【目的】USPs蛋白（universal stress proteins）是一類脅迫相關(guān)類蛋白,被廣泛報(bào)道參與了植物應(yīng)對(duì)非生物脅迫的過(guò)程。本研究通過(guò)對(duì)青杄中PwUSP1基因進(jìn)行功能分析及驗(yàn)證,探索PwUSP1在植物應(yīng)對(duì)鹽和干旱脅迫時(shí)的作用,從而為未來(lái)通過(guò)轉(zhuǎn)基因工程提高青杄對(duì)非生物脅迫的耐受性提供候選基因。【方法】通過(guò)瞬時(shí)轉(zhuǎn)化煙草葉片實(shí)驗(yàn)揭示PwUSP1在細(xì)胞中的定位;利用酵母雙雜實(shí)驗(yàn)鑒定PwUSP1自身能否形成同源二聚體;通過(guò)農(nóng)桿菌侵染法轉(zhuǎn)化野生型擬南芥（WT）,獲得純合的PwUSP1過(guò)表達(dá)株系。通過(guò)測(cè)定干旱和鹽脅迫下過(guò)表達(dá)株系（L1、L7）及野生型（WT）和空載體（VC）株系的存活率、失水率,來(lái)分析比較不同株系對(duì)于干旱和鹽脅迫的耐受能力;通過(guò)二氨基聯(lián)苯胺（DAB）和氯化硝基四氮銼藍(lán)（NBT）染色,測(cè)定超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化物酶（POD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）以及丙二醛（MDA）的含量,研究PwUSP1發(fā)揮作用的生理機(jī)制�！窘Y(jié)果】煙草亞細(xì)胞定位實(shí)驗(yàn)表明,PwUSP1定位于細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜中。酵母雙雜結(jié)果顯示PwUSP1蛋白自身能夠形成同源二聚體。利用qRT-PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)... 

【文章來(lái)源】：北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,42(10)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：9 頁(yè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]青桿PwUSP1基因的克隆及表達(dá)模式分析[J]. 崔曉燕,李長(zhǎng)江,孫帆,張世宏,張凌云.  植物生理學(xué)報(bào). 2014(04)

博士論文
[1]鹽芥TsNAC1轉(zhuǎn)錄因子及其在玉米中同源基因功能的研究[D]. 劉燦.山東大學(xué) 2018
[2]黃瓜NAC轉(zhuǎn)錄因子CsATAF1響應(yīng)干旱脅迫的機(jī)制研究[D]. 王晉芳.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018



本文編號(hào)：3145956