磷是植物生長與發(fā)育過程所必須的大量元素之一,在植物體內(nèi)具有重要作用。磷在植物生長發(fā)育過程中,參與物質(zhì)合成,能量轉(zhuǎn)化,信號傳遞等一系列的過程。土壤對磷的固定作用導(dǎo)致土壤中可溶性磷的濃度非常低,因此植物對磷的吸收利用效率也非常低。植物對磷的吸收和轉(zhuǎn)運主要依靠植物體內(nèi)的磷轉(zhuǎn)運蛋白,因此磷轉(zhuǎn)運蛋白在維持植物體內(nèi)磷平衡和正常發(fā)育的過程中起重要作用。通過篩選本實驗室水稻T-DNA插入突變體庫,我們得到了一個磷積累,部分葉尖壞死,植株矮化的突變體,并將其命名為rlk2。突變體rlk2以粳稻品種日本晴（Nipponbare）為遺傳背景,在幼水稻幼苗期突變體與野生型葉片中有效磷含量無顯著差異,水稻進入分蘗期后突變體葉片中有效磷含量顯著高于野生型,且植株矮化,葉尖壞死等表型逐漸顯現(xiàn)。通過構(gòu)建遺傳群體和田間表型的統(tǒng)計實驗得出rlk2突變?yōu)殡[性純合突變。通過構(gòu)建定位群體和運用圖位克隆技術(shù),我們從水稻基因組中克隆了一個編碼水稻類受體蛋白激酶的基因,將其命名為OsRLK2。OsRLK2在地下組織和地上組織中都有表達。類受體蛋白激酶在植物體中是一個非常重要的信號調(diào)節(jié)因子。類受體蛋白激酶的結(jié)構(gòu)主要包括一個胞外受體域,... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１水稻苗期野生型與磷積累突變體表型觀察（ＷＴ：野生型，／？從２：磷積累突變體，Ｂａｒ＝１０ｃｍ）??Ｆｉｇ．?２．１?Ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ?ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ?ａｎｄ?ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ?ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ?ｍｕｔａｎｔｓ?ｉｎ?ｒｉｃｅ?ｓｅｅｄｌｉｎｇ?ｓｔａｇｅ??（ＷＴ：?ｗｉｌｄ?ｔｙｐｅ，?ｒｌｋ２＼?ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ?ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ?ｍｕｔａｎｔ，?Ｂａｒ＝１０ｃｍ）??２．３．２突變體與野生型各營養(yǎng)元素含量比較??

圖３．１?ｒ從２突變體突變基因的初定位和精細定位??Ａ：初定位瓊脂糖電泳圖（引物?１１－６、１１－７、１１－８、１１－９；?Ｆ２?植株?１－６；?Ｄ：ｄｕｌａｒ；?Ｎ：Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ）??Ｂ：細定位瓊脂糖電泳圖（引物?ＩｎＤｅｌｌ３８０、ＩｎＤｅｌｌ５２６；?Ｆ２?植株?７－２０；?Ｄ：ｄｕｌａｒ；?Ｎ：Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ）??Ｆｉｇ．?３．１?Ｔｈｅ?ｉｎｉｔｉａｌ?ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｆｉｎｅ?ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｒｌｋ２?ｍｕｔａｎｔ?ｇｅｎｅ??Ａ：?Ｉｎｉｔｉａｌ?ｐｏｓｉｔｉｏｎｉｎｇ?ａｇａｒｏｓｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ?（ｐｒｉｍｅｒｓ?１１－６，?１１－７，?１１－８，?１１－９；?Ｄ：?ｄｕｌａｒ；?Ｎ：?Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ）??Ｂ：?ｆｉｎｅ?ｐｏｓｉｔｉｏｎｉｎｇ?ａｇａｒｏｓｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ?（ｐｒｉｍｅｒｓ?ＩｎＤｅｌｌ３８０，?ＩｎＤｅｌｌ５２６；?Ｄ：?ｄｕｌａｒ；?Ｎ：?Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ）??３．５．４?突變體突變位點分析??通過細定位將突變位點的所在區(qū)間縮小到了?１．４６?Ｍｂ，在此區(qū)間內(nèi)大約有２００多個基因，經(jīng)??過基因功能的初步篩選，排除己報道的和突變體表型無關(guān)的基因，最終我們篩選得到了幾個功能??未知的候選基因。將在此區(qū)間內(nèi)挑選的候選基因進行測序，在序列比對的過程當中發(fā)現(xiàn)一個未知??基因的第一個外顯子上具有一個單堿基的替換突變，并且基因型與表型連鎖。基因氨基酸序列的??１５??

?；?……十。。．ｖ＊：十??議?ｉｌ＿ｌ＿＿＿＿ｌ戀議＿＿Ｉ？Ｂ＿＿議＾??圖３．１?ｒ從２突變體突變基因的初定位和精細定位??Ａ：初定位瓊脂糖電泳圖（引物?１１－６、１１－７、１１－８、１１－９；?Ｆ２?植株?１－６；?Ｄ：ｄｕｌａｒ；?Ｎ：Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ）??Ｂ：細定位瓊脂糖電泳圖（引物?ＩｎＤｅｌｌ３８０、ＩｎＤｅｌｌ５２６；?Ｆ２?植株?７－２０；?Ｄ：ｄｕｌａｒ；?Ｎ：Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ）??Ｆｉｇ．?３．１?Ｔｈｅ?ｉｎｉｔｉａｌ?ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｆｉｎｅ?ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｒｌｋ２?ｍｕｔａｎｔ?ｇｅｎｅ??Ａ：?Ｉｎｉｔｉａｌ?ｐｏｓｉｔｉｏｎｉｎｇ?ａｇａｒｏｓｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ?（ｐｒｉｍｅｒｓ?１１－６，?１１－７，?１１－８，?１１－９；?Ｄ：?ｄｕｌａｒ；?Ｎ：?Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ）??Ｂ：?ｆｉｎｅ?ｐｏｓｉｔｉｏｎｉｎｇ?ａｇａｒｏｓｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ?（ｐｒｉｍｅｒｓ?ＩｎＤｅｌｌ３８０，?ＩｎＤｅｌｌ５２６；?Ｄ：?ｄｕｌａｒ；?Ｎ：?Ｎｉｐｐｏｎｂａｒｅ）??３．５．４?突變體突變位點分析??通過細定位將突變位點的所在區(qū)間縮小到了?１．４６?Ｍｂ，在此區(qū)間內(nèi)大約有２００多個基因，經(jīng)??過基因功能的初步篩選，排除己報道的和突變體表型無關(guān)的基因，最終我們篩選得到了幾個功能??未知的候選基因。將在此區(qū)間內(nèi)挑選的候選基因進行測序，在序列比對的過程當中發(fā)現(xiàn)一個未知??基因的第一個外顯子上具有一個單堿基的替換突變

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本文編號：3097583