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大白豬和從江香豬PGAM2基因克隆及表達(dá)水平的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-05-09 14:25
  為了探究磷酸甘油酸變位酶(Phosphog20lyce20rate20mutase,PGAM)mRNA在從江香豬和大白豬不同組織中的表達(dá)情況,揭示其在肌肉類型磷酸甘油酸變位酶(PGAM2)基因表達(dá)規(guī)律,筆者以大白豬和從江香豬作為實(shí)驗(yàn)動物,分別提取心臟、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟、胃、大腸、小腸、背最長肌、脂肪等10個(gè)組織的總RNA,設(shè)計(jì)各自實(shí)時(shí)熒光定量引物,擴(kuò)增CDS區(qū)序列,以豬GAPDH基因作為內(nèi)參基因,應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測PGAM2基因不同組織中mRNA的相對表達(dá)量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),貴州從江香豬和大白豬PGAM2基因長度均為91320bp的ORF序列,其中CDS區(qū)長度為76220bp,并發(fā)現(xiàn)在從江香豬PGAM2基因的CDS序列存在2個(gè)堿基突變:A235G、A613G,均屬同義突變,和大白豬相比存在A235G一處突變。PGAM2基因在從江香豬和大白豬背最長肌組織中的表達(dá)水平極顯著(P<0.01)高于其他組織。本研究為PGAM2基因后續(xù)真核表達(dá)的研究提供了理論依據(jù)。 

【文章來源】:當(dāng)代畜牧. 2020,(08)

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 試驗(yàn)材料與方法
    1.1 樣本采集
    1.2 引物的設(shè)計(jì)與合成
    1.3 總RNA提取以及c DNA第一條鏈合成
    1.4 PGAM2基因CDS區(qū)的克隆
    1.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
    1.6 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 CDS區(qū)擴(kuò)增與TA克隆
    2.2 PGAM2基因序列分析
    2.3 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物檢測
    2.4 q RT-PCR產(chǎn)物特異性分析
    2.5 PGAM2在不同組織中表達(dá)分析
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]香豬的種質(zhì)特性[J]. 劉培瓊,劉若余,燕志宏,張依裕,諶宏光.  中國豬業(yè). 2013(S1)
[2]香豬肌肉中的脂肪酸分析及其營養(yǎng)價(jià)值評價(jià)[J]. 張藝,劉培瓊,羅愛平.  養(yǎng)豬. 2008(06)
[3]豬PGAM2基因的克隆、序列特征及表達(dá)分析[J]. 伍曉雄,唐中林,李勇,楊述林,儲明星,馬月輝,李奎.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2008(09)
[4]從江香豬生長發(fā)育繁殖性能測定[J]. 申學(xué)林,楊秀江,韋勝權(quán).  中國畜禽種業(yè). 2007(11)



本文編號:3177466

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