多抗轉(zhuǎn)基因馬鈴薯植株的獲得及農(nóng)桿菌介導試管薯遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化
發(fā)布時間:2021-05-10 13:23
以馬鈴薯品種隴薯11號試管薯為受體材料,通過農(nóng)桿菌介導法,將PVX、PVS、PVY和PLRV 4種病毒CP融合基因?qū)腭R鈴薯,并對影響遺傳轉(zhuǎn)化的因素進行了優(yōu)化。結(jié)果表明,薯片分化和生根階段的選擇壓分別為Kan 50、75 mg/L,薯片分化和生根階段有效抑菌濃度分別為Cb 500、200 mg/L,農(nóng)桿菌活化時間為4.5 h、侵染時間為7 min、共培養(yǎng)時間為2 d時利于遺傳轉(zhuǎn)化。通過該體系將4種病毒CP融合基因?qū)腭R鈴薯,獲得了具卡那霉素抗性的轉(zhuǎn)化植株,經(jīng)PCR檢測,外源基因已導入馬鈴薯基因組中。
【文章來源】:甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2020,(11)
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.2 培養(yǎng)基
1.3 轉(zhuǎn)化外植體的獲得
1.4 遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化
1.4.1 誘導芽與生根選擇壓確定
1.4.2 農(nóng)桿菌工程菌生長曲線
1.4.3 侵染時間
1.4.4 共培養(yǎng)時間
1.4.5 抑菌劑濃度
1.5 轉(zhuǎn)基因植株鑒定
2 結(jié)果與分析
2.1 Kan濃度對試管薯片芽分化及生根的影響
2.2 農(nóng)桿菌工程菌活化時間確定
2.3 侵染時間對轉(zhuǎn)化的影響
2.4 共培養(yǎng)時間對轉(zhuǎn)化的影響
2.5 Cb對轉(zhuǎn)化的影響
2.6 轉(zhuǎn)基因植株的PCR檢測
3 小結(jié)與討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]NaCl脅迫對馬鈴薯試管苗POD酶活性及同工酶的影響[J]. 裴懷弟,劉潤萍,林玉紅,李淑潔,呂汰. 甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2020(06)
[2]種植方式對高寒陰濕旱作區(qū)馬鈴薯的影響[J]. 羅愛花,陸立銀,胡新元,謝奎忠,柳永強,孫小花. 甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2020(Z1)
[3]四價抗馬鈴薯病毒植物表達載體構(gòu)建及其對煙草的轉(zhuǎn)化[J]. 陳曉艷,孟亞雄,賈小霞,張武,劉石,郭玉美,齊恩芳. 廣西植物. 2017(01)
[4]‘隴薯3號’和‘隴薯7號’試管結(jié)薯關(guān)鍵條件優(yōu)化[J]. 齊恩芳,王一航,文國宏,賈小霞. 中國馬鈴薯. 2015(03)
[5]轉(zhuǎn)錄因子DREB1A基因和Bar基因雙價植物表達載體的構(gòu)建及對馬鈴薯遺傳轉(zhuǎn)化的研究[J]. 賈小霞,齊恩芳,王一航,文國宏,龔成文,王紅梅,李建武,馬勝,胡新元. 草業(yè)學報. 2014(03)
[6]CryⅢA基因植物表達載體構(gòu)建及馬鈴薯遺傳轉(zhuǎn)化[J]. 尤佳,張寧,文義凱,吳家和,司懷軍,王蒂. 草業(yè)學報. 2014(01)
[7]馬鈴薯淀粉體表達載體的構(gòu)建及其轉(zhuǎn)基因植物的培養(yǎng)[J]. 李珺,馬力通. 江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2013(08)
[8]馬鈴薯試管薯誘導及其遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化[J]. 李有忠,劉海英,張寧,司懷軍,王蒂. 生物技術(shù). 2008(03)
[9]抗菌肽基因?qū)腭R鈴薯“甘農(nóng)薯1號”的初步研究[J]. 邢小萍. 甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2004(11)
[10]根癌農(nóng)桿菌介導的馬鈴薯高效遺傳轉(zhuǎn)化體系的研究[J]. 張寧,司懷軍,李學才,王蒂. 中國馬鈴薯. 2004(03)
博士論文
[1]利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育馬鈴薯(Solanum tuberosum L.)高淀粉及抗病新品系[D]. 賈笑英.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2006
碩士論文
[1]馬鈴薯再生體系的建立及遺傳轉(zhuǎn)化的研究[D]. 李晶.東北農(nóng)業(yè)大學 2003
本文編號:3179440
【文章來源】:甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2020,(11)
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 試驗材料
1.2 培養(yǎng)基
1.3 轉(zhuǎn)化外植體的獲得
1.4 遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化
1.4.1 誘導芽與生根選擇壓確定
1.4.2 農(nóng)桿菌工程菌生長曲線
1.4.3 侵染時間
1.4.4 共培養(yǎng)時間
1.4.5 抑菌劑濃度
1.5 轉(zhuǎn)基因植株鑒定
2 結(jié)果與分析
2.1 Kan濃度對試管薯片芽分化及生根的影響
2.2 農(nóng)桿菌工程菌活化時間確定
2.3 侵染時間對轉(zhuǎn)化的影響
2.4 共培養(yǎng)時間對轉(zhuǎn)化的影響
2.5 Cb對轉(zhuǎn)化的影響
2.6 轉(zhuǎn)基因植株的PCR檢測
3 小結(jié)與討論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]NaCl脅迫對馬鈴薯試管苗POD酶活性及同工酶的影響[J]. 裴懷弟,劉潤萍,林玉紅,李淑潔,呂汰. 甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2020(06)
[2]種植方式對高寒陰濕旱作區(qū)馬鈴薯的影響[J]. 羅愛花,陸立銀,胡新元,謝奎忠,柳永強,孫小花. 甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2020(Z1)
[3]四價抗馬鈴薯病毒植物表達載體構(gòu)建及其對煙草的轉(zhuǎn)化[J]. 陳曉艷,孟亞雄,賈小霞,張武,劉石,郭玉美,齊恩芳. 廣西植物. 2017(01)
[4]‘隴薯3號’和‘隴薯7號’試管結(jié)薯關(guān)鍵條件優(yōu)化[J]. 齊恩芳,王一航,文國宏,賈小霞. 中國馬鈴薯. 2015(03)
[5]轉(zhuǎn)錄因子DREB1A基因和Bar基因雙價植物表達載體的構(gòu)建及對馬鈴薯遺傳轉(zhuǎn)化的研究[J]. 賈小霞,齊恩芳,王一航,文國宏,龔成文,王紅梅,李建武,馬勝,胡新元. 草業(yè)學報. 2014(03)
[6]CryⅢA基因植物表達載體構(gòu)建及馬鈴薯遺傳轉(zhuǎn)化[J]. 尤佳,張寧,文義凱,吳家和,司懷軍,王蒂. 草業(yè)學報. 2014(01)
[7]馬鈴薯淀粉體表達載體的構(gòu)建及其轉(zhuǎn)基因植物的培養(yǎng)[J]. 李珺,馬力通. 江蘇農(nóng)業(yè)科學. 2013(08)
[8]馬鈴薯試管薯誘導及其遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化[J]. 李有忠,劉海英,張寧,司懷軍,王蒂. 生物技術(shù). 2008(03)
[9]抗菌肽基因?qū)腭R鈴薯“甘農(nóng)薯1號”的初步研究[J]. 邢小萍. 甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2004(11)
[10]根癌農(nóng)桿菌介導的馬鈴薯高效遺傳轉(zhuǎn)化體系的研究[J]. 張寧,司懷軍,李學才,王蒂. 中國馬鈴薯. 2004(03)
博士論文
[1]利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育馬鈴薯(Solanum tuberosum L.)高淀粉及抗病新品系[D]. 賈笑英.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2006
碩士論文
[1]馬鈴薯再生體系的建立及遺傳轉(zhuǎn)化的研究[D]. 李晶.東北農(nóng)業(yè)大學 2003
本文編號:3179440
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