細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)（Echinococcus granulosus）主要寄生于犬、狼、狐貍等犬科動(dòng)物終末宿主體內(nèi),其蟲(chóng)卵和孕節(jié)隨糞便排出體外,污染草料和飲水,牛、羊以及人等中間宿主吞食蟲(chóng)卵后感染此病,進(jìn)入消化道的六鉤蚴鉆入腸壁經(jīng)血流或淋巴散布到體內(nèi)各處,主要在肝和肺臟引起病變導(dǎo)致生長(zhǎng)緩慢,嚴(yán)重危害人的健康和畜牧業(yè)的快速發(fā)展,給世界經(jīng)濟(jì)造成嚴(yán)重?fù)p失。因此,防治此病在人類(lèi)健康和畜牧業(yè)發(fā)展方面非常重要。長(zhǎng)期以來(lái),各國(guó)研究者都在探索快速診斷此病的方法,但是并未在早期診斷方面取得突破性成果。綿羊是該寄生蟲(chóng)的中間宿主,若在綿羊感染早期,即在六鉤蚴進(jìn)入血液,早期分泌蛋白時(shí)診斷出此病,并采取有效治療措施,將對(duì)控制此病流行具有重要意義。目前,包蟲(chóng)病的診斷方式主要通過(guò)影像檢測(cè)（X線射片,CT,超聲,MR,DSA/SCA）,皮內(nèi)試驗(yàn)及血象檢測(cè)等。但這些方法多為后期診斷（即形成包囊后）。而本試驗(yàn)的方法是采用六鉤蚴分泌蛋白為抗原通過(guò)ELISA法對(duì)包蟲(chóng)病進(jìn)行早期診斷,目前針對(duì)包蟲(chóng)病早期診斷的相關(guān)研究國(guó)內(nèi)外尚未有過(guò)報(bào)道。因此選擇特異性高的抗原,建立敏感性高以及特異性強(qiáng)的早期診斷方法十分必要。本研究為了探索在感染早期能夠檢... 

【文章來(lái)源】：石河子大學(xué)新疆維吾爾自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 棘球蚴病的研究進(jìn)展
        1 病原學(xué)形態(tài)
        2 生活史
        3 種類(lèi)及基因型
        4 流行病學(xué)
            4.1 中間宿主流行病學(xué)研究進(jìn)展
            4.2 終末宿主-家畜包蟲(chóng)病流行病學(xué)研究進(jìn)展
        5 致病作用
        6 診斷CE
            6.1 血清測(cè)定
            6.2 成像
            6.3 放射學(xué)
            6.4 超聲波
            6.5 MRI
        7 治療
            7.1 化學(xué)藥物治療
            7.2 外科手術(shù)管理
        8 防治
    第二章 副肌球蛋白在寄生蟲(chóng)病診斷方面的研究進(jìn)展
        1 副肌球蛋白的分布與特征
        2 副肌球蛋白的分子生物學(xué)特征
        3 副肌球蛋白疫苗研究
            3.1 天然蛋白疫苗
            3.2 重組蛋白疫苗
            3.3 核酸疫苗
        4 本試驗(yàn)的目的意義
第二篇 試驗(yàn)內(nèi)容
    第一章 細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)六鉤蚴M26基因的克隆及原核表達(dá)
        1 材料
            1.1 試驗(yàn)材料
            1.2 主要儀器
            1.3 主要試劑
            1.4 溶液配制
        2 方法
            2.1 構(gòu)建M26克隆載體
            2.2 構(gòu)建M26表達(dá)載體
            2.3 pET-30a-M26重組蛋白SDS-PAGE分析小量表達(dá)
            2.4 pET-30a-M26重組蛋白SDS-PAGE分析大量表達(dá)
            2.5 蛋白質(zhì)純化
        3 結(jié)果
            3.1 M26序列合成結(jié)果
            3.2 pMD19-T-M26克隆載體測(cè)序結(jié)果
            3.3 pET-30a-M26表達(dá)載體雙酶切鑒定
            3.4 pET-30a-M26重組蛋白SDS-PAGE分析小量表達(dá)
            3.5 pET-30a-M26重組蛋白SDS-PAGE分析大量表達(dá)
            3.6 pET-30a-M26重組蛋白的純化
        4 討論
        5 小結(jié)
    第二章 M26多克隆抗體的制備
        1 材料
            1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.3 相關(guān)試劑的配置
        2 方法
            2.1 兔陰性血清的制備
            2.2 M26免疫新西蘭大白兔
            2.3 M26多抗血清效價(jià)檢測(cè)
            2.4 Western blot驗(yàn)證
            2.5 M26多克隆抗體的純化
            2.6 人工模型的建立
            2.7 多克隆抗體檢測(cè)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清中副肌球蛋白
        3 結(jié)果
            3.1 M26多抗血清效價(jià)的測(cè)定
            3.2 重組蛋白M26制備的多抗血清Western blot驗(yàn)證
            3.3 M26多隆抗體的純化
            3.4 M26多克隆抗體效價(jià)的測(cè)定
            3.5 人工模型的建立
            3.6 多克隆抗體檢測(cè)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清中副肌球蛋白
        4 討論
        5 小結(jié)
    第三章 M26陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞的篩選
        1 材料
            1.1 試驗(yàn)材料
            1.2 試驗(yàn)儀器與耗材
            1.3 試驗(yàn)試劑
            1.4 相關(guān)試劑的配置
        2 方法
            2.1 動(dòng)物免疫
            2.2 骨髓瘤細(xì)胞的飼養(yǎng)
            2.3 免疫后小鼠脾細(xì)胞的制備
            2.4 細(xì)胞融合
            2.5 陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞的第一次篩選
            2.6 陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞的第二次篩選
            2.7 陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞的亞類(lèi)鑒定
            2.8 陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞檢測(cè)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清中副肌球蛋白
        3 結(jié)果
            3.1 小鼠免疫后的抗體水平測(cè)定
            3.2 陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞的第一次篩選
            3.3 陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞的第二次篩選
            3.4 陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞亞型分析
            3.5 陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞檢測(cè)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清中副肌球蛋白
        4 討論
        5 小結(jié)
全文結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介
石河子大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文導(dǎo)師評(píng)閱表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[2]熊貓足螨副肌球蛋白基因的克隆與原核表達(dá)[D]. 嚴(yán)慧娟.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[3]抗山羊傳染性胸膜肺炎支原體PG3單克隆抗體的制備及研究[D]. 李少松.西南大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3154407