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冬蟲夏草線粒體基因特異性片段篩選與PCR鑒定研究

發(fā)布時間:2021-03-15 01:42
  冬蟲夏草Ophiocordyceps是麥角菌科真菌冬蟲夏草菌(Ophiocordyceps sinensis(Berk.)Sacc.)寄生在蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座和幼蟲蟲體的干燥復(fù)合體,具有補肺益腎、止血化痰的功效。冬蟲夏草療效顯著,野生資源稀少和市場需求量大的矛盾,導(dǎo)致市售冬蟲夏草假冒偽劣的現(xiàn)象層出不窮。冬蟲夏草的準(zhǔn)確鑒別是保障臨床用藥安全的關(guān)鍵。本研究以整個冬蟲夏草線粒體基因為研究對象,篩選在線粒體基因上可以鑒別蟲草與其他物種的特異性片段,最終從蟲草線粒體基因組中篩選出cob和cox1兩個特異性基因,為進(jìn)一步篩選蟲草分子鑒定和物種進(jìn)化方面的理想分子標(biāo)記提供了理論依據(jù)。并且利用線粒體基因cob和cox1序列建立了冬蟲夏草的SS-PCR快速鑒定的方法,進(jìn)一步考察了此方法的準(zhǔn)確性。最后考察了濾紙法對冬蟲夏草和中藥材DNA提取的適應(yīng)性,為冬蟲夏草和中藥材的現(xiàn)場快檢提供了理論依據(jù)。本研究以冬蟲夏草線粒體基因cob和cox1序列的部分片段為靶標(biāo),設(shè)計篩選出4對冬蟲夏草特異鑒定引物9f、21f、30f、35f,這4對引物僅能特異擴(kuò)增冬蟲夏草DNA,不能擴(kuò)增其它混偽品DNA,檢測限低至5ng。通... 

【文章來源】:成都中醫(yī)藥大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

冬蟲夏草線粒體基因特異性片段篩選與PCR鑒定研究


基于cob基因的系統(tǒng)發(fā)育樹

冬蟲夏草線粒體基因特異性片段篩選與PCR鑒定研究


基于cox1基因的系統(tǒng)發(fā)育樹

冬蟲夏草線粒體基因特異性片段篩選與PCR鑒定研究


對特異引物的擴(kuò)增電泳圖


本文編號:3083333

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