麻瘋樹（Jatropha curcas L.）又名小桐子,系大戟科麻瘋樹屬灌木或喬木,其種子含油量最高達約60%,在發(fā)展生物柴油產(chǎn)業(yè)方面具有巨大潛力。然而麻瘋樹雌雄花比例低（約1:29）,導(dǎo)致了其掛果率較低。植物激素在植物生長發(fā)育及生殖過程扮演著重要角色,尤其是在花的性別分化過程中,植物激素往往起到了關(guān)鍵性作用。油菜素內(nèi)酯是一種促進型激素,能夠提高植物抗病、抗鹽和抗凍能力,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有著重要作用。BRI1為細胞膜上BRs的受體蛋白,其家族成員BRL1與BRL3也有識別并結(jié)合BRs的功能。值得注意的是,BRs和BRI1的共同受體BAK1參與了多種LRR激酶的調(diào)控,這些激酶的配體各不相同,通過BAK1蛋白的作用可以實現(xiàn)不同信號途徑的聯(lián)系。本實驗室在前期工作對處于不同發(fā)育時期的麻瘋樹花蕾進行了轉(zhuǎn)錄組測序,建立了麻瘋樹花發(fā)育的基因表達譜,并從差異表達的基因中篩選到一個與BRI1-like3基因序列相似度的極高的基因片段。本研究以篩選獲得的基因片段為基礎(chǔ),克隆獲得了麻瘋樹BRL3基因,并對它的序列、時空表達模式進行分析,并且構(gòu)建了植物過量表達載體轉(zhuǎn)化至煙草體內(nèi)進行了初步的功能驗證,主要研究結(jié)果... 

【文章來源】：貴州大學(xué)貴州省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
前言
第一章 文獻綜述
    1.1 麻瘋樹簡介
    1.2 麻瘋樹在應(yīng)用方面的研究
        1.2.1 麻瘋樹在生物能源方面的應(yīng)用
        1.2.2 麻瘋樹在生物防治上的應(yīng)用
        1.2.3 麻瘋樹在醫(yī)藥方面的應(yīng)用
        1.2.4 麻瘋樹其他方面的應(yīng)用
    1.3 麻瘋樹的基礎(chǔ)研究
        1.3.1 麻瘋樹種質(zhì)資源的研究
        1.3.2 麻瘋樹栽培方面的研究
        1.3.3 麻瘋樹花發(fā)育分子生物學(xué)研究
        1.3.4 植物激素對麻瘋樹花的發(fā)育的影響
    1.4 油菜素內(nèi)酯的研究進展
        1.4.1 油菜素內(nèi)酯在植物生長發(fā)育中的作用
        1.4.2 BR促進細胞的伸長與分裂的研究
        1.4.3 BR對植物生殖發(fā)育的影響
        1.4.4 BR信號途徑相關(guān)研究
        1.4.5 BRI1蛋白家族相關(guān)研究
    1.5 本研究的目的與意義
    1.6 技術(shù)路線
第二章 麻瘋樹JcBRL3基因cDNA全長克隆
    2.1 實驗材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 實驗試劑及耗材
        2.1.3 儀器設(shè)備
        2.1.4 引物序列
    2.2 實驗方法
        2.2.1 麻瘋樹花器官總RNA提取及檢測
        2.2.2 JcBRL3基因cDNA全長的克隆
        2.2.3 JcBRL3基因開放閱讀框的克隆
        2.2.4 JcBRL3蛋白氨基酸序列預(yù)測及基本理化性質(zhì)分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 麻瘋樹花器官總RNA提取及檢測分析
        2.3.2 RACEPCR結(jié)果分析
        2.3.3 cDNA全長序列獲得
        2.3.4 JcBRL3基因ORF克隆
        2.3.5 JcBRL3蛋白氨基酸序列及理化性質(zhì)分析結(jié)果
    2.4 討論
第三章 麻瘋樹JcBRL3基因的原核表達及質(zhì)譜鑒定
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗菌株及載體
        3.1.2 實驗試劑
        3.1.3 實驗儀器
        3.1.4 引物序列
    3.2 實驗方法
        3.2.1 質(zhì)粒提取
        3.2.2 原核表達載體的構(gòu)建
        3.2.3 JcBRL3蛋白誘導(dǎo)表達與檢測
        3.2.4 JcBRL3蛋白SDS-PAGE電泳檢測
        3.2.5 JcBRL3蛋白質(zhì)譜鑒定
        3.2.6 JcBRL3蛋白結(jié)構(gòu)分析
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 重組質(zhì)粒檢測
        3.3.2 原核表達載體酶切鑒定
        3.3.3 JcBRL3蛋白SDS-PAGE檢測
        3.3.4 JcBRL3蛋白質(zhì)譜鑒定
        3.3.5 JcBRL3蛋白結(jié)構(gòu)分析結(jié)果
    3.4 討論
第四章 麻瘋樹JcBRL3基因的表達水平分析
    4.1 實驗材料
        4.1.1 植物材料
        4.1.2 實驗試劑
        4.1.3 實驗儀器
        4.1.4 引物序列
    4.2 實驗方法
        4.2.1 麻瘋樹花蕾的篩選
        4.2.2 總RNA提取及cDNA第一鏈合成
        4.2.3 JcBRL3基因的實時定量分析
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 不同發(fā)育時期的麻瘋樹花蕾
        4.3.2 總RNA及cDNA質(zhì)量檢測
        4.3.3 JcBRL3基因的表達分析
    4.4 討論
第五章 植物過表達載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化分析
    5.1 實驗材料
        5.1.1 植物材料
        5.1.2 實驗儀器
        5.1.3 載體與菌株
        5.1.4 實驗試劑
        5.1.5 培養(yǎng)基
        5.1.6 引物序列
    5.2 實驗方法
        5.2.1 植物過表達載體的構(gòu)建
        5.2.2 過表達載體轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌
        5.2.3 葉盤法轉(zhuǎn)化煙草
        5.2.4 轉(zhuǎn)基因煙草的分子檢測
    5.3 實驗結(jié)果
        5.3.1 過表達載體的構(gòu)建
        5.3.2 轉(zhuǎn)基因植株的獲得
        5.3.3 轉(zhuǎn)基因煙草的分子檢測結(jié)果
        5.3.4 轉(zhuǎn)基因煙草花的形態(tài)學(xué)分析
    5.4 討論
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 主要結(jié)論
    6.2 后續(xù)工作展望
    6.3 創(chuàng)新點
附錄
致謝
參考文獻


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3174502