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果園土壤微生物中果膠降解酶的基因資源的挖掘與酶學(xué)特性研究

發(fā)布時(shí)間:2021-04-16 05:58
  森林土壤微生物資源是森林資源的重要組成部分,在自然界中發(fā)揮著極其重要的作用。果園作為經(jīng)濟(jì)林的代表,是森林生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分。果園土壤微生物群落對果園生態(tài)系統(tǒng)健康的維系具有不可估量的價(jià)值,其土壤微生物中蘊(yùn)含著極其豐富的基因資源。本文針對果園土壤微生物中存有的果膠降解相關(guān)酶類進(jìn)行研究,并從中挖掘具有工業(yè)應(yīng)用價(jià)值的果膠酶,研究結(jié)果將豐富果園土壤微生物資源利用價(jià)值,對于森林生態(tài)系統(tǒng)健康和基因資源挖掘也具有借鑒價(jià)值。在紡織工業(yè)中,傳統(tǒng)的棉麻脫膠工藝是堿高溫煮煉,不僅高能耗、排污量大而且影響棉麻織物的品質(zhì)。酶精煉工藝是近幾年新興的棉麻脫膠工藝,使用的堿性果膠酶催化底物專一性強(qiáng)且反應(yīng)條件溫和,具有低污染、低耗能、高品質(zhì)等優(yōu)點(diǎn),成為了棉麻脫膠工藝研究的熱點(diǎn)。但目前大多數(shù)果膠酶仍然不能滿足棉麻脫膠對酶制劑的特殊性質(zhì)要求,有待于進(jìn)一步挖掘和開發(fā)新的性質(zhì)優(yōu)良的棉麻脫膠用果膠酶;诟咄亢昊驕y序技術(shù),本研究從富含果膠的果園土壤的宏基因組中挖掘得到4個(gè)果膠酸裂解酶基因pela,pelb,pelc和peld。將4個(gè)果膠酸裂解酶基因分別連接原核表達(dá)載體pET30a(+)和真核表達(dá)載體pPIC9,用于驗(yàn)證基因... 

【文章來源】:山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】:65 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

果園土壤微生物中果膠降解酶的基因資源的挖掘與酶學(xué)特性研究


果膠的結(jié)構(gòu)

質(zhì)粒


圖2-1質(zhì)粒pET30a(+)-w/的構(gòu)建??Figure?2-1?Construction?of?the?plasmid?pET30a(+)-p^/??

質(zhì)粒,片段,回收試劑,濃度控制


其質(zhì)粒的濃度控制在酶的消化范圍內(nèi)。酶切體系在37°C消化2?h,消化完成后用濃??度為1%的瓊脂糖凝膠電泳后,用瓊脂糖凝膠回收試劑盒回收載體片段。用T4?DNA?ligase??連接經(jīng)雙酶切的pe/基因和pPIC9片段(如圖2-2)。??BglU??Ampicillin?5AOX??^???EcoR?l??身?/??PBR322?M??/?\?^??Bgin?婦,,??1?"f?Norl??3AOX?\?4?3A〇X(TT)??HIS4??圖2-2質(zhì)粒pPIC-pe/的構(gòu)建??Figure?2-2?Construction?of?the?plasmid?pPIC-pe/??連接體系如下:??21??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[3]森林土壤微生物生態(tài)學(xué)研究進(jìn)展[J]. 扈花,劉澤彬,樊亞鵬,王彥輝,左海軍,王亞蕊.  世界林業(yè)研究. 2016(03)
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[6]天山一號冰川產(chǎn)果膠酶酵母菌的篩選及其系統(tǒng)發(fā)育分析[J]. 鄭曉吉,史學(xué)偉,許程劍,董娟,倪永清.  中國釀造. 2015(01)
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[9]不同碳源下畢赤酵母GS115蛋白組學(xué)分析[J]. 田小梅,任建洪,房聰.  中國生物工程雜志. 2012(01)
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博士論文
[1]果膠酶基因的克隆表達(dá)及其在小尾寒羊瘤胃環(huán)境中的多樣性分析[D]. 苑鵬.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012

碩士論文
[1]堿性果膠酶菌株篩選及果膠裂解酶基因的克隆與表達(dá)[D]. 姚曉靜.哈爾濱商業(yè)大學(xué) 2015
[2]堿性果膠酶的制備及其在紡織前處理中的應(yīng)用[D]. 吳茜.浙江工業(yè)大學(xué) 2008



本文編號:3140877

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