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多抗轉(zhuǎn)基因馬鈴薯植株的獲得及農(nóng)桿菌介導(dǎo)試管薯遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化

發(fā)布時(shí)間:2021-05-10 13:23
  以馬鈴薯品種隴薯11號(hào)試管薯為受體材料,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法,將PVX、PVS、PVY和PLRV 4種病毒CP融合基因?qū)腭R鈴薯,并對(duì)影響遺傳轉(zhuǎn)化的因素進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明,薯片分化和生根階段的選擇壓分別為Kan 50、75 mg/L,薯片分化和生根階段有效抑菌濃度分別為Cb 500、200 mg/L,農(nóng)桿菌活化時(shí)間為4.5 h、侵染時(shí)間為7 min、共培養(yǎng)時(shí)間為2 d時(shí)利于遺傳轉(zhuǎn)化。通過該體系將4種病毒CP融合基因?qū)腭R鈴薯,獲得了具卡那霉素抗性的轉(zhuǎn)化植株,經(jīng)PCR檢測(cè),外源基因已導(dǎo)入馬鈴薯基因組中。 

【文章來源】:甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2020,(11)

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)材料
    1.2 培養(yǎng)基
    1.3 轉(zhuǎn)化外植體的獲得
    1.4 遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化
        1.4.1 誘導(dǎo)芽與生根選擇壓確定
        1.4.2 農(nóng)桿菌工程菌生長(zhǎng)曲線
        1.4.3 侵染時(shí)間
        1.4.4 共培養(yǎng)時(shí)間
        1.4.5 抑菌劑濃度
    1.5 轉(zhuǎn)基因植株鑒定
2 結(jié)果與分析
    2.1 Kan濃度對(duì)試管薯片芽分化及生根的影響
    2.2 農(nóng)桿菌工程菌活化時(shí)間確定
    2.3 侵染時(shí)間對(duì)轉(zhuǎn)化的影響
    2.4 共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)轉(zhuǎn)化的影響
    2.5 Cb對(duì)轉(zhuǎn)化的影響
    2.6 轉(zhuǎn)基因植株的PCR檢測(cè)
3 小結(jié)與討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]NaCl脅迫對(duì)馬鈴薯試管苗POD酶活性及同工酶的影響[J]. 裴懷弟,劉潤(rùn)萍,林玉紅,李淑潔,呂汰.  甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2020(06)
[2]種植方式對(duì)高寒陰濕旱作區(qū)馬鈴薯的影響[J]. 羅愛花,陸立銀,胡新元,謝奎忠,柳永強(qiáng),孫小花.  甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2020(Z1)
[3]四價(jià)抗馬鈴薯病毒植物表達(dá)載體構(gòu)建及其對(duì)煙草的轉(zhuǎn)化[J]. 陳曉艷,孟亞雄,賈小霞,張武,劉石,郭玉美,齊恩芳.  廣西植物. 2017(01)
[4]‘隴薯3號(hào)’和‘隴薯7號(hào)’試管結(jié)薯關(guān)鍵條件優(yōu)化[J]. 齊恩芳,王一航,文國(guó)宏,賈小霞.  中國(guó)馬鈴薯. 2015(03)
[5]轉(zhuǎn)錄因子DREB1A基因和Bar基因雙價(jià)植物表達(dá)載體的構(gòu)建及對(duì)馬鈴薯遺傳轉(zhuǎn)化的研究[J]. 賈小霞,齊恩芳,王一航,文國(guó)宏,龔成文,王紅梅,李建武,馬勝,胡新元.  草業(yè)學(xué)報(bào). 2014(03)
[6]CryⅢA基因植物表達(dá)載體構(gòu)建及馬鈴薯遺傳轉(zhuǎn)化[J]. 尤佳,張寧,文義凱,吳家和,司懷軍,王蒂.  草業(yè)學(xué)報(bào). 2014(01)
[7]馬鈴薯淀粉體表達(dá)載體的構(gòu)建及其轉(zhuǎn)基因植物的培養(yǎng)[J]. 李珺,馬力通.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(08)
[8]馬鈴薯試管薯誘導(dǎo)及其遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化[J]. 李有忠,劉海英,張寧,司懷軍,王蒂.  生物技術(shù). 2008(03)
[9]抗菌肽基因?qū)腭R鈴薯“甘農(nóng)薯1號(hào)”的初步研究[J]. 邢小萍.  甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2004(11)
[10]根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的馬鈴薯高效遺傳轉(zhuǎn)化體系的研究[J]. 張寧,司懷軍,李學(xué)才,王蒂.  中國(guó)馬鈴薯. 2004(03)

博士論文
[1]利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育馬鈴薯(Solanum tuberosum L.)高淀粉及抗病新品系[D]. 賈笑英.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006

碩士論文
[1]馬鈴薯再生體系的建立及遺傳轉(zhuǎn)化的研究[D]. 李晶.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003



本文編號(hào):3179440

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