DNA甲基化對植物的生長發(fā)育、器官分化等生物過程有著很重要的影響。研究通過構建森林草莓DDM1基因（Decrease in DNA methylation1）RNA干擾（RNA interference, RNAi）載體,對該基因的功能進行初步探究。以森林草莓的cDNA為模板克隆出基因正向片段DDM1-1和反向片段DDM1-2,然后將其分別連接到內(nèi)含子的干涉表達載體上,構建RNAi表達載體;再通過凍融法將其轉入到根癌農(nóng)桿菌EHA105感受態(tài)細胞中,利用葉盤法進行森林草莓遺傳轉化;最后通過Gus染色對陽性苗進行鑒定,然后對轉基因草莓植株進行了表型觀察和FveDDM1基因表達量分析。結果顯示,與對照植株相比,轉基因植株FveDDM1基因的表達量降低,葉片出現(xiàn)了明顯的畸形,葉邊緣變窄,缺刻變深。研究結果可為進一步探討DDM1基因的功能及甲基化對植物葉片生長發(fā)育的影響提供一定的基礎。 

【文章來源】：生物學雜志. 2020,37(05)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 正向片段DDM1-1的片段的克隆和回收
        1.2.2 中間載體的構建
        1.2.3 反向片段DDM1-2的擴增和DDM1基因干涉表達載體的構建
        1.2.4 草莓外植體的制備
        1.2.5 農(nóng)桿菌介導的森林草莓的遺傳轉化
        1.2.6 GUS染色
        1.2.7 實時熒光定量PCR
2 結果與分析
    2.1 森林草莓FveDDM1基因正向片段DDM1-1擴增
    2.2 中間載體的構建
    2.3 FveDDM1基因反向片段DDM1-2擴增和干涉載體的構建
    2.4 轉基因草莓株系GUS染色鑒定
    2.5 轉基因草莓中甲基化修飾基因FveDDM1的表達分析
    2.6 轉基因草莓的表型分析
3 討論與結論



本文編號：3149018