黑穗醋栗（Ribes nigrum L.）是寒地特色小漿果果樹樹種之一,果實中花色苷含量較高,花色苷具有改善視力、降低血壓、減緩炎癥、抑制癌細(xì)胞等多種保健功能。類黃酮-3’,5’-羥基化酶（F3’5’H）是花色苷合成途徑中的關(guān)鍵酶之一,對花翠素（是花色苷的一種）的合成起著至關(guān)重要的作用。本論文以東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝試驗站黑穗醋栗種植資源圃中的‘布勞德’（Brodforp）為試驗材料,在克隆的基礎(chǔ)上,實施實時熒光定量PCR技術(shù),分析了黑穗醋栗F3’5’H基因在根、莖、葉、花、芽等不同組織器官以及果實發(fā)育的不同時期的表達(dá)特性,推測該基因的表達(dá)與果中花色苷含量的相關(guān)關(guān)系,構(gòu)建了F3’5’H原核表達(dá)系統(tǒng),以期為系統(tǒng)的闡明F3’5’H基因在黑穗醋栗花色苷生物合成中的作用以及表達(dá)方式提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:（1）采用PCR技術(shù)成功克隆得到黑穗醋栗類黃酮-3’5’-羥化酶（F3’5’H）基因,開放閱讀框（ORF）的長度為1530 bp,編碼509個氨基酸。采用生物信息學(xué)方法預(yù)測黑穗醋栗F3’5’H基因編碼的蛋白質(zhì)相對分子量為57.11 kDa,理論等電點為9.26,為親水性蛋白,無信號肽,有1個... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

研究技術(shù)路線

黑穗醋栗總RNA瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果

80 值為 2.03，OD 260/OD 230 值為 2.24提取黑穗醋栗的 RNA 符合后續(xù)分子生物1 黑穗醋栗總 RNA 瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果l RNA electrophoresis patterns of Ribes n 基因的克隆登錄的黑穗醋栗 F3'5'H 基因信息，獲得 引物：F1，F(xiàn)2。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]ABA和GA3對黑穗醋栗二次萌芽超微結(jié)構(gòu)的影響[J]. 秦棟,張椿浩,劉慶帥,薛曉曉,霍俊偉,員盎然.  果樹學(xué)報. 2017(10)
[2]日本蛇根草黃酮醇合成酶基因的克隆及其序列分析[J]. 張宇斌,彭貴,潘蓉蓉,陳婷,申歡,余遠(yuǎn)珍,孫威.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(07)
[3]細(xì)胞色素P450酶的表觀遺傳學(xué)調(diào)控及研究進(jìn)展[J]. 張軼雯,方羅,鄭小衛(wèi),李清林,童瑩慧,鮑美華,黃萍.  中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2017(02)
[4]‘桂葡6號’葡萄花色苷組成特點與基因表達(dá)規(guī)律解析[J]. 成果,周思泓,黃羽,張瑛,管敬喜,楊瑩,文仁德,張勁.  植物生理學(xué)報. 2017(01)
[5]煙草FLS基因表達(dá)抑制對類黃酮代謝的影響[J]. 宋中邦,李文正,高玉龍,王丙武,師君麗,余玉珍,陳麗梅,李永平.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2016(12)
[6]黑穗醋栗果實多糖的制備、結(jié)構(gòu)鑒定及生物活性研究[J]. 徐雅琴,王躍鵬,牛小杰,倪耀成,王麗波,楊昱,周濤.  食品科學(xué). 2017(15)
[7]芍藥查爾酮異構(gòu)酶基因（CHI）克隆、密碼子偏好性分析以及蛋白結(jié)構(gòu)功能預(yù)測[J]. 吳彥慶,趙大球,王靜,陶俊.  華北農(nóng)學(xué)報. 2016(02)
[8]藥用植物中細(xì)胞色素P450基因的研究進(jìn)展[J]. 董栩,許燕,李月亭,趙爽.  云南中醫(yī)中藥雜志. 2016(03)
[9]石榴果肉PgF3′5′H基因克隆及不同溫度處理下的表達(dá)分析[J]. 關(guān)曉彎,陳磊,涂佳麗,張水明.  西北植物學(xué)報. 2016(03)
[10]黃草烏Av-F3’5’H基因的克隆與表達(dá)分析[J]. 馬璐琳,王祥寧,賈文杰,段青,崔光芬,杜文文,王繼華.  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2015(06)

博士論文
[1]荔枝果皮花色素苷生物合成關(guān)鍵調(diào)控因子的篩選及其功能驗證[D]. 賴彪.華南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[2]微環(huán)境調(diào)控‘赤霞珠’葡萄果實花色苷代謝的研究[D]. 成果.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[3]山葡萄花色苷生物合成相關(guān)結(jié)構(gòu)基因克隆與表達(dá)[D]. 劉海峰.東北林業(yè)大學(xué) 2010
[4]藍(lán)色花形成關(guān)鍵基因的分離及其表達(dá)分析[D]. 孟麗.北京林業(yè)大學(xué) 2006

碩士論文
[1]黑穗醋栗酚類物質(zhì)的分析[D]. 趙劍輝.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[2]不同溫度貯藏對采后石榴品質(zhì)的影響及相關(guān)基因的表達(dá)[D]. 關(guān)曉彎.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]茶樹類黃酮-3’,5’-羥基化酶的功能分析[D]. 許玉嬌.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[4]花穗整穗和套袋對葡萄花色苷組分及合成相關(guān)基因表達(dá)的影響[D]. 張雷.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014



本文編號：3088823