朱砂葉螨Tetranychus cinnabarinus（Boisduval）隸屬于蛛形綱、蜱螨亞綱、葉螨科,是一種世界性的農(nóng)業(yè)害螨,會危害豆類、棉花、蔬菜和果樹等經(jīng)濟作物以及觀賞植物。長期以來,對朱砂葉螨的防治主要以化學藥劑為主,在應對環(huán)境脅迫時,機體內抗氧化酶在生理生化方面會發(fā)生一系列變化,而對于抗氧化酶基因在分子水平上的變化尚不清楚。本文以朱砂葉螨為研究對象,運用RT-PCR結合RACE技術克隆得到了朱砂葉螨3個超氧化物歧化酶SOD基因cDNA的全長,并進行了序列分析,并且通過qRT-PCR技術研究SOD基因在逆境脅迫下的mRNA表達水平,主要研究結果如下:一、朱砂葉螨超氧化物歧化酶基因序列的特征分析克隆得到了朱砂葉螨細胞質Cu/ZnSOD、細胞外Cu/ZnSOD和線粒體MnSOD的cDNA全長,分別命名為TcSOD1,TcSOD2和TcSOD3。TcSOD1基因GenBank登錄號為KY348746,全長827 bp,其中開放閱讀框（ORF）長為459 bp,編碼152 aa,分子質量約為15.559 kDa,理論等電點pI為6.02,其氨基酸序列包含2個簽名基序,分別是43-... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 引言
    1.1 朱砂葉螨的研究現(xiàn)狀
        1.1.1 朱砂葉螨生物學特征
        1.1.2 朱砂葉螨的抗性研究
        1.1.3 朱砂葉螨的防治
    1.2 超氧化物歧化酶基因的研究進展
        1.2.1 超氧化物歧化酶概述
        1.2.2 SOD的分子結構、理化性質和三維結構
        1.2.3 SOD基因研究進展
    1.3 本研究的意義及主要內容
        1.3.1 本研究的意義
        1.3.2 本研究的主要內容
第2章 朱砂葉螨超氧化物歧化酶基因的克隆及分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 供試螨源
        2.1.2 主要儀器和試劑
        2.1.3 朱砂葉螨總RNA的提取
        2.1.4 cDNA第一鏈的合成
        2.1.5 朱砂葉螨5’和3’RACE cDNA的準備
        2.1.6 朱砂葉螨SOD基因全長的克隆
        2.1.7 三種SOD基因全長的獲得及生物信息學分析
        2.1.8 朱砂葉螨SOD基因的同源性和系統(tǒng)發(fā)育分析
    2.2 結果與分析
        2.2.1 朱砂葉螨Tc SOD基因全長的克隆
        2.2.2 朱砂葉螨Tc SOD基因全長的生物信息學分析
        2.2.3 Tc SOD的同源性與系統(tǒng)發(fā)育分析
    2.3 討論
第3章 朱砂葉螨Tc SOD在環(huán)境脅迫下的mRNA表達特性
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試螨源
        3.1.2 主要儀器和試劑
        3.1.3 朱砂葉螨樣品的收集
        3.1.4 不同溫度處理雌成螨
        3.1.5 不同殺螨劑處理雌成螨
        3.1.6 總RNA提取
        3.1.7 cDNA第一鏈的合成
        3.1.8 RT-qPCR引物設計
        3.1.9 RT-qPCR檢測不同逆境脅迫下SOD表達水平
        3.1.10 熒光定量數(shù)據(jù)分析
    3.2 結果與分析
        3.2.1 熒光定量PCR溶解曲線
        3.2.2 溫度脅迫下Tc SOD的表達研究
        3.2.3 不同殺螨劑脅迫下Tc SOD的表達研究
    3.3 討論
第4章 結論與展望
    4.1 結論
    4.2 展望
致謝
參考文獻
攻讀學位期間的研究成果


【參考文獻】：
期刊論文
[1]朱砂葉螨的識別與防治[J]. 王澤華,宮亞軍,魏書軍,康總江,朱亮,金桂華,石寶才.  中國蔬菜. 2013(05)
[2]中華蜜蜂銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆、序列分析及表達特征[J]. 劉俊峰,劉亭亭,王歡,王子龍,顏偉玉,曾志將,吳小波.  動物營養(yǎng)學報. 2012(08)
[3]柞蠶銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆與表達分析[J]. 姚立虎,朱保建,劉朝良,魏國清,吳祥,曹甲,錢岑,湯良文,周炎.  蠶業(yè)科學. 2009(03)
[4]我國朱砂葉螨研究進展[J]. 劉波,桂連友.  長江大學學報(自科版)農(nóng)學卷. 2007(03)
[5]超氧化物歧化酶研究和應用進展[J]. 李敬璽,劉繼蘭,王選年,銀梅,葛亞明,唐海蓉.  動物醫(yī)學進展. 2007(07)
[6]野桑蠶銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆分析與原核表達[J]. 叢海峰,徐世清,司馬楊虎,張升祥,王更先,董航,劉瑩,柳學廣.  蠶業(yè)科學. 2007(02)
[7]粘蟲膠防治冬棗紅蜘蛛的效果[J]. 巴秀成,王小夢,常會紅,周霞.  中國南方果樹. 2007(02)
[8]用自助法統(tǒng)計推斷炔螨特對桑樹朱砂葉螨的防治效果[J]. 吳福安,余茂德,王興科,程嘉翎.  蠶業(yè)科學. 2006(04)
[9]利用SPSS軟件計算殺蟲劑的LC50[J]. 賈春生.  昆蟲知識. 2006(03)
[10]不同寄主植物對二斑葉螨和朱砂葉螨發(fā)育歷期和產(chǎn)卵量的影響[J]. 馬俐,賈煒,洪曉月,王冬生.  南京農(nóng)業(yè)大學學報. 2005(04)

博士論文
[1]朱砂葉螨對苯甲�；孱悮⑾x劑脅迫的響應及機制研究[D]. 辛天蓉.南昌大學 2015

碩士論文
[1]柑桔全爪螨超氧化物歧化酶基因克隆與功能初探[D]. 馮英財.西南大學 2016
[2]煙粉虱超氧化物歧化酶功能基因研究[D]. 高現(xiàn)龍.浙江大學 2013
[3]朱砂葉螨酯酶同工酶研究及酯酶cDNA克隆與序列分析[D]. 曹小芳.西南農(nóng)業(yè)大學 2005



本文編號：3203721