Anti-AFP-AuNP-DNA-Biotin-SA·HRP)
    2.8 人類基因組DNA的提取及相關(guān)片段單鏈擴增
    2.9 膠體金層析試紙條的制備及組裝
    2.10 樣品檢測過程
    2.11 本章小結(jié)
3 結(jié)果與分析
    3.1 檢測策略
    3.2 膠體金雙標(biāo)記AFP單抗和生物化核酸偶聯(lián)SA·HRP(Anti-AFP-AuNP-DNA-Biotin-SA·HRP)檢測易感基因和AFP
    3.3 酶信號放大效果分析
    3.4 膠體金及金標(biāo)復(fù)合探針的表征
    3.5 優(yōu)化實驗條件
    3.6 靈敏度
    3.7 選擇性
    3.8 重現(xiàn)性
    3.9 實際樣品的檢測
    3.10 本章小結(jié)
4 總結(jié)與展望
    4.1 全文總結(jié)
    4.2 展望
致謝
參考文獻
附錄1 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文目錄
附錄2 主要縮略詞表


【參考文獻】：
期刊論文
[1]中國2003-2007年肝癌發(fā)病率與死亡率分析[J]. 陳建國,陳萬青,張思維,鄭榮壽,朱健,張永輝.  中華流行病學(xué)雜志. 2012 (06)
[2]中國人群肝癌的易感基因研究[J]. 周鋼橋,賀福初,張紅星.  中國科學(xué):生命科學(xué). 2011(10)
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博士論文
[1]新型血清肝臟腫瘤標(biāo)志物研究及肝癌診斷模型建立[D]. 李波.中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院 2016
[2]基于熒光淬滅的SNP檢測方法的建立及應(yīng)用[D]. 徐祎春.華東理工大學(xué) 2016

碩士論文
[1]小地域范圍內(nèi)肝癌的空間流行病學(xué)特征分析[D]. 曲靜.山東大學(xué) 2018
[2]環(huán)境因素及母親CYP1A1、CYP17A1基因多態(tài)性與子代單純性尿道下裂發(fā)病研究[D]. 張康.沈陽醫(yī)學(xué)院 2018
[3]基于高通量數(shù)據(jù)對宮頸癌和肝癌標(biāo)志物的研究[D]. 陳謙.廣西醫(yī)科大學(xué) 2017
[4]甲胎蛋白與原發(fā)性肝癌患者術(shù)后預(yù)后相關(guān)性分析[D]. 王仕模.天津醫(yī)科大學(xué) 2017
[5]CYP1A1基因多態(tài)性與新疆維、漢民族女性乳腺癌相關(guān)性研究[D]. 帕孜來提·阿布都熱西提（Pazilat Abdurixit）.新疆醫(yī)科大學(xué) 2016
[6]基于適配子的小肝癌診斷研究[D]. 黃增勇.南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院 2015
[7]原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者癌組織、癌旁肝組織及血清中HBV BCP區(qū)變異位點的研究[D]. 韓學(xué)文.蘇州大學(xué) 2013



本文編號：3206488