發(fā)布時(shí)間：2021-05-05 21:01

　　中黑盲蝽（Adelphocoris suturalis）是我國棉花上的主要害蟲,其活動敏捷,易轉(zhuǎn)移導(dǎo)致其防治較難。研究中黑盲蝽生殖調(diào)控機(jī)制,不僅可以為其防治提供新思路,還可以為新型轉(zhuǎn)基因植物的培育提供備選基因。本研究基于課題組前期獲得的轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù),通過分析差異基因發(fā)現(xiàn)中黑盲蝽胰蛋白酶前體基因（trypsin precursor,AsTryP）和類胃蛋白酶原基因（pepsinogen-like,AsPGL）的功能可能與中黑盲蝽生殖力相關(guān),本文將通過RACE、實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）、RNA干擾（RNAi）等技術(shù)分析AsTryP和AsPGL在中黑盲蝽生殖調(diào)控過程中的作用。主要結(jié)果如下:1.AsTryP的克隆和時(shí)空表達(dá)分析AsTryP開放閱讀框（open reading frame,ORF）區(qū)域?yàn)?73 bp,編碼290個(gè)氨基酸,理論等電點(diǎn)為5.04,分子量為73.04 kDa。時(shí)空表達(dá)分析結(jié)果顯示:AsTryP在4齡若蟲中表達(dá)量最高,其次是3齡若蟲、5齡若蟲、8日齡雌蟲。8日齡雌蟲不同組織中,AsTryP在胸部表達(dá)量最高,其次為脂肪體和卵巢。2.AsTryP對中黑盲蝽生殖力的影響... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略簡表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 中黑盲蝽
    1.2 昆蟲的生殖調(diào)控
        1.2.1 昆蟲生殖調(diào)控的分子機(jī)制
        1.2.2 中黑盲蝽生殖調(diào)控的研究進(jìn)展
    1.3 RNA干擾
        1.3.1 RNA干擾機(jī)制及特點(diǎn)
        1.3.2 昆蟲導(dǎo)入dsRNA的方法
        1.3.3 RNAi在昆蟲中的應(yīng)用
    1.4 研究目的與意義
    1.5 研究內(nèi)容及技術(shù)路線
        1.5.1 研究內(nèi)容
        1.5.2 技術(shù)路線圖
第二章 AsTryP的克隆與序列分析
    2.1 前言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 方法
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 AsTryP的克隆及序列分析
        2.3.2 AsTryP實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物特異性分析
        2.3.3 AsTryP時(shí)空表達(dá)模式分析
    2.4 討論
第三章 AsTryP對中黑盲蝽生殖力的影響
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 材料
        3.2.2 方法
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 AsTryP沉默效率檢測
        3.3.2 AsTryP沉默后雌蟲卵巢內(nèi)卵的數(shù)量和生殖力變化情況
    3.4 討論
第四章 AsPGL的克隆與序列分析
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 材料
        4.2.2 方法
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 AsPGL的克隆及序列分析
        4.3.2 AsPGL實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物特異性分析
        4.3.3 AsPGL時(shí)空表達(dá)模式分析
    4.4 討論
第五章 AsPGL對中黑盲蝽生殖力的影響
    5.1 前言
    5.2 材料與方法
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 AsPGL沉默效率檢測
        5.3.2 AsPGL沉默后雌蟲卵巢內(nèi)卵的數(shù)量和生殖力變化情況
    5.4 討論
第六章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]新疆棉花害蟲發(fā)生演替與綜合防治研究進(jìn)展[J]. 潘洪生,姜玉英,王佩玲,劉建,陸宴輝.  植物保護(hù). 2018(05)
[2]RNA干擾的研究及應(yīng)用[J]. 張紅麗,胡亮,張智州.  醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐. 2018(12)
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[4]南陽棉田中黑盲蝽發(fā)生情況及防治措施[J]. 王建玉,張秀閣,宋江春,李拴柱,喬建禮.  農(nóng)業(yè)科技通訊. 2017(07)
[5]短時(shí)高溫暴露對綠盲蝽和中黑盲蝽存活及生殖的影響[J]. 李國平,封洪強(qiáng),黃博,鐘景,田彩紅,邱峰,黃建榮.  生態(tài)學(xué)報(bào). 2017(11)
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[8]3種鱖魚生長與攝食量、胃蛋白酶活性和胃蛋白酶原基因表達(dá)相關(guān)分析[J]. 李傳陽,許淼洋,THAMMARATSUNTORN Jeerawat,趙金良,錢葉洲,吳超,錢德.  上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(01)
[9]基因沉默的工具-RNA干擾技術(shù)的研究進(jìn)展[J]. 趙雪萌,余祖江.  河南醫(yī)學(xué)研究. 2015(01)
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博士論文
[1]中黑盲蝽信息素合成相關(guān)基因的篩選及功能分析[D]. 羅靜.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017

碩士論文
[1]梨小食心蟲幼蟲中腸胰蛋白酶活性、表達(dá)量及與生長發(fā)育的關(guān)系研究[D]. 趙愛平.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[2]東方粘蟲中腸胰蛋白酶基因上游啟動子核心序列的克隆及功能驗(yàn)證[D]. 劉骉.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[3]小菜蛾中腸絲氨酸蛋白酶基因的克隆、轉(zhuǎn)錄及其酶活的研究[D]. 祝妮.浙江大學(xué) 2013
[4]萍鄉(xiāng)紅鯽胰蛋白酶提取純化及酶原前體cDNA克隆、序列分析[D]. 花育旗.南昌大學(xué) 2010
[5]中黑盲蝽性信息素釋放節(jié)律及其活性組分的初步鑒定[D]. 魯沖.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



本文編號：3170578