幽門螺桿菌抗生素耐藥基因突變位點鑒定與幽門螺桿菌感染相關(guān)胃癌ceRNA調(diào)控網(wǎng)絡分析
發(fā)布時間:2021-04-25 06:39
目的:幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染是多種胃疾病的重要病因,截止目前其致病機制仍不十分清楚。近年來,隨著根除治療的廣泛實施,H.pylori對抗生素的耐藥性逐年增加。本研究在前期工作基礎(chǔ)之上主要聚焦于兩個方面,1.篩選鑒定與H.pylori克拉霉素(clarithromycin,CAM),左氧氟沙星(levofloxacin,LVX)和甲硝唑(metronidazole,MNZ)耐藥相關(guān)基因突變位點;2.構(gòu)建H.pylori感染相關(guān)胃癌差異基因ceRNA調(diào)控網(wǎng)絡,探討相關(guān)分子的生物學功能和預后相關(guān)性。本研究將為H.pylori感染相關(guān)耐藥性與致病性的進一步深入研究提供線索和理論依據(jù)。研究方法:1.利用分子對接模擬分析本組前期研究獲得的9個23S rRNA耐藥相關(guān)突變位點、35個rdxA耐藥相關(guān)突變位點、4個gyrA耐藥相關(guān)突變位點與CAM,LVX和MNZ之間的相互作用,以明確可能的耐藥相關(guān)突變位點。進一步利用自然轉(zhuǎn)化方法對篩選出的部分位點進行體外驗證。2.從TCGA數(shù)據(jù)庫中提取有或無H.pylori感染的胃癌患者RNA表達數(shù)據(jù),包括20例H....
【文章來源】:中國醫(yī)科大學遼寧省
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 :幽門螺桿菌抗生素耐藥基因突變位點分析鑒定
1 前言
2 材料與方法
2.1 主要試劑耗材和儀器設(shè)備
2.1.1 主要試劑耗材
2.1.2 主要儀器設(shè)備
2.2 方法
2.2.1 研究對象
2.2.2 抗生素與耐藥相關(guān)基因的分子對接分析
2.2.3 耐藥相關(guān)突變位點的自然轉(zhuǎn)化驗證
3 結(jié)果
3.1 H.pylori23Sr RNA突變位點分子對接分析
3.2 H.pylori rdx A突變位點分子對接分析
3.3 H.pylori gyr A突變位點分子對接分析
3.4 H.pylori耐藥相關(guān)突變位點的自然轉(zhuǎn)化驗證
4 討論
5 結(jié)論
第二部分 :幽門螺桿菌感染相關(guān)胃癌ceRNA調(diào)控網(wǎng)絡分析
1 前言
2 材料與方法
2.1 主要試劑耗材和儀器設(shè)備
2.1.1 主要試劑耗材
2.1.2 主要儀器設(shè)備
2.2 方法
2.2.1 研究對象
2.2.2 生物信息學分析
2.2.3 H.pylori感染的判定
2.2.4 組織總RNA提取、反轉(zhuǎn)錄及實時熒光定量PCR
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
3.1 H.pylori感染相關(guān)胃癌DElnc RNA,DEmi RNA和 DEm RNA的篩選鑒定
3.2 H.pylori感染相關(guān)胃癌ce RNA網(wǎng)絡的建立
3.3 參與ce RNA網(wǎng)絡的m RNA細胞功能和通路富集分析
3.4 參與ce RNA網(wǎng)絡的lnc RNA和 mi RNA的預后分析
3.5 差異表達lnc RNA的 q RT-PCR驗證
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷
本文編號:3158900
【文章來源】:中國醫(yī)科大學遼寧省
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 :幽門螺桿菌抗生素耐藥基因突變位點分析鑒定
1 前言
2 材料與方法
2.1 主要試劑耗材和儀器設(shè)備
2.1.1 主要試劑耗材
2.1.2 主要儀器設(shè)備
2.2 方法
2.2.1 研究對象
2.2.2 抗生素與耐藥相關(guān)基因的分子對接分析
2.2.3 耐藥相關(guān)突變位點的自然轉(zhuǎn)化驗證
3 結(jié)果
3.1 H.pylori23Sr RNA突變位點分子對接分析
3.2 H.pylori rdx A突變位點分子對接分析
3.3 H.pylori gyr A突變位點分子對接分析
3.4 H.pylori耐藥相關(guān)突變位點的自然轉(zhuǎn)化驗證
4 討論
5 結(jié)論
第二部分 :幽門螺桿菌感染相關(guān)胃癌ceRNA調(diào)控網(wǎng)絡分析
1 前言
2 材料與方法
2.1 主要試劑耗材和儀器設(shè)備
2.1.1 主要試劑耗材
2.1.2 主要儀器設(shè)備
2.2 方法
2.2.1 研究對象
2.2.2 生物信息學分析
2.2.3 H.pylori感染的判定
2.2.4 組織總RNA提取、反轉(zhuǎn)錄及實時熒光定量PCR
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
3.1 H.pylori感染相關(guān)胃癌DElnc RNA,DEmi RNA和 DEm RNA的篩選鑒定
3.2 H.pylori感染相關(guān)胃癌ce RNA網(wǎng)絡的建立
3.3 參與ce RNA網(wǎng)絡的m RNA細胞功能和通路富集分析
3.4 參與ce RNA網(wǎng)絡的lnc RNA和 mi RNA的預后分析
3.5 差異表達lnc RNA的 q RT-PCR驗證
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
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