發(fā)布時(shí)間：2021-03-09 12:21

　　目的探究胞外超氧化物歧化酶（EC-SOD）基因修飾后的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）移植治療對(duì)腦梗死大鼠腦組織的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法體外分離培養(yǎng)大鼠BMSCs,將在293T細(xì)胞中培養(yǎng)的含EC-SOD序列的載體轉(zhuǎn)染至BMSCs細(xì)胞,免疫印跡法檢測(cè)細(xì)胞中EC-SOD蛋白表達(dá)驗(yàn)證EC-SOD轉(zhuǎn)染情況。Zea-longa線栓法建立腦梗死大鼠模型,建模成功后分為模型組（注射150 mmol/L PBS緩沖液10μL）、BMSCs組（注射BMSCs細(xì)胞懸液,細(xì)胞密度為1×10⁵個(gè)/μL×10μL）、MSCs+EC-SOD組（注射轉(zhuǎn)染EC-SOD表達(dá)載體的BMSCs細(xì)胞懸液1×10⁵個(gè)/μL×10μL）,對(duì)照組（不造模,僅結(jié)扎頸外遠(yuǎn)端動(dòng)脈對(duì)照處理;注射150 mmol/L PBS緩沖液10μL）,每組15只大鼠。以神經(jīng)功能缺損（mNSSS）評(píng)分評(píng)定大鼠神經(jīng)功能缺損情況,TTC染色法檢測(cè)腦梗死面積,免疫熒光法檢測(cè)腦組織中EC-SOD表達(dá)情況,Tunel染色檢測(cè)腦組織細(xì)胞凋亡情況,免疫印跡法檢測(cè)半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）、B淋巴細(xì)胞... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志. 2020,27(04)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

免疫印跡法檢測(cè)各組腦組織Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表達(dá)情況

熒光顯微鏡顯示,轉(zhuǎn)染效率達(dá)80%。與空白組、陰性轉(zhuǎn)染組相比,EC-SOD過(guò)表達(dá)組EC-SOD蛋白表達(dá)均顯著升高(F=311.409,0.24±0.03比0.94±0.09,q=31.978;0.26±0.05 比0.94±0.09,q=31.065;均P<0.05。見(jiàn)圖2～3)。圖2 BMSCs細(xì)胞EC-SOD過(guò)表達(dá)載體轉(zhuǎn)染情況（免疫熒光）

表1 各組大鼠移植治療后大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分、腦梗死面積、腦組織中EC-SOD陽(yáng)性率、腦組織細(xì)胞凋亡率及相關(guān)蛋白表達(dá)比較 ( x ˉ ±s ) 組別 mNSSS評(píng)分 腦梗死面積比例(%) EC-SOD陽(yáng)性率(%) 凋亡率(%) Caspase-3 Bax Bcl-2 對(duì)照組 0 0 21.78±5.04 6.64±1.34 0.62±0.04 0.86±0.11 1.38±0.14 模型組 3.56±0.62* 36.74±4.37* 20.56±5.49* 33.64±2.58* 1.34±0.19* 1.17±0.13* 0.21±0.06* BMSCs組 2.53±0.49# 24.79±3.84# 22.53±5.79 25.72±2.73# 0.88±0.08# 0.75±0.07# 0.43±0.08# BMSCs+EC-SOD組 1.28±0.21#a 15.27±3.66#a 47.78±7.21#a 18.36±2.26#a 0.73±0.09# 0.51±0.08#a 0.61±0.07# F值 213.391 122.441 43.823 225.691 69.213 67.020 270.008 P值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000 注:Caspase-3:半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3,Bcl-2:B淋巴細(xì)胞瘤-2基因,Bax:Bcl-2相關(guān)X蛋白,圖4同;mNSSS評(píng)分:神經(jīng)功能缺損評(píng)分;mNSSS評(píng)分n=15,腦梗死面積n=6,EC-SOD陽(yáng)性率、凋亡率、Caspase-3、Bax、Bcl-2 n=9;與對(duì)照組相比,*P<0.05;與模型組相比,#P<0.05;與BMSCs組相比,aP<0.052.3 各組大鼠移植治療后大鼠mNSSS評(píng)分、腦梗死面積、腦組織中EC-SOD、腦組織細(xì)胞凋亡比較

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腦梗死患者外周血調(diào)節(jié)性B細(xì)胞水平及其與頸動(dòng)脈粥樣硬化嚴(yán)重程度的相關(guān)性[J]. 曾佩,袁江,王云甫.  中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志. 2019(01)
[2]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠缺血性腦梗死免疫炎性反應(yīng)的影響研究[J]. 何霞,崔璨,陳敏.  中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2018(05)



本文編號(hào)：3072841