通過(guò)利用實(shí)驗(yàn)已經(jīng)構(gòu)建好的表達(dá)IBRVgB/gC/gD囊膜蛋白的真核表達(dá)質(zhì)粒（pCDNA4-gB-His、pCDNA4-gC-His、pCDNA4-gD-His）為免疫原,以PEI磁珠為載體,PEG為保護(hù)層構(gòu)建DNA疫苗。將構(gòu)建好的真核表達(dá)質(zhì)粒,通過(guò)鑒定、擴(kuò)增、大提后,使PEI磁珠與其吸附并轉(zhuǎn)染至小鼠胚胎細(xì)胞（NIH/3T3）鑒定蛋白表達(dá)情況,此后進(jìn)行疫苗制備并通過(guò)電鏡觀察其形態(tài)特征。結(jié)果表明:三種蛋白均能在小鼠細(xì)胞中表達(dá),所制備DNA疫苗在電子顯微鏡下可觀察到PEG包裹在最外層,粒徑均在100 nm以?xún)?nèi)。成功構(gòu)建了以PEI磁珠吸附IBRV gB gC gD基因并包裹PEG保護(hù)層的DNA疫苗,驗(yàn)證其在小鼠表達(dá)系統(tǒng)中可以成功表達(dá),為后續(xù)對(duì)小鼠免疫效果的評(píng)價(jià)奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來(lái)源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,32(04)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

質(zhì)粒酶切鑒定結(jié)果

將處理好的小鼠胚胎細(xì)胞（NIH/3T3）置于免疫熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察，可見(jiàn)到轉(zhuǎn)染pCDNA4-g B-His、pCDNA4-gC-His、pCDNA4-gD-His的真核表達(dá)質(zhì)粒的細(xì)胞有明顯的綠光（圖A-C），而轉(zhuǎn)染了pCD-NA4-His的對(duì)照細(xì)胞無(wú)特異熒光（圖D）。結(jié)果表明真核表達(dá)質(zhì)�？稍谛∈笈咛ゼ�(xì)胞進(jìn)行有效表達(dá)。圖3 pCDNA4-gB/gC/gD-His真核表達(dá)質(zhì)粒體外感染小鼠胚胎細(xì)胞間接免疫熒光檢測(cè)基因表達(dá)（100×）

pCDNA4-gB/gC/gD-His真核表達(dá)質(zhì)粒體外感染小鼠胚胎細(xì)胞間接免疫熒光檢測(cè)基因表達(dá)（100×）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3097564