ovo12作為一個轉(zhuǎn)錄因子,在乳腺癌、結(jié)直腸癌等腫瘤的發(fā)生發(fā)展中都起到了重要的作用。但是作為全球發(fā)病率排名前十的肝癌,ovo12在其中的作用研究相對比較少。我們在實驗中發(fā)現(xiàn)ovo12在肝癌細(xì)胞中的表達(dá)量要比正常細(xì)胞中少。并且ovo12可以抑制肝癌細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP9）的表達(dá)。MMP9可以降解四型膠原,降解細(xì)胞外基質(zhì),在癌癥的浸潤和轉(zhuǎn)移中有重要作用。通過細(xì)胞劃痕和transwell實驗以及對EMT相關(guān)因子的檢測,我們證實了 ovo12會抑制肝癌細(xì)胞的EMT過程。考慮到NF-κB可以與MMP9的啟動子直接結(jié)合,以及對EMT的調(diào)節(jié)作用。我們猜想ovol2會不會是通過NF-κB信號通路來影響EMT過程。于是我們展開進(jìn)一步的研究,通過luc實驗,我們證實了 ovol2對TNF-α激活的NF-κB信號有明顯的抑制作用,并且對NF-κB的下游靶基因也有明顯下調(diào)。我們繼而想探索ovo12影響NF-κB的機(jī)理。在研究NF-κB的眾多文章都表明,P65是經(jīng)典通路中的核心蛋白。通過免疫共沉淀實驗我們證實了 ovol2可以與P65相互作用。本篇文章主要闡明了 ovol2可能是通過與P65相互作用,... 

【文章來源】：廈門大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章
    1.1 NF-κB信號通路
        1.1.1 NF-κB信號通路簡述
        1.1.2 經(jīng)典與非經(jīng)典信號通路
        1.1.3 NF-κB蛋白家族
        1.1.4 NF-κB與腫瘤
    1.2 EMT
        1.2.1 EMT簡述
        1.2.2 EMT與腫瘤的關(guān)系
        1.2.3 影響EMT的因素
    1.3 ovol2
        1.3.1 ovo基因的發(fā)現(xiàn)
        1.3.2 ovo蛋白家族成員
        1.3.3 ovol2蛋白的結(jié)構(gòu)與功能
    1.4 MMP9
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細(xì)胞系和菌種
        2.1.2 試劑藥品
        2.1.3 抗體
        2.1.4 溶液配制
    2.2 實驗方法操作
        2.2.1 細(xì)胞相關(guān)實驗方法
        2.2.2 蛋白與核酸相關(guān)實驗方法
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 ovo12抑制肝癌細(xì)胞的EMT進(jìn)程
        3.1.1 Ovol2在肝癌細(xì)胞中的表達(dá)量低于正常肝細(xì)胞
        3.1.2 ovol2抑制mmp9的表達(dá)
        3.1.3 ovol2抑制肝癌細(xì)胞遷移和侵襲
        3.1.4 ovol2對上皮/間質(zhì)標(biāo)志因子的影響
    3.2 ovol2抑制NF-KB信號通路
        3.2.1 Ovol2抑制NFKB luc活性
        3.2.2 ovol2抑制NFKB下游靶基因
        3.2.3 ovol2與P65結(jié)合
        3.2.4 ovol2與P52結(jié)合
第四章 討論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3162537