【目的】將毛白楊編碼4CL1（4-香豆酸輔酶A連接酶）和CCR （香豆酰輔酶A還原酶）的基因連接在一起形成融合基因4CL1-CCR,在體外對其編碼的融合酶4CL1-CCR進(jìn)行活性分析,發(fā)現(xiàn)此融合酶具有4CL1和CCR的催化活性,并在大腸桿菌體內(nèi)證明4CL1-CCR可以高效催化香豆酸等酚酸生成相應(yīng)的醛。在前期研究基礎(chǔ)上,本研究將融合基因轉(zhuǎn)化煙草,對轉(zhuǎn)基因煙草植株的木質(zhì)素各單體的組成和木質(zhì)部形態(tài)進(jìn)行分析,以揭示融合基因在植物體內(nèi)的功能。【方法】用硫酸解法結(jié)合GC-MS分析煙草莖中各個單體的含量;間苯三酚染色法和木質(zhì)素由紫外激發(fā)熒光法用于觀測細(xì)胞的木質(zhì)化狀態(tài);并通過半定量PCR法對轉(zhuǎn)基因煙草中參與木質(zhì)素合成關(guān)鍵基因的表達(dá)進(jìn)行分析�！窘Y(jié)果】與野生型煙草相比,轉(zhuǎn)基因煙草莖中木質(zhì)素G+S總量增加10.89%～36.44%;其中轉(zhuǎn)基因煙草中G型木質(zhì)素單體含量顯著增多,S型單體含量無明顯變化。顯微結(jié)構(gòu)觀察可見,轉(zhuǎn)基因煙草木質(zhì)部寬度增加,細(xì)胞壁顯著增厚,木質(zhì)素沉積狀態(tài)沒有變化,表現(xiàn)為高密度木質(zhì)素區(qū)域仍然為細(xì)胞角隅和復(fù)合胞間層,而低密度區(qū)域?yàn)榇紊?xì)胞壁。半定量PCR分析顯示在轉(zhuǎn)基因煙草中C3H、CAD和C... 

【文章來源】：林業(yè)科學(xué). 2020,56(10)北大核心EICSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)材料
    1.2 試驗(yàn)方法
        1.2.1 煙草的轉(zhuǎn)化及分子鑒定
        1.2.2 煙草的木質(zhì)素單體含量測定
        1.2.3 煙草的解剖結(jié)構(gòu)觀察
        1.2.4 煙草莖的木質(zhì)素合成基因半定量PCR
2 結(jié)果與分析
    2.1 葉盤法獲得煙草轉(zhuǎn)基因植株的分子鑒定
    2.2 轉(zhuǎn)基因煙草木質(zhì)素單體含量分析
    2.3 轉(zhuǎn)基因煙草莖的解剖分析
    2.4 木質(zhì)素生物合成相關(guān)基因的半定量PCR分析
3 討論
4 結(jié)論



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