蘋果（Malus domestica Borkh.）是一種具有很高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的果樹,紅色果皮的蘋果深受人們喜愛,因此分離與果實(shí)著色相關(guān)的基因并進(jìn)一步進(jìn)行功能驗(yàn)證具有很重要的意義。前期,課題組研究發(fā)現(xiàn)‘元帥’蘋果中MdbHLH51和MdbHLH155的表達(dá)量與花青素含量顯著相關(guān),本研究進(jìn)一步分離了MdbHLH51和MdbHLH155,構(gòu)建了過(guò)表達(dá)載體MdbHLH51-GFP和MdbHLH155-GFP,并通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法進(jìn)行洋蔥表皮亞細(xì)胞定位分析,蘋果果皮瞬時(shí)表達(dá)和轉(zhuǎn)化‘嘎啦’愈傷組織實(shí)驗(yàn),并成功轉(zhuǎn)入煙草和擬南芥,對(duì)MdbHLH51和MdbHLH155在花青素合成中的作用進(jìn)行了初步研究。主要研究結(jié)果如下:1.以‘元帥’蘋果果皮的cDNA為模板,通過(guò)RT-PCR克隆MdbHLH51（基因序列號(hào):MD01G1155000）和MdbHLH155（基因序列號(hào):MD11G1252200）。MdbHLH51的氨基酸數(shù)目是279,開放閱讀框837 bp,MdbHLH155的氨基酸數(shù)目是416,開放閱讀框1248 bp。生物信息學(xué)分析表明,對(duì)兩個(gè)轉(zhuǎn)錄因子的亞細(xì)胞定位預(yù)測(cè)均定位在細(xì)胞核。進(jìn)化樹分析表明,... 

【文章來(lái)源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)甘肅省

【文章頁(yè)數(shù)】：77 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

蘋果果皮中花青素合成與其他酚類物質(zhì)合成的關(guān)系

蘋果MdbHLH51和MdbHLH155的基因克隆及其在花青素合成中的作用91.6技術(shù)路線圖圖1-1本研究技術(shù)路線Fig.1-1Theprocedureofresearch

蘋果MdbHLH51和MdbHLH155的基因克隆及其在花青素合成中的作用17過(guò)RT-PCR克隆得到分別為837bp、1248bp左右的單一特異性條帶（圖2-1），與預(yù)期大小一致。圖2-1蘋果MdbHLH51和MdbHLH155擴(kuò)增產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳圖，M：DL2000DNAmarkerFig.2-1PCRamplificationresultonagarosegelofMdbHLH51andMdbHLH155,M:DL2000DNAmarker2.3.2生物信息學(xué)分析2.3.2.1MdbHLH51和MdbHLH155蛋白理化性質(zhì)分析對(duì)MdbHLH51和MdbHLH155進(jìn)行理化性質(zhì)分析，結(jié)果表明，MdbHLH51染色體定位在第1條染色體，氨基酸數(shù)目是279，分子量是30265.52，理論等電點(diǎn)是9.22，正電荷殘基數(shù)是35，負(fù)電荷殘基數(shù)是26，脂肪系數(shù)74.16（疏水性蛋白），不穩(wěn)定系數(shù)是53.53（不穩(wěn)定蛋白），總平均親水性是-0.327。MdbHLH155染色體定位在第11條染色體，氨基酸數(shù)目是416，分子量是46213.63，理論等電點(diǎn)是5.93，正電荷殘基數(shù)是38，負(fù)電荷殘基數(shù)是48，脂肪系數(shù)59.35（疏水性蛋白），不穩(wěn)定系數(shù)是47.57（不穩(wěn)定蛋白），總平均親水性是-0.608（表2-3）。蛋白質(zhì)跨膜區(qū)分析和信號(hào)肽預(yù)測(cè)結(jié)果表明，MdbHLH51跨膜區(qū)的氨基酸個(gè)數(shù)是0.01579，MdbHLH155跨膜區(qū)的氨基酸個(gè)數(shù)是0.01983，MdbHLH51和MdbHLH155都是膜蛋白，位于細(xì)胞膜表面，無(wú)信號(hào)肽。表2-3理化性質(zhì)分析Table2-3Physicochemicalpropertiesanalysis

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]毛竹bHLH轉(zhuǎn)錄因子的鑒定及其在干旱和鹽脅迫條件下的表達(dá)分析[J]. 徐秀榮,楊克彬,王思寧,高志民.  植物科學(xué)學(xué)報(bào). 2019(05)
[2]蘋果MdNAC9的克隆及其調(diào)控黃酮醇合成功能的鑒定[J]. 孫慶國(guó),姜生輝,房鴻成,張?zhí)炝?王楠,陳學(xué)森.  園藝學(xué)報(bào). 2019(11)
[3]銀杏bHLH家族轉(zhuǎn)錄因子生物信息學(xué)及表達(dá)分析[J]. 馮磊,石元豹,汪貴斌,曹福亮.  江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2019(02)
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[5]蘋果CR4基因家族鑒定與表達(dá)分析[J]. 呂前前,劉鈺璽,李靜軒,馬宗桓,姜雪峰,王寶林,毛娟,褚明宇,陳佰鴻,左存武.  園藝學(xué)報(bào). 2018(10)
[6]梅花花青素苷調(diào)控基因PmMYB1的分離及功能分析[J]. 張芹,徐宗大,趙凱,李曉偉,張羅沙,張啟翔.  林業(yè)科學(xué). 2018(10)
[7]MdMYB10對(duì)蘋果果皮苯丙氨酸代謝的影響[J]. 張波,曲東,楊惠娟,楊亞洲,王帆,朱珍珍,趙政陽(yáng).  園藝學(xué)報(bào). 2018(08)
[8]甘薯IbGL3的克隆和表達(dá)分析[J]. 徐靖,朱紅林,朱家紅,符策強(qiáng),韓義勝,唐力瓊,王敏芬,王新華,王效寧.  廣西植物. 2018(10)
[9]MdMYB1啟動(dòng)子甲基化對(duì)不同色澤類型蘋果品種果皮花青苷合成的調(diào)控作用[J]. 常博,馬長(zhǎng)青,劉聰,劉莉,王英,楊亞洲,趙政陽(yáng).  分子植物育種. 2018(22)
[10]紫娟茶樹葉片不同發(fā)育期花青素積累及合成相關(guān)基因的表達(dá)[J]. 蔣會(huì)兵,孫云南,李梅,戴偉東,宋維希,田易萍,夏麗飛,陳林波.  茶葉科學(xué). 2018(02)

博士論文
[1]蘋果MdMYB1啟動(dòng)子甲基化對(duì)套袋果實(shí)著色的調(diào)控研究[D]. 馬長(zhǎng)青.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2019
[2]棉花SAUR基因家族分析與功能驗(yàn)證[D]. 李錫花.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[3]蘋果果皮色澤遺傳特性及花青苷合成相關(guān)基因的表達(dá)分析[D]. 孟蕊.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[4]紅肉蘋果MYB10及其啟動(dòng)子對(duì)花青苷合成相關(guān)基因的調(diào)控作用[D]. 孫曉紅.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[5]荔枝果皮花色素苷生物合成關(guān)鍵調(diào)控因子的篩選及其功能驗(yàn)證[D]. 賴彪.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[6]蘋果BTB-TAZ蛋白MdBTs調(diào)控MdbHLH104影響PMH+-ATP酶的活性和鐵的動(dòng)態(tài)平衡[D]. 趙強(qiáng).山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[7]黃麻再生遺傳轉(zhuǎn)化體系優(yōu)化及UGPase、CesA1、CCoAOMT基因克隆與功能鑒定[D]. 張高陽(yáng).福建農(nóng)林大學(xué) 2014
[8]蘋果MdTTG1、MdMYB9與MdMYB11基因調(diào)控花青苷合成的作用機(jī)制研究[D]. 安秀紅.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[9]蘋果bHLH轉(zhuǎn)錄因子MdTTL1對(duì)低溫誘導(dǎo)花青苷合成和果實(shí)著色的多途徑調(diào)控[D]. 謝興斌.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[10]蘋果bHLH基因MdCIbHLH1克隆及功能分析[D]. 馮曉明.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011

碩士論文
[1]火龍果色素相關(guān)bHLH轉(zhuǎn)錄因子克隆及功能分析[D]. 管麗婷.貴州大學(xué) 2019
[2]紅花草莓花色對(duì)溫度的響應(yīng)及花色相關(guān)基因表達(dá)分析[D]. 梁吉昌.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[3]蘋果TFIIE、ACBP4和MAP70-1基因的克隆與功能鑒定[D]. 馬彥妮.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[4]擬南芥bHLH轉(zhuǎn)錄因子QQ1和QQ2功能的研究[D]. 陳永歡.西北大學(xué) 2018
[5]西瓜ClMYB46基因的耐低溫功能鑒定及調(diào)控作用分析[D]. 曹蕾.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[6]蘋果MdMYB4基因表達(dá)載體構(gòu)建、愈傷轉(zhuǎn)化及抗鹽性鑒定[D]. 曲常志.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[7]蘋果bHLH轉(zhuǎn)錄因子家族的鑒定及表達(dá)分析[D]. 楊金華.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[8]甘薯bHLH基因家族的鑒定與初步分析[D]. 裴苓荃.江蘇師范大學(xué) 2017
[9]茶樹MYB轉(zhuǎn)錄因子CsAN1調(diào)控花青素的作用機(jī)制研究[D]. 孫彬妹.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[10]蘋果MdHIRs蛋白與MdJAZs蛋白互作對(duì)花青苷積累的調(diào)控[D]. 陳可欽.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3141896