柴胡側根發(fā)育過程及調控基因初步篩選研究
發(fā)布時間:2021-04-23 07:23
柴胡以根入藥,其根為常用大宗藥材。柴胡根部主要藥效成分為柴胡皂苷,具有抗炎、保肝、抗腫瘤等藥理活性。不同品種柴胡根系結構差異顯著,北柴胡根系結構表現(xiàn)為多支根、少支根及單支根,而狹葉柴胡根系表現(xiàn)為棕色根和白色根。藥理成分研究表明不同根系結構柴胡藥用成分含量差異顯著。本研究以北柴胡(Bupleurum chineses DC.)新品種川北柴1號及狹葉柴胡(Bupleurum scorzonerifolium Willd.)新品種川紅柴1號為試材,觀測了側根原基發(fā)育動態(tài)過程,添加了不同濃度生長調節(jié)物質后測定根系表型參數(shù);克隆了參與柴胡側根形成的基因,并分析調控基因在生長素處理時間梯度間的表達差異性。初步篩選出參與川北柴1號及川紅柴1號側根形成過程中的調控基因,為進一步探究功能基因奠定理論基礎。研究結果如下:1.川北柴1號及川紅柴1號側根原基形成過程分析通過對川北柴1號和川紅柴1號幼嫩主根縱向石蠟切片觀測得出,川北柴1號側根原基起源于靠近木質部中柱鞘細胞,部分內皮層細胞也參與側根發(fā)育過程。側根原基的發(fā)育可分為5個階段:單細胞層階段;23層側根原基階段;多細胞層側根原基階段...
【文章來源】:西南科技大學四川省
【文章頁數(shù)】:95 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
1 緒論
1.1 柴胡簡介
1.2 國內外研究現(xiàn)狀
1.2.1 柴胡化學成分研究現(xiàn)狀
1.2.2 柴胡藥理作用研究現(xiàn)狀
1.2.3 植物側根發(fā)育過程研究現(xiàn)狀
1.2.4 植物側根發(fā)育分子機制研究現(xiàn)狀
1.2.5 植物側根發(fā)育影響因素研究現(xiàn)狀
1.3 研究目的及意義
2 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 試驗材料
2.1.2 試驗試劑
2.1.3 試驗儀器
2.1.4 試驗試劑的配制
2.1.5 試驗器具預處理
2.2 方法
2.2.1 柴胡幼苗的培育
2.2.2 生長調節(jié)劑的添加
2.2.3 川紅柴1號cDNA的獲取
2.2.4 目的基因的克隆及測序
2.2.5 生長素調控AUX/IAA、HO基因在側根形成過程中的表達分析
3 結果分析
3.1 側根原基建成
3.1.1 川北柴1號側根原基建成
3.1.2 川紅柴1號側根原基建成
3.2 生長調節(jié)物質對側根發(fā)育的影響
3.2.1 生長調節(jié)物質對川北柴1號側根發(fā)育的影響
3.2.2 生長調節(jié)物質對川紅柴1號側根發(fā)育的影響
3.3 川紅柴1號目的基因的克隆及測序
3.3.1 總RNA的提取
3.3.2 cDNA驗證
3.3.3 目的基因的克隆及測序
3.4 生長素調控AUX/IAA、HO基因在側根形成過程中的表達分析
3.4.1 總RNA的提取
3.4.2 cDNA驗證
3.4.3 生長素處理時間梯度對AUX/IAA、HO基因的表達分析
3.5 AUX/IAA、HO基因生物信息學分析
3.5.1 堿基序列同源性比對分析
3.5.2 氨基酸序列同源性比對分析
3.5.3 氨基酸一級結構預測分析
3.5.4 氨基酸二級結構預測分析
3.5.5 氨基酸保守結構域、序列多重比對及進化樹分析
4 討論
4.1 柴胡幼苗水培法條件探索
4.2 候選AUX/IAA、LBD、HO基因的克隆及測序分析
4.3 AUX/IAA、HO基因參與生長素調控側根發(fā)育表達分析
4.3.1 AUX/IAA基因參與生長素調控側根發(fā)育表達分析
4.3.2 HO基因參與生長素調控側根發(fā)育表達分析
結論
致謝
參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的與學位論文內容相關的學術論文及研究成果
【參考文獻】:
期刊論文
[1]馬爾康柴胡不同藥用部位解熱、保肝作用與急性毒性研究[J]. 閆婕,衛(wèi)瑩芳,龍飛,林波,康敏. 世界科學技術-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2016(08)
[2]赤霉素對擬南芥主根分生區(qū)和伸長區(qū)的調控[J]. 石英,韓毅強,鄭殿峰,馮乃杰,劉濤. 植物生理學報. 2015(01)
[3]春柴胡中柴胡皂苷a與d的含量測定[J]. 朱明恒. 云南中醫(yī)中藥雜志. 2014(07)
[4]不同柴胡配伍對柴葛解肌湯7種成分量的影響[J]. 孫慧敏,邢婕,李震宇,秦雪梅. 中草藥. 2014(12)
[5]水稻的側根發(fā)育及其影響因素[J]. 劉大同,荊彥平,陳晶晶,余徐潤,王忠. 作物學報. 2014(08)
[6]Traditional Use, Pharmacology, Toxicology, and Quality Control of Species in Genus Bupleurum L.[J]. YAO Ru-yu,ZOU Yuan-feng,CHEN Xing-fu. Chinese Herbal Medicines. 2013(04)
[7]北柴胡糖基轉移酶基因BcUGT1的表達分析及其原核表達與蛋白純化[J]. 陶韻文,徐潔森,魏建和,孫晶,徐艷紅,楊欣,張巖,劉娟,隋春. 藥學學報. 2013(08)
[8]柴胡主根與側根中柴胡皂苷a及皂苷d含量測定[J]. 孟杰,陳興福,楊文鈺,姚入宇,宋九華,李志飛,楊興旺. 藥物分析雜志. 2013(07)
[9]鈣信號試劑對水稻種子根負向光性生長的影響[J]. 陳娟,莫億偉,胥華偉. 中國水稻科學. 2013(03)
[10]基于抗炎鎮(zhèn)痛作用的氣滯胃痛顆粒有效組分活性研究[J]. 許雯雯,王帥,孟憲生,包永睿,潘英,韓凌. 時珍國醫(yī)國藥. 2013(02)
博士論文
[1]竹葉柴胡和北柴胡品質比較研究[D]. 王硯.成都中醫(yī)藥大學 2014
[2]花生開花下針期生長素的極性運輸及分布研究[D]. 彭瓊.湖南農業(yè)大學 2013
碩士論文
[1]柴胡醋制前后的化學及藥理比較研究[D]. 孫慧敏.山西大學 2015
[2]柴胡質量研究及2010年版《中國藥典》柴胡質量標準制訂[D]. 黃帥.石河子大學 2010
本文編號:3154897
【文章來源】:西南科技大學四川省
【文章頁數(shù)】:95 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
1 緒論
1.1 柴胡簡介
1.2 國內外研究現(xiàn)狀
1.2.1 柴胡化學成分研究現(xiàn)狀
1.2.2 柴胡藥理作用研究現(xiàn)狀
1.2.3 植物側根發(fā)育過程研究現(xiàn)狀
1.2.4 植物側根發(fā)育分子機制研究現(xiàn)狀
1.2.5 植物側根發(fā)育影響因素研究現(xiàn)狀
1.3 研究目的及意義
2 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 試驗材料
2.1.2 試驗試劑
2.1.3 試驗儀器
2.1.4 試驗試劑的配制
2.1.5 試驗器具預處理
2.2 方法
2.2.1 柴胡幼苗的培育
2.2.2 生長調節(jié)劑的添加
2.2.3 川紅柴1號cDNA的獲取
2.2.4 目的基因的克隆及測序
2.2.5 生長素調控AUX/IAA、HO基因在側根形成過程中的表達分析
3 結果分析
3.1 側根原基建成
3.1.1 川北柴1號側根原基建成
3.1.2 川紅柴1號側根原基建成
3.2 生長調節(jié)物質對側根發(fā)育的影響
3.2.1 生長調節(jié)物質對川北柴1號側根發(fā)育的影響
3.2.2 生長調節(jié)物質對川紅柴1號側根發(fā)育的影響
3.3 川紅柴1號目的基因的克隆及測序
3.3.1 總RNA的提取
3.3.2 cDNA驗證
3.3.3 目的基因的克隆及測序
3.4 生長素調控AUX/IAA、HO基因在側根形成過程中的表達分析
3.4.1 總RNA的提取
3.4.2 cDNA驗證
3.4.3 生長素處理時間梯度對AUX/IAA、HO基因的表達分析
3.5 AUX/IAA、HO基因生物信息學分析
3.5.1 堿基序列同源性比對分析
3.5.2 氨基酸序列同源性比對分析
3.5.3 氨基酸一級結構預測分析
3.5.4 氨基酸二級結構預測分析
3.5.5 氨基酸保守結構域、序列多重比對及進化樹分析
4 討論
4.1 柴胡幼苗水培法條件探索
4.2 候選AUX/IAA、LBD、HO基因的克隆及測序分析
4.3 AUX/IAA、HO基因參與生長素調控側根發(fā)育表達分析
4.3.1 AUX/IAA基因參與生長素調控側根發(fā)育表達分析
4.3.2 HO基因參與生長素調控側根發(fā)育表達分析
結論
致謝
參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表的與學位論文內容相關的學術論文及研究成果
【參考文獻】:
期刊論文
[1]馬爾康柴胡不同藥用部位解熱、保肝作用與急性毒性研究[J]. 閆婕,衛(wèi)瑩芳,龍飛,林波,康敏. 世界科學技術-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2016(08)
[2]赤霉素對擬南芥主根分生區(qū)和伸長區(qū)的調控[J]. 石英,韓毅強,鄭殿峰,馮乃杰,劉濤. 植物生理學報. 2015(01)
[3]春柴胡中柴胡皂苷a與d的含量測定[J]. 朱明恒. 云南中醫(yī)中藥雜志. 2014(07)
[4]不同柴胡配伍對柴葛解肌湯7種成分量的影響[J]. 孫慧敏,邢婕,李震宇,秦雪梅. 中草藥. 2014(12)
[5]水稻的側根發(fā)育及其影響因素[J]. 劉大同,荊彥平,陳晶晶,余徐潤,王忠. 作物學報. 2014(08)
[6]Traditional Use, Pharmacology, Toxicology, and Quality Control of Species in Genus Bupleurum L.[J]. YAO Ru-yu,ZOU Yuan-feng,CHEN Xing-fu. Chinese Herbal Medicines. 2013(04)
[7]北柴胡糖基轉移酶基因BcUGT1的表達分析及其原核表達與蛋白純化[J]. 陶韻文,徐潔森,魏建和,孫晶,徐艷紅,楊欣,張巖,劉娟,隋春. 藥學學報. 2013(08)
[8]柴胡主根與側根中柴胡皂苷a及皂苷d含量測定[J]. 孟杰,陳興福,楊文鈺,姚入宇,宋九華,李志飛,楊興旺. 藥物分析雜志. 2013(07)
[9]鈣信號試劑對水稻種子根負向光性生長的影響[J]. 陳娟,莫億偉,胥華偉. 中國水稻科學. 2013(03)
[10]基于抗炎鎮(zhèn)痛作用的氣滯胃痛顆粒有效組分活性研究[J]. 許雯雯,王帥,孟憲生,包永睿,潘英,韓凌. 時珍國醫(yī)國藥. 2013(02)
博士論文
[1]竹葉柴胡和北柴胡品質比較研究[D]. 王硯.成都中醫(yī)藥大學 2014
[2]花生開花下針期生長素的極性運輸及分布研究[D]. 彭瓊.湖南農業(yè)大學 2013
碩士論文
[1]柴胡醋制前后的化學及藥理比較研究[D]. 孫慧敏.山西大學 2015
[2]柴胡質量研究及2010年版《中國藥典》柴胡質量標準制訂[D]. 黃帥.石河子大學 2010
本文編號:3154897
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