黃姑魚的偽雄魚誘導(dǎo)及其性別相關(guān)基因的篩查分析
發(fā)布時間:2021-05-08 02:38
黃姑魚(Nibea albiflora)是我國重要的海水養(yǎng)殖魚類,具有生長快、適應(yīng)性廣,抗逆性強等優(yōu)點。在養(yǎng)殖中黃姑魚的雌魚比雄魚生長快,因此研究黃姑魚的性別控制及其性別決定機制,對于培育全雌黃姑魚新品種具有重要意義。本研究優(yōu)化了黃姑魚偽雄魚的誘導(dǎo)方法,同時利用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)分析了其性別決定相關(guān)的基因,研究結(jié)果如下:1.通過投喂不同劑量的來曲唑(10/100 mg/kg)以及17α-甲基睪酮(MT,10 mg/kg)來誘導(dǎo)雌核發(fā)育黃姑魚發(fā)生性逆轉(zhuǎn)。實驗設(shè)置了正常黃姑魚和雌核發(fā)育黃姑魚為對照組,分析不同處理組的生長性能、性比、性腺組織學(xué)結(jié)構(gòu)等,進而篩選和優(yōu)化誘導(dǎo)偽雄魚的適宜方法。結(jié)果表明來曲唑(10/100 mg/kg)可以成功誘導(dǎo)雌核發(fā)育黃姑魚100%逆轉(zhuǎn)為表型雄魚,同時還有促進精子生成的作用,但在處理期間對黃姑魚的生長有輕微的抑制作用。經(jīng)組織切片觀察發(fā)現(xiàn)使用來曲唑誘導(dǎo)后的性腺均具有正常的精巢結(jié)構(gòu),發(fā)育良好,且在誘導(dǎo)處理結(jié)束后仍舊保持其正常精巢結(jié)構(gòu),但是MT組具有一定比例的異常發(fā)育性腺,部分精巢內(nèi)出現(xiàn)空泡化等毒理現(xiàn)象。此外,在150日齡及210日齡(處理結(jié)束)的性腺成熟指數(shù)也顯示處理組...
【文章來源】:浙江海洋大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:73 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
中英文縮寫對照表
第一章 引言
1.1 魚類的性別決定與分化
1.1.1 遺傳型性別決定
1.1.2 環(huán)境型性別決定
1.2 魚類性別控制
1.2.1 種間雜交
1.2.2 外源激素誘導(dǎo)
1.2.3 雌/雄核發(fā)育
1.2.4 人工誘導(dǎo)三倍體
1.2.5 其它方法
1.3 魚類性腺發(fā)育
1.3.1 卵巢發(fā)育
1.3.2 精巢發(fā)育
1.4 轉(zhuǎn)錄組測序研究
1.4.1 轉(zhuǎn)錄組測序概述
1.4.2 轉(zhuǎn)錄組測序在魚類中的應(yīng)用
1.5 本研究的目的與內(nèi)容
第二章 來曲唑誘導(dǎo)雌核發(fā)育黃姑魚性逆轉(zhuǎn)的研究
2.1 材料與方法
2.1.1 實驗材料與雌核發(fā)育誘導(dǎo)
2.1.2 飼料制作
2.1.3 實驗設(shè)計
2.1.4 實驗儀器與試劑
2.1.5 樣品采集
2.1.6 組織切片
2.1.7 數(shù)據(jù)分析
2.2 實驗結(jié)果
2.2.1 來曲唑?qū)S姑魚生長的影響
2.2.2 來曲唑?qū)S姑魚性別比例的影響
2.2.3 來曲唑?qū)S姑魚性腺發(fā)育的影響
2.2.4 來曲唑?qū)S姑魚性腺成熟指數(shù)(GSI)的影響
2.3 討論
2.4 小結(jié)
第三章 黃姑魚性別相關(guān)基因的篩查分析
3.1 材料與方法
3.1.1 實驗材料
3.1.2 實驗設(shè)計及樣品采集
3.1.3 實驗儀器與試劑
3.1.4 組織切片制作
3.1.5 總RNA的提取和質(zhì)量檢測
3.1.6 轉(zhuǎn)錄組測序及分析
3.1.7 熒光定量(qPCR)檢測
3.1.8 性別分化相關(guān)基因的驗證
3.2 實驗結(jié)果
3.2.1 形態(tài)學(xué)驗證
3.2.2 樣品信息及質(zhì)量檢測
3.2.3 數(shù)據(jù)過濾及質(zhì)量評估概況
3.2.4 基因表達水平分析
3.2.5 差異表達基因的篩選
3.2.6 GO分析以及KEGG Pathway分析
3.2.7 qPCR檢測
3.2.8 性別分化相關(guān)基因的驗證
3.3 討論
3.4 小結(jié)
總結(jié)與展望
參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果
【參考文獻】:
期刊論文
[1]p53非依賴性信號通路在DNA損傷致細胞凋亡中的研究進展[J]. 張瀟蕓,姜英,楊軍. 浙江大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2013(02)
[2]脊椎動物性別決定基因與性染色體演化機制[J]. 邵長偉,陳松林. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2012(12)
[3]p53家族及其通路相關(guān)蛋白調(diào)節(jié)母性生殖的新功能[J]. 朱暉,李安,余建華,向超杰,蘇世達,黃磊,范豫杰,羅瑛,唐文如. 遺傳. 2012(08)
[4]條石鯛雌雄魚核型及C-帶的比較分析[J]. 徐冬冬,尤鋒,樓寶,耿智,李軍,肖志忠,辛儉. 水生生物學(xué)報. 2012(03)
[5]PPAR-γ對卵巢功能的影響及其作用機制[J]. 匡志超,王健,孫兆貴. 生殖與避孕. 2012(01)
[6]羅非魚性別三系配套技術(shù)研究進展[J]. 萬松良,雷曉中,萬珊. 水產(chǎn)科學(xué). 2009(09)
[7]尼羅羅非魚Dmrt1基因克隆及在不同組織中的表達[J]. 楊東,余來寧. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(07)
[8]半滑舌鰨DMRT 1基因的克隆與表達分析[J]. 孫業(yè)盈,張全啟,齊潔,王志剛,陳妍婕,李春梅,鐘其旺. 武漢大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版). 2008(02)
[9]魚類性別決定與分化相關(guān)基因研究進展[J]. 文愛韻,尤鋒,徐永立,張培軍. 海洋科學(xué). 2008(01)
[10]三倍體技術(shù)在魚類育種中的應(yīng)用[J]. 謝湘筠. 寧德師專學(xué)報(自然科學(xué)版). 2006(04)
博士論文
[1]四種鲆鰈魚類雌核發(fā)育及性別控制技術(shù)研究[D]. 楊景峰.中國海洋大學(xué) 2009
碩士論文
[1]人卵膜糖蛋白4的表達、抗體的制備及與精子體外結(jié)合的研究[D]. 于裴夫.中國醫(yī)科大學(xué) 2018
[2]七彩神仙魚(Symphysodon haraldi)性腺轉(zhuǎn)錄組分析及vasa基因的時空表達[D]. 林睿涓.上海海洋大學(xué) 2017
[3]高溫處理后尼羅羅非魚性逆轉(zhuǎn)雄魚與未逆轉(zhuǎn)雌魚的差異性腺轉(zhuǎn)錄組研究[D]. 孫麗雪.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[4]17α-甲基睪酮和芳香化酶抑制劑來曲唑?qū)煞N黃姑魚性腺分化的影響[D]. 陽芳.浙江海洋大學(xué) 2017
[5]雌、雄激素對羅非魚性別分化和性腺基因表達的影響[D]. 陳立黎.西南大學(xué) 2016
[6]黃姑魚雌核發(fā)育的誘導(dǎo)、鑒定及性別決定機制的初步研究[D]. 馬世磊.浙江海洋學(xué)院 2014
[7]性類固醇激素在尼羅羅非魚性別決定與分化中的作用[D]. 蔣小龍.西南大學(xué) 2014
[8]黑龍江茴魚(Thymallus arcticus grubei Dybowski)人工繁殖及胚胎發(fā)育觀察[D]. 張瀾瀾.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號:3174507
【文章來源】:浙江海洋大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:73 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
中英文縮寫對照表
第一章 引言
1.1 魚類的性別決定與分化
1.1.1 遺傳型性別決定
1.1.2 環(huán)境型性別決定
1.2 魚類性別控制
1.2.1 種間雜交
1.2.2 外源激素誘導(dǎo)
1.2.3 雌/雄核發(fā)育
1.2.4 人工誘導(dǎo)三倍體
1.2.5 其它方法
1.3 魚類性腺發(fā)育
1.3.1 卵巢發(fā)育
1.3.2 精巢發(fā)育
1.4 轉(zhuǎn)錄組測序研究
1.4.1 轉(zhuǎn)錄組測序概述
1.4.2 轉(zhuǎn)錄組測序在魚類中的應(yīng)用
1.5 本研究的目的與內(nèi)容
第二章 來曲唑誘導(dǎo)雌核發(fā)育黃姑魚性逆轉(zhuǎn)的研究
2.1 材料與方法
2.1.1 實驗材料與雌核發(fā)育誘導(dǎo)
2.1.2 飼料制作
2.1.3 實驗設(shè)計
2.1.4 實驗儀器與試劑
2.1.5 樣品采集
2.1.6 組織切片
2.1.7 數(shù)據(jù)分析
2.2 實驗結(jié)果
2.2.1 來曲唑?qū)S姑魚生長的影響
2.2.2 來曲唑?qū)S姑魚性別比例的影響
2.2.3 來曲唑?qū)S姑魚性腺發(fā)育的影響
2.2.4 來曲唑?qū)S姑魚性腺成熟指數(shù)(GSI)的影響
2.3 討論
2.4 小結(jié)
第三章 黃姑魚性別相關(guān)基因的篩查分析
3.1 材料與方法
3.1.1 實驗材料
3.1.2 實驗設(shè)計及樣品采集
3.1.3 實驗儀器與試劑
3.1.4 組織切片制作
3.1.5 總RNA的提取和質(zhì)量檢測
3.1.6 轉(zhuǎn)錄組測序及分析
3.1.7 熒光定量(qPCR)檢測
3.1.8 性別分化相關(guān)基因的驗證
3.2 實驗結(jié)果
3.2.1 形態(tài)學(xué)驗證
3.2.2 樣品信息及質(zhì)量檢測
3.2.3 數(shù)據(jù)過濾及質(zhì)量評估概況
3.2.4 基因表達水平分析
3.2.5 差異表達基因的篩選
3.2.6 GO分析以及KEGG Pathway分析
3.2.7 qPCR檢測
3.2.8 性別分化相關(guān)基因的驗證
3.3 討論
3.4 小結(jié)
總結(jié)與展望
參考文獻
致謝
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果
【參考文獻】:
期刊論文
[1]p53非依賴性信號通路在DNA損傷致細胞凋亡中的研究進展[J]. 張瀟蕓,姜英,楊軍. 浙江大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2013(02)
[2]脊椎動物性別決定基因與性染色體演化機制[J]. 邵長偉,陳松林. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2012(12)
[3]p53家族及其通路相關(guān)蛋白調(diào)節(jié)母性生殖的新功能[J]. 朱暉,李安,余建華,向超杰,蘇世達,黃磊,范豫杰,羅瑛,唐文如. 遺傳. 2012(08)
[4]條石鯛雌雄魚核型及C-帶的比較分析[J]. 徐冬冬,尤鋒,樓寶,耿智,李軍,肖志忠,辛儉. 水生生物學(xué)報. 2012(03)
[5]PPAR-γ對卵巢功能的影響及其作用機制[J]. 匡志超,王健,孫兆貴. 生殖與避孕. 2012(01)
[6]羅非魚性別三系配套技術(shù)研究進展[J]. 萬松良,雷曉中,萬珊. 水產(chǎn)科學(xué). 2009(09)
[7]尼羅羅非魚Dmrt1基因克隆及在不同組織中的表達[J]. 楊東,余來寧. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(07)
[8]半滑舌鰨DMRT 1基因的克隆與表達分析[J]. 孫業(yè)盈,張全啟,齊潔,王志剛,陳妍婕,李春梅,鐘其旺. 武漢大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版). 2008(02)
[9]魚類性別決定與分化相關(guān)基因研究進展[J]. 文愛韻,尤鋒,徐永立,張培軍. 海洋科學(xué). 2008(01)
[10]三倍體技術(shù)在魚類育種中的應(yīng)用[J]. 謝湘筠. 寧德師專學(xué)報(自然科學(xué)版). 2006(04)
博士論文
[1]四種鲆鰈魚類雌核發(fā)育及性別控制技術(shù)研究[D]. 楊景峰.中國海洋大學(xué) 2009
碩士論文
[1]人卵膜糖蛋白4的表達、抗體的制備及與精子體外結(jié)合的研究[D]. 于裴夫.中國醫(yī)科大學(xué) 2018
[2]七彩神仙魚(Symphysodon haraldi)性腺轉(zhuǎn)錄組分析及vasa基因的時空表達[D]. 林睿涓.上海海洋大學(xué) 2017
[3]高溫處理后尼羅羅非魚性逆轉(zhuǎn)雄魚與未逆轉(zhuǎn)雌魚的差異性腺轉(zhuǎn)錄組研究[D]. 孫麗雪.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[4]17α-甲基睪酮和芳香化酶抑制劑來曲唑?qū)煞N黃姑魚性腺分化的影響[D]. 陽芳.浙江海洋大學(xué) 2017
[5]雌、雄激素對羅非魚性別分化和性腺基因表達的影響[D]. 陳立黎.西南大學(xué) 2016
[6]黃姑魚雌核發(fā)育的誘導(dǎo)、鑒定及性別決定機制的初步研究[D]. 馬世磊.浙江海洋學(xué)院 2014
[7]性類固醇激素在尼羅羅非魚性別決定與分化中的作用[D]. 蔣小龍.西南大學(xué) 2014
[8]黑龍江茴魚(Thymallus arcticus grubei Dybowski)人工繁殖及胚胎發(fā)育觀察[D]. 張瀾瀾.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號:3174507
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