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新型GABA定量方法的建立及短乳桿菌CD0817實時熒光定量PCR內(nèi)參基因的篩選

發(fā)布時間:2021-03-13 11:15
  γ-氨基丁酸(Gamma-Aminobutyric Acid,GABA)是天然存在的一種非蛋白質(zhì)氨基酸,具有許多重要的生理學(xué)功能,是動植物體內(nèi)主要的生物活性分子。由于乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)被認(rèn)為是安全的且有較高的GABA生產(chǎn)能力,近年來許多研究都集中于用LAB作為細胞工廠生產(chǎn)GABA。本課題組前期篩選到一株高產(chǎn)GABA的短乳桿菌CD0817,了解該菌株的基因表達模式將有助于研究其對不同培養(yǎng)條件(如Mn2+脅迫)的適應(yīng)性。然而,在短乳桿菌基因規(guī)范化表達研究中,對于篩選合適內(nèi)參基因的研究卻很少。基于此,本論文在不同脅迫條件下篩選出了合適的內(nèi)參基因;此外,由于篩選內(nèi)參基因的需要,本文還建立了一種新型且實用的GABA定量方法。主要結(jié)果如下。(1)建立了一種新型且高效的GABA定量分析方法。由于谷氨酸與GABA之間存在相互作用且該作用嚴(yán)重阻礙了兩種化合物的分離。因此,我們提出了醋酸鋅輔助差異沉淀/溶解(ZA-DPD)策略,通過逐步回收GABA以除去發(fā)酵液中的干擾物谷氨酸,這主要歸因于兩種重要試劑(谷氨酸沉淀試劑和谷氨酸排斥試劑)的使用。在... 

【文章來源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

新型GABA定量方法的建立及短乳桿菌CD0817實時熒光定量PCR內(nèi)參基因的篩選


GABA結(jié)構(gòu)式Fig.1.1StructuralformulaofGABA

新型GABA定量方法的建立及短乳桿菌CD0817實時熒光定量PCR內(nèi)參基因的篩選


谷氨酸脫羧反應(yīng)生成GABAFig.l.2GlutamatedecarboxylationreactionofGABA

新型GABA定量方法的建立及短乳桿菌CD0817實時熒光定量PCR內(nèi)參基因的篩選


GABA支路代謝示意圖

【參考文獻】:
期刊論文
[1]利用geNorm、NormFinder和BestKeeper軟件進行內(nèi)參基因穩(wěn)定性分析的方法[J]. 吳建陽,何冰,杜玉潔,李偉才,魏永贊.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2017(05)
[2]實時熒光定量PCR中內(nèi)參基因的選擇[J]. 趙文靜,徐潔,包秋華,陳永福,張和平.  微生物學(xué)通報. 2010(12)
[3]水果表面高產(chǎn)γ-氨基丁酸酵母菌菌株的篩選、鑒定和發(fā)酵條件優(yōu)化[J]. 蔣冬花,李杰,后家衡,徐曉波.  浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2008(06)
[4]熒光實時定量PCR的研究進展[J]. 張馳宇,成婧,李全雙,曹威,孫金燕.  江蘇大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2006(03)
[5]γ—氨基丁酸的分布和制備[J]. 白松,林向陽,阮榕生,鄭丹丹,劉玉環(huán),何承云.  現(xiàn)代食品科技. 2005(02)
[6]富含γ-氨基丁酸保健食品的研究與開發(fā)[J]. 張暉,姚惠源,姜元榮.  食品與發(fā)酵工業(yè). 2002(09)
[7]DNA芯片技術(shù)研究進展[J]. 李凌,馬文麗.  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2000(02)

碩士論文
[1]茯苓qRT-PCR內(nèi)參基因篩選的研究[D]. 趙小龍.武漢輕工大學(xué) 2016
[2]生產(chǎn)GABA乳酸菌的篩選及其相關(guān)特性研究[D]. 高曉彤.山東大學(xué) 2015
[3]玉米在非生物脅迫和激素處理條件下實時熒光定量PCR內(nèi)參基因的選擇[D]. 吝月愛.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[4]條斑紫菜(Pyropia/Porphyra yezoensis)實時熒光定量PCR內(nèi)參基因的篩選[D]. 邵惠.中國海洋大學(xué) 2012
[5]極大節(jié)旋藻實時熒光定量PCR內(nèi)參基因的選擇[D]. 馬飛.中國海洋大學(xué) 2012
[6]微生物轉(zhuǎn)化法產(chǎn)γ-氨基丁酸[D]. 楊帆.江南大學(xué) 2008
[7]紅曲霉發(fā)酵及某些生理活性物質(zhì)的研究[D]. 孫佰申.浙江工業(yè)大學(xué) 2004



本文編號:3080121

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