發(fā)布時間：2021-04-21 12:17

　　【目的】本研究旨在通過克隆蘋果蠹蛾Cydia pomonella細胞色素P450基因CYP332A19和CYP337B19,并對其進行序列和表達分析,以更好地了解這兩個P450基因在植物次生物質(zhì)解毒方面的作用,為進一步的功能研究提供依據(jù)。【方法】采用本地BLAST搜索蘋果蠹蛾轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫獲得細胞色素P450基因cDNA序列,采用RT-PCR技術(shù)克隆目的基因的編碼區(qū)。利用生物信息學(xué)軟件分析目的基因的序列特征及與其他近緣物種的P450基因的系統(tǒng)進化關(guān)系。采用RT-qPCR技術(shù)測定目的基因在蘋果蠹蛾不同發(fā)育階段（卵、1-5齡幼蟲、蛹和成蟲）、4齡幼蟲不同組織（頭部、表皮、脂肪體、中腸和馬氏管）以及4齡幼蟲分別取食添加0.1%香豆素和0.5%槲皮素的人工飼料2 d后的表達水平�！窘Y(jié)果】克隆獲得蘋果蠹蛾細胞色素P450基因CYP332A19（GenBank登錄號:MF574708）和CYP337B19（GenBank登錄號:MF574697）的全長cDNA序列,開放閱讀框（ORF）分別長1 518和1 491 bp,分別編碼505和496個氨基酸,其蛋白質(zhì)分子量分別為58.586和57.734 ... 

【文章來源】：昆蟲學(xué)報. 2020,63(08)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：11 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 供試昆蟲
    1.2 供試藥劑
    1.3 基因克隆、測序和鑒定
    1.4 基因序列分析
    1.5 CYP332A19和CYP337B19基因表達水平分析
    1.6 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果
    2.1 蘋果蠹蛾CYP332A19和CYP337B19基因的克隆及序列分析
    2.2 蘋果蠹蛾CYP332A19和CYP337B19基因的系統(tǒng)發(fā)育
    2.3 CYP332A19和CYP337B19在蘋果蠹蛾不同發(fā)育階段的表達模式
    2.4 CYP332A19和CYP337B19在蘋果蠹蛾中的組織特異性表達模式
    2.5 植物次生物質(zhì)處理后蘋果蠹蛾CYP332A19和CYP337B19基因的表達水平
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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[6]入侵生物蘋果蠹蛾監(jiān)測與防控技術(shù)研究——公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項（200903042）進展[J]. 張潤志,王福祥,張雅林,陳漢杰,羅進倉,王勤英,劉萬學(xué),艾尼瓦爾·木沙,蒲崇建,嚴勇敢,郭靜敏,劉星月,陳繼光,張增幅,楊森,許建軍,崔艮中,徐婧.  應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2012(01)
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[8]寄主植物信息化合物對蘋果蠹蛾行為的影響及其在防控中的應(yīng)用[J]. 周文,劉萬學(xué),萬方浩,申建茹.  應(yīng)用生態(tài)學(xué)報. 2010(09)
[9]植物次生代謝物質(zhì)和害蟲防治[J]. 徐正浩,崔紹榮,何勇,李迪,趙明,張旭,余柳青.  植物保護. 2004(04)
[10]細胞色素P450在植物與昆蟲相互關(guān)系中的作用[J]. 邱星輝,冷欣夫.  昆蟲知識. 2002(01)

博士論文
[1]蘋果蠹蛾解毒酶基因的克隆及功能研究[D]. 楊雪清.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014



本文編號：3151741