土壤鹽漬化和干旱化是影響全球作物產(chǎn)量和品質(zhì)的重要因素。因此,作物耐鹽及耐旱分子機理研究已成為農(nóng)業(yè)科學的熱點。近年來研究表明植物中有一些基因、轉(zhuǎn)錄因子參與鹽和干旱脅迫應答。miRNA是普遍存在于動植物中的高度保守的基因表達調(diào)控元件,在植物脅迫應答過程中發(fā)揮重要作用,其中miR160/164家族基因在已有的報道中證明在植物中參與干旱和鹽脅迫應答過程。甜菜是我國重要的糖料作物,具有耐鹽堿、耐貧瘠、適應性廣等優(yōu)點,研究甜菜耐鹽和耐旱性,從分子水平上認識甜菜耐鹽耐旱機理,豐富耐鹽耐旱基因資源對選育耐鹽耐旱甜菜品種意義重大。本論文采用生物信息學分析與分子生物學實驗相結(jié)合的手段研究了在鹽/干旱脅迫下甜菜不同品種幼苗葉及根中miR160/164及其靶基因的表達量變化,并獲得如下結(jié)果:1.采用高通量測序并結(jié)合生物信息學技術(shù)預測到甜菜miR160和miR164的靶基因,其中miR160的靶基因為ARF17/18,miR164的靶基因為NAC（21/22）/100。2.克隆了抗逆相關(guān)的P5CS（1-Pyrroline–5-Carboxylat Synthetase）基因c DNA序列,經(jīng)測序及序列分析,該序... 

【文章來源】：哈爾濱工業(yè)大學黑龍江省 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：107 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

技術(shù)路線

待甜菜長出一對真葉時進行間苗，保持每個培養(yǎng)缽中有1-2株長勢一致的甜菜幼苗。室內(nèi)培育的甜菜幼苗生長較緩慢，2對真葉生長期約需45-50天。但是室內(nèi)的幼苗長勢均勻，且主、毛根發(fā)達。如圖3-1是室內(nèi)甜菜幼苗的培育過程。注：a）代表甜菜子葉期，b）代表甜菜一對真葉期圖 3-1 室內(nèi)培養(yǎng)的甜菜幼苗Figure 3-1 Indoor cultured beet seedlings

注：a）W6-1 品系的室外培育；b）CL6 品系的室外培育。圖 3-2 室外培養(yǎng)的甜菜幼苗Figure 3-2 Outdoor cultured beet seedlings.1.3 鹽/干旱脅迫處理甜菜幼苗待室內(nèi)和室外甜菜幼苗分別長到 2 對和 3 對真葉期時，將土壤里培養(yǎng)的幼輕移出，洗凈根上的泥土后移栽到培養(yǎng)液中，進行鹽脅迫和干旱脅迫處理，注栽過程中保持根系不受損傷。室內(nèi)培養(yǎng)的甜菜幼苗用于鹽脅迫實驗，室外培養(yǎng)苗用于干旱脅迫實驗。鹽脅迫過程使用300mM氯化鈉溶液分別對鹽敏感品系雙6和耐鹽品系”O(jiān)”理 0h，12h，24h，48h 和 72h，處理過程如圖 3-3，當對甜菜幼苗處理 12h 時菜幼苗開始出現(xiàn)干枯，萎蔫的現(xiàn)象。隨著處理時間的延長，與對照組相比甜菜萎蔫的程度加重，枯葉增多，甜菜受到的鹽脅迫程度加深。干旱脅迫過程使用 15%的 PEG6000 對耐鹽品系 W6-1 和鹽敏感品系 CL-6 處理 0 h，1 h，2 h，3 h 和 4 h，處理方法與鹽處理相同。隨著鹽處理時間的

【參考文獻】：
期刊論文
[1]甜菜鹽脅迫相關(guān)蛋白的初步篩選[J]. 田慶斌,崔杰,李俊良,羅成飛,孫宗艷.  中國甜菜糖業(yè). 2016 (02)
[2]VIGS技術(shù)在甜菜上的應用[J]. 龔攀,崔杰,李俊良,羅成飛,楊虎臣.  生物信息學. 2015(01)
[3]甜菜種質(zhì)資源耐鹽性篩選[J]. 史淑芝,崔杰,魯兆新,程大友,羅成飛.  中國甜菜糖業(yè). 2008(04)
[4]作物在滲透脅迫下脯氨酸積累的研究進展[J]. 齊永青,肖凱,李雁鳴.  河北農(nóng)業(yè)大學學報. 2003(S1)

碩士論文
[1]干旱脅迫對幼苗期甜菜脯氨酸（Pro）代謝通路的影響[D]. 楊虎臣.哈爾濱工業(yè)大學 2016
[2]甜菜miRNA生物信息學預測及耐鹽相關(guān)miRNA表達分析[D]. 李俊良.哈爾濱工業(yè)大學 2014



本文編號：3124887