發(fā)布時(shí)間：2021-03-18 17:56

　　博落回是罌粟科博落回屬的多年生草本植物,作為一種傳統(tǒng)的抗菌藥物其用法在唐代早期的《本草拾遺》中有詳細(xì)記載。博落回中含有芐基異喹啉類生物堿（Benzylisoquinoline alkaloids,BIAs）血根堿（sanguinarine,SAN）和白屈菜紅堿（chelerythrine,CHE）具有抗炎、調(diào)控腸道菌群和促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)的作用,且不含嗎啡、可待因等成癮性的BIAs。因此,M cordata已成為飼用抗生素的良好替代品在全世界許多國(guó)家的養(yǎng)殖業(yè)中廣泛使用。隨著越來(lái)越多的國(guó)家限用和禁用飼用抗生素,對(duì)博落回的市場(chǎng)需求將呈爆發(fā)式增長(zhǎng),致使野生資源蘊(yùn)藏量急劇減少。通過(guò)分子育種提高博落回中SAN和CHE含量以及利用代謝工程技術(shù)在工業(yè)微生物中異源生產(chǎn)SAN和CHE具有極大的意義,但是前提是找到博落回中SAN和CHE的合成基因。SAN和CHE屬于芐基異喹啉生物堿,其合成途徑復(fù)雜,涉及眾多合成基因的參與。本研究通過(guò)對(duì)博落回進(jìn)行全基因組測(cè)序,并結(jié)合轉(zhuǎn)錄組測(cè)序與SAN與CHE代謝輪廓數(shù)據(jù)挖掘參與合成的功能基因,再將候選基因在釀酒酵母中進(jìn)行異源表達(dá)和前體飼喂最終確定候選基因功能,主要結(jié)果如下。1.本... 

【文章來(lái)源】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁(yè)數(shù)】：151 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１－１［４６］．?（Ａ）前腸中的ＭＣＥ和ＣＴＣ對(duì)屬的相對(duì)豐度的增加

圖１－４．?ＳＡＮ與ＣＨＥ合成通路??Ｆｉｇｕｒｅ?１－４．?Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｏｆ?ｓａｎｇｕｉｎａ?

?第２拿傳落何臺(tái)翁Ｈ組測(cè)宗以及Ｓ紐與ＨｌＢｉｇ物合成相襲義目ｉｉ篩選???功酶的對(duì)應(yīng)氨基酸序列使用Ｃｌｕｓｔａｌ?Ｘ進(jìn)行多序列比對(duì)。然后使用Ｇｅｎｅｉｏｕｓ?１１．０．４構(gòu)建??進(jìn)化樹(shù)，構(gòu)樹(shù)方法選擇Ｎｅｉｇｈｂｏｒ－Ｊｏｉｎｉｎｇ?（ＮＪ）法，Ｂｏｏｔｓｔｒａｐ值設(shè)置為１０００。??２．３實(shí)驗(yàn)結(jié)果??２．３．１博落回核型分析??通過(guò)對(duì)博落西植株進(jìn)行核型分析，我們可以確證博落回為二倍體（２ｎ＝２０），有??２０條染色體＿。??Ａ??？?？？?？？??＼?＃?＾??％??Ｖ?０??＿????５?ｐｍ??Ｈ?ＩＩ?Ｉｔ?Ｍ??１?２?３?４?５??６?７?８?＇?９?１０??圖２－ｌ．Ｍ?血染色體的細(xì)胞學(xué)分析。ｃｏｒ＆ｔｏ染色體的細(xì)胞學(xué)檢測(cè)。ｃｏｒ＆ｔｏ的染??色體核型分析。比例尺，５微米。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１．?Ｃｙｔｏｌｏｇｉｃａｌ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆＭ?ｃｏｒ?ｄａｔａ?ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ．?（Ａ）?Ｃｙｔｏｌｏｇｉｃａｌ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｍ?ｃｏｒ?ｄａｔａ??ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ．?（Ｂ）?Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ?ｋａｒｙｏｔｙｐｉｎｇ?ｏｆＭ?ｃｏｒｄａｔａ．?Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ，?５?｜ｉｍ．??２．３．２博落回全基因組和轉(zhuǎn)錄組測(cè)序??２．３．２．１博落０全基固組ＤＮＡ提取??根據(jù)結(jié)果（圖２－２），博落回組培苗根部的ＤＮＡ條帶清晰且無(wú)降解情況，經(jīng)紫外分光光??度儀檢測(cè)，Ａ２６０／２８０值在１．８到２．０之間。該結(jié)果表明樣本中ＤＮＡ質(zhì)量較好，能用于后續(xù)測(cè)??序９？??１９??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同激素對(duì)博落回愈傷組織血根堿代謝累積水平的影響[J]. 蘆強(qiáng),彭瓊,李炎林,唐其,曾建國(guó).  湖南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2014(09)
[2]博落回提取物對(duì)實(shí)驗(yàn)性肝纖維化的防治作用[J]. 曾建國(guó),肖俐,王宇紅,劉林,鐘明,賀曉華,柳亦松.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2012(01)
[3]黃連N-甲基烏藥堿-3′-羥化酶基因的克隆及序列分析[J]. 周嘉裕,彭書明,雷濘菲,廖海,陳放.  中草藥. 2008(03)

博士論文
[1]基于同位素標(biāo)記L-酪氨酸研究博落回中血根堿生源合成途徑[D]. 劉秀斌.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3088687