發(fā)布時(shí)間：2021-05-25 16:22

　　花斑葉突變體是葉綠體發(fā)育研究的重要材料。在本研究中,從課題組前期構(gòu)建的EMS誘變黃瓜突變體庫(kù)中篩選出了一個(gè)黃瓜花斑葉突變體,經(jīng)過(guò)多代自交花斑葉性狀能夠穩(wěn)定遺傳,命名為Csv1。Csv1突變體葉片表現(xiàn)為與正常綠色葉片不同的花斑表型,即在同一葉片中黃、白、淡綠及正常綠色區(qū)域隨機(jī)分布,且花斑的嚴(yán)重程度隨著光強(qiáng)和發(fā)育而變化。本研究對(duì)Csv1突變體及其野生型的主要農(nóng)藝學(xué)性狀進(jìn)行觀察和比較,對(duì)黃瓜花斑葉性狀進(jìn)行遺傳分析,并利用基因組重測(cè)序、MutMap和基因分型等技術(shù)對(duì)花斑葉候選基因進(jìn)行鑒定。此外,通過(guò)RNA-seq技術(shù)比較Csvl突變體和野生型葉片的差異表達(dá)基因,篩選出黃瓜花斑葉發(fā)育相關(guān)基因。主要研究結(jié)果如下:（1）表型鑒定1)突變體植株與野生型植株的葉片特征、植株整體特征、花態(tài)特征差異在整個(gè)生長(zhǎng)周期中,野生型植株每個(gè)節(jié)位的葉片都呈現(xiàn)為正常的綠色,而在Csvl突變體中,當(dāng)?shù)谝黄嫒~生長(zhǎng)至3 cm左右時(shí),葉片開始表現(xiàn)出花斑。與野生型相比,Csvl突變體的葉長(zhǎng)、葉寬、葉面積顯著減小。此外,與野生型相比,Csvl突變體的株高、莖粗、節(jié)位數(shù)、節(jié)間長(zhǎng)度和分枝數(shù)都顯著降低;雌花和雄花的形態(tài)異常。2)突變體植... 

【文章來(lái)源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 不同作物中雜色突變體的研究進(jìn)展
        1.1.1 擬南芥花斑葉突變體
        1.1.2 觀賞植物雜色葉突變體
        1.1.3 大田作物雜色葉突變體
        1.1.4 其他作物雜色葉突變體
    1.2 Mutmap技術(shù)在黃瓜基因定位中的應(yīng)用
    1.3 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)在雜色葉植物中的應(yīng)用
    1.4 研究的目的與意義
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 研究意義
    1.5 研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線
        1.5.1 研究?jī)?nèi)容
        1.5.2 技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
    2.2 研究方法
        2.2.1 表型鑒定及相關(guān)生理指標(biāo)測(cè)定
        2.2.2 遺傳分析
        2.2.3 全基因組重測(cè)序及SNP篩選
        2.2.4 候選基因位點(diǎn)驗(yàn)證
        2.2.5 RNA提取及cDNA合成
        2.2.6 qRT-PCR分析
        2.2.7 黃瓜Cscs基因的RNAi載體構(gòu)建
        2.2.8 農(nóng)桿菌介導(dǎo)遺傳轉(zhuǎn)化
        2.2.9 黃瓜花斑葉突變體與野生型葉片轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 黃瓜花斑葉突變體表型鑒定
        3.1.1 黃瓜花斑葉突變體的表型特征鑒定
        3.1.2 黃瓜花斑葉突變體的葉綠體超微結(jié)構(gòu)觀察
        3.1.3 黃瓜花斑葉突變體主要農(nóng)藝學(xué)性狀觀察
    3.2 黃瓜花斑葉突變體生理特性分析
        3.2.1 黃瓜花斑葉突變體葉綠素含量測(cè)定
        3.2.2 黃瓜花斑葉突變體光合參數(shù)測(cè)定
        3.2.3 黃瓜花斑葉突變體葉綠素?zé)晒鈪?shù)測(cè)定
        3.2.4 光照對(duì)黃瓜花斑葉突變體影響分析
    3.3 黃瓜花斑葉表型遺傳分析
    3.4 黃瓜花斑葉候選基因鑒定
        3.4.1 候選基因初步鑒定
        3.4.2 候選基因驗(yàn)證
    3.5 黃瓜花斑葉突變體候選基因序列及表達(dá)模式分析
        3.5.1 生物信息學(xué)分析
        3.5.2 基因表達(dá)分析
    3.6 黃瓜Cscs基因的RNAi載體構(gòu)建
    3.7 黃瓜花斑葉突變體與野生型葉片的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析
        3.7.1 測(cè)序數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
        3.7.2 差異表達(dá)分析
        3.7.3 GO功能和KEGG顯著性富集分析
        3.7.4 差異表達(dá)基因功能分類
4 討論
    4.1 黃瓜花斑葉突變體的特征分析
    4.2 黃瓜花斑葉突變機(jī)制推測(cè)
    4.3 黃瓜花斑葉突變體與野生型葉片的差異表達(dá)基因分析
    4.4 總結(jié)與展望
5 結(jié)論
    5.1 黃瓜花斑葉突變體的表型及生理特征
    5.2 黃瓜花斑葉突變體基因鑒定
    5.3 黃瓜花斑葉突變體與野生型轉(zhuǎn)錄差異表達(dá)
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[2]花葉矢竹葉色變異機(jī)理研究[D]. 楊海蕓.北京林業(yè)大學(xué) 2015

碩士論文
[1]銀杏變異斑葉呈色機(jī)理研究[D]. 楊舜博.揚(yáng)州大學(xué) 2018
[2]番茄雜色葉基因vg的遺傳定位分析[D]. 郭麗杰.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]水稻斑馬葉表型突變性狀的發(fā)生規(guī)律與遺傳生理基礎(chǔ)研究[D]. 左西龍.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[4]黃瓜EMS誘變突變體庫(kù)及TILLING平臺(tái)的初步構(gòu)建[D]. 薛存寶.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[5]文心蘭淺綠條紋突變體的生理及分子基礎(chǔ)研究[D]. 田韋韋.中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院 2016
[6]擬南芥質(zhì)體和細(xì)胞核之間協(xié)調(diào)機(jī)制的初步分析[D]. 錢野.浙江大學(xué) 2005



本文編號(hào)：3205645