美國白蛾（Hyphantria cunea Drury）是一種世界性檢疫害蟲,危害多種植物,給社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展、生態(tài)環(huán)境造成嚴(yán)重?fù)p失。昆蟲神經(jīng)肽能夠激活G蛋白偶聯(lián)受體（G Protein coupled receptors,GPCRs）,從而調(diào)控多種生理功能,破壞昆蟲神經(jīng)肽信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可以達(dá)到控制害蟲的目的。本研究以美國白蛾為研究對(duì)象,克隆獲得神經(jīng)肽（Neuropeptides F,NPF）和短神經(jīng)肽（Short neuropeptide F,sNPF）及其受體基因cDNA全長(zhǎng),并利用RNAi技術(shù)（dsRNA和siRNA）進(jìn)行基因功能研究,對(duì)NPF/NPFR基因功能和對(duì)美國白蛾取食及生殖、饑餓脅迫進(jìn)行了功能分析,具體結(jié)論如下:1、成功鑒定出 HcNPF、HcsNPF、HcNPFR、HcsNPFR-A10 與 HcsNPFR-A11 基因,獲得其全長(zhǎng)基因序列,基因閱讀框（ORF）長(zhǎng)246～1401bp,編碼81～466個(gè)氨基酸,蛋白的分子質(zhì)量為9.25kDa～52.94kDa,pI為6.73～9.25,HcsNPFR-A10為酸性蛋白,其余為堿性蛋白。HcNPF和HscNPF均含信號(hào)肽。成熟肽的... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２美國白蛾各組織總ＲＮＡ??Ｆｉｇ．?２－２?Ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?ｉｎ?Ｈ．?ｃｕｎｃａ??注：１：頭；２：中腸；３：卵巢；４：精巢

ａｌｅ程序計(jì)??算美國白蛾ＮＰＦ蛋白的疏水性圖譜，ＨｃＮＰＦＲ的疏水性較強(qiáng)，最大值達(dá)到３．４５６，且位??于Ｎ端的信號(hào)肽剪切處，最小值為－３．１３３。氨基酸疏水性較強(qiáng)位在７５，８５，１１１，１５０，??１８５，?２４７，?２７６位附近，而氨基酸親水性較強(qiáng)位在５９，２６５，３５４位附近。ＨｃＮＰＦ蛋白??中亮氨酸Ｌｅｕ?（４８?jìng)�(gè)）的相對(duì)含量最多占氨基酸總數(shù)的１２．２８％。信號(hào)肽預(yù)測(cè)結(jié)果顯??示，ＨｃＮＰＦＲ不含信號(hào)肽序列。跨膜結(jié)構(gòu)分析結(jié)果顯示，ＨｃＮＰＦＲ蛋白擁有７個(gè)跨膜螺??旋結(jié)構(gòu)（圖２－６）。ＨｃＮＰＦＲ蛋白的保守結(jié)構(gòu)域分析結(jié)果顯示，ＨｃＮＰＦＲ蛋白具有Ｇ蛋??白偶聯(lián)受體家族典型的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)７個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域，屬于ＧＰＣＲｓ家族（圖２－７）。??ＴＭＨＭＭ?ｐｏｓｔｅｒｉｏｒ?ｐｒｏｂａｂｉｌｉｔｉｅｓ?ｆｏｒ?ＨｃＮＰＦＲ??１．２??．?．?■???■?．?．???＂ＯｆｆｉＥ??５０?１００?１５０?２００?２５０?３００?３５０??ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ???ｉｎｓｉｄｅ??ｏｕｔｓｉｄｅ????圖２－６?ＴＭＨＭＭ軟件分析ＨｃＮＰＦＲ跨膜區(qū)結(jié)果??Ｆｉｇ．?２－６?Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ?ｒｅｇｉｏｎｓ?ｏｆ?ＨｃＮＰＦＲ?ｕｓｉｎｇ?ＴＭＨＭＭ?ｓｏｆｔｗａｒｅ??Ｉ?．?．?，?．?Ｔ?，?．?．?．?ｙ?．?．?．?，?，?Ｔ?．?．?＞?Ｆ?＂ｆ?．?ｗ?？?■．?ｙ?■?．．．?ｙ?Ｔ??＾?Ｂ?ｂａｌｌｓ?Ｉ?ｖ?■?ｋａｉｌｓ??ｂ?ｂ？ｉｂ?ｍ?ｈａｔｈ??Ｓｕｐｅｒｆａｎｉｌｉｅｓ?７ｔ－ｎｊ＿ｆＩＰｎＲ！＝：

?，?ＮＰ＿００１１２７７３９．１?）；小菜蛾（尸；ｃｖ／ｏ＾／／ｇ，ＸＰ＿０１１５６５０７８．１?）；黑脈金斑蝶（Ｚ）．?ｐ／打抑ｗｓ，??ＯＷＲ４７４５２．１）；美國白蛾（／／？〇／／瓶ｚ）。??黑色橫線表示跨膜結(jié)構(gòu)域。??通過ＢＬＡＳＴＰ多序列比對(duì)，選擇８種昆蟲的ＮＰＦＲ蛋白與ＨｃＮＰＦＲ蛋白進(jìn)行多序??列比對(duì)分析。結(jié)果顯示ＨｃＮＰＦＲ與其它昆蟲ＮＰＦＲ蛋白具有一定的序列保守性，同源性??為６７．３２％？９３．４６％，且在各種昆蟲的ＮＰＦＲ的跨膜結(jié)構(gòu)域具有最高的保守性（圖２－??８）。構(gòu)建的９種昆蟲的ＮＰＦＲ的系統(tǒng)進(jìn)化樹如圖２－９所示，美國白蛾ＮＰＦＲ蛋白與斜??紋夜蛾（Ｓ．?／／／ｗｒａ）、棉鈴蟲（／／？?ｗｍ／ｇｅｒａ）、煙芽夜蛾（／／．?ｖ／ｍｓｒｍｓＯ神經(jīng)肽親緣關(guān)系??近而聚為一支，但與家蠶的關(guān)系較遠(yuǎn)。??９２?Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ?ａｒｍｉｇｅｒａ???Ｚｆ＿??Ｈｅ?Ｈｏｔ?ｈｉｓ?ｖｉｒｅｓｃｅｎｓ??７２???—??Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ?ｌｉｔｕｒａ??３１??Ａ?Ｈｙｐｈａｎｔｒｉａ?ｃｕｎｅａ???Ｐｌｕｔｅｌｌａ?ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ????４２??Ｐａｐｉｌｉｏ?ｘｕｔｈｕｓ??３７?Ｄａｎａｕｓ?ｐｌｅｘｉｐｐｕｓ???Ｃｈｉｌｏ?ｓｕｐｐｒｅｓｓａｌｉｓ???Ｂｏｍｂｙｘ?ｍｏｒｉ??圖２－９?９種昆蟲ＮＰＦＲ蛋白系統(tǒng)進(jìn)化樹??Ｆｉｇ．?２－９?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＮＰＦＲ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ?ｆｒｏｍ?９?ｉｎｓｅｃｔｓ??注：棉鈴蟲（／／．?ａｒｗ／ｇｅｒａ，ＸＰ＿０２１１８９９０５．１）；煙芽夜蛾（／／？?ｖ／ｍ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]棉鈴蟲神經(jīng)肽allatotropin G蛋白偶聯(lián)受體的克隆和鑒定[D]. 王郡.合肥工業(yè)大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3128278