目的基因的靶向治療是近年來抗腫瘤研究的熱點,而制備具有高效腫瘤靶向定位能力的藥物輸送載體是靶向治療的關(guān)鍵。殼聚糖（chitosan,CS）納米載體憑借其優(yōu)良的生物學(xué)性能在組織工程載體中備受關(guān)注。本研究利用透明質(zhì)酸（hyaluronic acid,HA）受體CD44在非小細胞肺癌（NSCLC）中的高表達性,制備HA修飾的新型殼聚糖納米載體,探討其作為基因靶向遞送載體的可行性,為NSCLC的基因靶向治療提供新的理論依據(jù)。方法用CS和三聚磷酸鈉（sodium tripolyphosphate,TPP）通過離子凝膠的方法制備殼聚糖納米粒（chitosan nanoparticles,CS NPs）;再將CS NPs包載針對Bcl-2基因的siRNA后制備sCS NPs;將CS NPs和sCS NPs與透明質(zhì)酸（hyaluronic acid,HA）結(jié)合制備CS NPs-HA和sCS NPs-HA。粒度儀檢測四種納米粒的粒徑、Zeta電位、分散度（polydispersity index,PDI）等參數(shù);并在連續(xù)6天時間內(nèi)檢測其在中性緩沖體系下的穩(wěn)定性;掃描電鏡（scanning electro... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
材料與方法
    1 儀器與試劑
        1.1 實驗儀器設(shè)備
        1.2 材料和試劑
        1.3 實驗細胞
        1.4 實驗動物
    2 殼聚糖納米粒（Chitosannanoparticles,CSNPs）
        2.1 殼聚糖納米粒制備
        2.2 殼聚糖納米粒的參數(shù)及表面結(jié)構(gòu)表征
        2.3 殼聚糖納米粒對siRNA包載能力的評估
            2.3.1 紫外分光光度法
            2.3.2 瓊脂糖凝膠電泳法
        2.4 評價殼聚糖納米粒的穩(wěn)定性
    3 評價殼聚糖納米粒細胞毒性及抑制腫瘤細胞增殖的能力
        3.1 檢測殼聚糖納米粒細胞毒性
        3.2 檢測殼聚糖納米粒包載siRNA后抑制A549 細胞增殖的能力
    4 包載siRNA的殼聚糖納米粒對A549 細胞轉(zhuǎn)染能力的評估
    5 細胞免疫熒光檢測sCSNPs-HA對 CD44 受體的激活情況
    6 檢測Bcl-2 基因的表達水平
    7 體內(nèi)抑瘤效果評價
        7.1 動物實驗分組
        7.2 siRNA基因靶向治療
        7.3 殼聚糖納米粒體內(nèi)毒性檢測
    8 裸鼠體內(nèi)治療效果檢測
        8.1 殼聚糖靶向納米載體的腫瘤定位能力
        8.2 腫瘤組織中Bcl-2 基因表達水平檢測
    9 統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
    1 殼聚糖納米粒性質(zhì)
        1.1 殼聚糖納米粒的參數(shù)及表面結(jié)構(gòu)
        1.2 殼聚糖納米粒對siRNA的包載能力
        1.3 殼聚糖納米粒的穩(wěn)定性
    2 殼聚糖納米粒細胞毒性及對腫瘤細胞的抑制作用
        2.1 殼聚糖納米粒細胞毒性
        2.2 殼聚糖納米粒抑制A549 細胞增殖的能力
    3 包載siRNA的殼聚糖納米粒對A549 細胞的轉(zhuǎn)染效率
    4 sCS NPs-HA在 A549 細胞內(nèi)的定位與CD44 受體激活
    5 Bcl-2 基因表達水平
    6 裸鼠體內(nèi)實驗
        6.1 裸鼠體內(nèi)腫瘤生長抑制效果
        6.2 殼聚糖納米粒的體內(nèi)毒性
        6.3 包載siRNA的殼聚糖納米粒在裸鼠體內(nèi)腫瘤的定位
        6.4 Bcl-2 基因在裸鼠腫瘤內(nèi)的表達水平
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表（附錄）
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]癌癥分子靶向治療的研究現(xiàn)狀[J]. 董兵,朱毅敏.  癌癥. 2010(03)
[2]殼聚糖的納米化及其生物學(xué)效應(yīng)[J]. 周少華,陳勇,洪艷.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2007(26)
[3]殼聚糖及其衍生物作為基因遞送載體的研究進展[J]. 趙雪,任慧霞.  食品與藥品. 2006(02)
[4]肺癌基因治療的研究現(xiàn)狀[J]. 金沅武,王哲海.  醫(yī)學(xué)綜述. 2006(02)
[5]殼聚糖納米粒用作基因遞送載體的初步研究[J]. 黃偉,崔光華,賀俊峰,周旭,張強.  藥學(xué)學(xué)報. 2002(12)
[6]肺癌的基因治療[J]. 路蘭.  武漢科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2002(01)



本文編號：3162090