蘋果（Malus domestica Borkh.）是一種具有很高經(jīng)濟價值的果樹,紅色果皮的蘋果深受人們喜愛,因此分離與果實著色相關(guān)的基因并進一步進行功能驗證具有很重要的意義。前期,課題組研究發(fā)現(xiàn)‘元帥’蘋果中MdbHLH51和MdbHLH155的表達量與花青素含量顯著相關(guān),本研究進一步分離了MdbHLH51和MdbHLH155,構(gòu)建了過表達載體MdbHLH51-GFP和MdbHLH155-GFP,并通過農(nóng)桿菌介導的方法進行洋蔥表皮亞細胞定位分析,蘋果果皮瞬時表達和轉(zhuǎn)化‘嘎啦’愈傷組織實驗,并成功轉(zhuǎn)入煙草和擬南芥,對MdbHLH51和MdbHLH155在花青素合成中的作用進行了初步研究。主要研究結(jié)果如下:1.以‘元帥’蘋果果皮的cDNA為模板,通過RT-PCR克隆MdbHLH51（基因序列號:MD01G1155000）和MdbHLH155（基因序列號:MD11G1252200）。MdbHLH51的氨基酸數(shù)目是279,開放閱讀框837 bp,MdbHLH155的氨基酸數(shù)目是416,開放閱讀框1248 bp。生物信息學分析表明,對兩個轉(zhuǎn)錄因子的亞細胞定位預測均定位在細胞核。進化樹分析表明,... 

【文章來源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學甘肅省

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

蘋果果皮中花青素合成與其他酚類物質(zhì)合成的關(guān)系

蘋果MdbHLH51和MdbHLH155的基因克隆及其在花青素合成中的作用91.6技術(shù)路線圖圖1-1本研究技術(shù)路線Fig.1-1Theprocedureofresearch

蘋果MdbHLH51和MdbHLH155的基因克隆及其在花青素合成中的作用17過RT-PCR克隆得到分別為837bp、1248bp左右的單一特異性條帶（圖2-1），與預期大小一致。圖2-1蘋果MdbHLH51和MdbHLH155擴增產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳圖，M：DL2000DNAmarkerFig.2-1PCRamplificationresultonagarosegelofMdbHLH51andMdbHLH155,M:DL2000DNAmarker2.3.2生物信息學分析2.3.2.1MdbHLH51和MdbHLH155蛋白理化性質(zhì)分析對MdbHLH51和MdbHLH155進行理化性質(zhì)分析，結(jié)果表明，MdbHLH51染色體定位在第1條染色體，氨基酸數(shù)目是279，分子量是30265.52，理論等電點是9.22，正電荷殘基數(shù)是35，負電荷殘基數(shù)是26，脂肪系數(shù)74.16（疏水性蛋白），不穩(wěn)定系數(shù)是53.53（不穩(wěn)定蛋白），總平均親水性是-0.327。MdbHLH155染色體定位在第11條染色體，氨基酸數(shù)目是416，分子量是46213.63，理論等電點是5.93，正電荷殘基數(shù)是38，負電荷殘基數(shù)是48，脂肪系數(shù)59.35（疏水性蛋白），不穩(wěn)定系數(shù)是47.57（不穩(wěn)定蛋白），總平均親水性是-0.608（表2-3）。蛋白質(zhì)跨膜區(qū)分析和信號肽預測結(jié)果表明，MdbHLH51跨膜區(qū)的氨基酸個數(shù)是0.01579，MdbHLH155跨膜區(qū)的氨基酸個數(shù)是0.01983，MdbHLH51和MdbHLH155都是膜蛋白，位于細胞膜表面，無信號肽。表2-3理化性質(zhì)分析Table2-3Physicochemicalpropertiesanalysis

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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[3]蘋果TFIIE、ACBP4和MAP70-1基因的克隆與功能鑒定[D]. 馬彥妮.甘肅農(nóng)業(yè)大學 2018
[4]擬南芥bHLH轉(zhuǎn)錄因子QQ1和QQ2功能的研究[D]. 陳永歡.西北大學 2018
[5]西瓜ClMYB46基因的耐低溫功能鑒定及調(diào)控作用分析[D]. 曹蕾.華中農(nóng)業(yè)大學 2017
[6]蘋果MdMYB4基因表達載體構(gòu)建、愈傷轉(zhuǎn)化及抗鹽性鑒定[D]. 曲常志.山東農(nóng)業(yè)大學 2017
[7]蘋果bHLH轉(zhuǎn)錄因子家族的鑒定及表達分析[D]. 楊金華.西北農(nóng)林科技大學 2017
[8]甘薯bHLH基因家族的鑒定與初步分析[D]. 裴苓荃.江蘇師范大學 2017
[9]茶樹MYB轉(zhuǎn)錄因子CsAN1調(diào)控花青素的作用機制研究[D]. 孫彬妹.華南農(nóng)業(yè)大學 2016
[10]蘋果MdHIRs蛋白與MdJAZs蛋白互作對花青苷積累的調(diào)控[D]. 陳可欽.山東農(nóng)業(yè)大學 2014



本文編號：3141896