目的:探索LASS2在肥胖、肝脂肪變性模型中的表達(dá)變化,初步了解LASS2與肝脂質(zhì)代謝的關(guān)系。方法:采用實時熒光定量PCR法、Western blot法分別檢測雄性C57BL/6J小鼠、ob/ob小鼠、db/db小鼠、KK-Ay小鼠和APOE^-/-小鼠肝組織中LASS2 m RNA和蛋白的表達(dá)水平,其中C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為普食組和高脂組（均從6周齡開始喂養(yǎng)普食或高脂16周）。FFAs誘導(dǎo)小鼠原代肝細(xì)胞、Hepa1-6肝癌細(xì)胞脂肪變性,定量PCR法、Western blot法分別檢測各組細(xì)胞LASS2 m RNA和蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:與C57BL/6J小鼠比較,ob/ob小鼠、db/db小鼠、KK-Ay小鼠和APOE^-/-小鼠肝組織中LASS2的m RNA和蛋白表達(dá)水平均顯著降低（P<0.01）;C57BL/6J高脂喂養(yǎng)組小鼠肝組織中LASS2的蛋白表達(dá)水平較普食組明顯下調(diào)（P<0.01）,但其m RNA表達(dá)水平未見明顯差異（P>0.05）;與原代肝細(xì)胞和Hepa1-6肝癌細(xì)胞非FFAs誘導(dǎo)組相比,FFAs誘導(dǎo)組肝細(xì)... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：142 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

小鼠原代肝細(xì)胞的分離與鑒定（A.光鏡下觀察B.CK-18免疫細(xì)胞化學(xué)）

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文46圖1.1小鼠原代肝細(xì)胞的分離與鑒定（A.光鏡下觀察B.CK-18免疫細(xì)胞化學(xué)）Fig1.1Isolationandidentificationofprimarymousehepatocytes(A.Observationunderlightmicroscope,scalebar:100μmB.CK-18immunocytochemistry,scalebar:50μm)3.2LASS2在不同品系肥胖小鼠肝組織中的表達(dá)與同齡C57BL/6J小鼠（普食）比較，QPCR結(jié)果顯示，LASS2mRNA表達(dá)水平在肥胖小鼠肝組織中明顯下調(diào)（P<0.001）（見圖1.2A）；Westernblot結(jié)果顯示，APOE-/-小鼠、ob/ob小鼠、db/db小鼠、KK-Ay小鼠肝組織中LASS2蛋白表達(dá)水平分別下調(diào)68%、32%、39%、65%（P<0.01）（見圖1.2B）。圖1.2LASS2在不同品系肥胖小鼠肝組織中mRNA和蛋白表達(dá)水平Fig1.2LASS2mRNA(A)andprotein(B)expressionintheliverofdifferentstrainsofobese

重慶醫(yī)科大學(xué)博士研究生學(xué)位論文47miceandhealthycontrolsubjects（*P<0.05comparedwithC57BL/6Jmice,n=3/group）3.3LASS2在高脂誘導(dǎo)肝脂肪變性小鼠肝組織中的表達(dá)C57BL/6J（CHD組與HFD組）小鼠肝組織切片HE染色顯示，HFD組小鼠肝組織較CHD組小鼠肝細(xì)胞出現(xiàn)明顯脂肪變性，脂滴大小不等，局部可見炎性細(xì)胞浸潤（見圖1.3）。與CHD組小鼠相比，QPCR結(jié)果顯示，HFD組小鼠肝組織LASS2mRNA表達(dá)水平無明顯差異（P>0.05）（見圖1.4A）；Westernblot結(jié)果顯示，高脂誘導(dǎo)肝脂肪變性組小鼠肝組織中LASS2的蛋白表達(dá)水平明顯降低（P<0.01）（見圖1.4B）。圖1.3C57BL/6J小鼠肝組織病理切片HE染色（A.CHD組B.HFD組，放大倍數(shù)200×）Fig1.3HEstainingofliverpathologicalsectionsofC57BL/6Jmice(A.CHDgroupB.HFDgroup,magnification:200×)


本文編號：3139886