松材線蟲病是一種世界性的檢疫性病害,在多個(gè)國家造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失和生態(tài)災(zāi)難。前期研究發(fā)現(xiàn),松材線蟲在不同的環(huán)境條件下的雌雄性別比例存在顯著的差異,但有關(guān)松材線蟲的性別決定與分化研究國內(nèi)外鮮有報(bào)道,引起松材線蟲性別比例變化的內(nèi)在分子機(jī)制尚不清楚。對秀麗隱桿線蟲的研究結(jié)果表明,mab-3是調(diào)控性別分化的重要基因,該基因在不同物種之間具有較高的保守性。本文在前期研究的基礎(chǔ)上,對松材線蟲Bxy-mab-3基因的時(shí)空動態(tài)表達(dá)特性和生物學(xué)功能開展了深入系統(tǒng)的研究。研究結(jié)果如下:1、松材線蟲Bxy-mab-3基因編碼410個(gè)氨基酸,具有MAB-3家族蛋白兩個(gè)保守的DM功能結(jié)構(gòu)域,分別位于第58和101、第124和171個(gè)氨基酸之間。2、in situ原位雜交結(jié)果表明,Bxy-mab-3基因在松材線蟲的二齡幼蟲（J2）、三齡幼蟲（J3）、四齡幼蟲（J4）和雄性成蟲中均有表達(dá),但在胚胎期和雌性成蟲中不表達(dá)。在J2期,Bxy-mab-3主要在中腸系統(tǒng)中離散式表達(dá),J3期在整個(gè)中腸系統(tǒng)中都有表達(dá),J4期雄性和雌性幼蟲的整個(gè)身體都有表達(dá),但成蟲期表達(dá)出現(xiàn)性別分化,雄性成蟲只在交合刺部位特異性表達(dá),在雌體個(gè)體內(nèi)... 

【文章來源】：浙江農(nóng)林大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

松材線蟲成蟲性腺在線蟲內(nèi)部的示意圖

10的性腺中，可以觀察到明顯的卵原細(xì)胞、初級卵母細(xì)胞和次級卵母細(xì)胞。同樣的，在雄蟲性腺內(nèi)也可以清楚地觀察到精原細(xì)胞、初級精母細(xì)胞和次級精母細(xì)胞。圖1.2松材線蟲J4雌雄蟲的區(qū)分示意圖Figure1.2DifferentiationofJ4femaleandmaleofBursaphelenchusxylophilus注：（A）雌性J4幼蟲；（B）雄性J4幼蟲；（A1）雌性J4幼蟲尾部放大圖。紅色圈，雌性J4幼蟲初步發(fā)育的陰戶，箭頭處為雌性J4幼蟲尾部對比雄性J4幼蟲明顯收腰處；（B1）雄性J4幼蟲尾部放大圖。綠色圈，雄性J4幼蟲性腺中次級精母細(xì)胞。秀麗隱桿線蟲可以在身體內(nèi)部貯存大量成熟的精子。而在對松材線蟲的形態(tài)觀察中發(fā)現(xiàn)，松材線蟲并不能儲藏大量精子，而是在輸精管靠近交合刺附近可以觀察到有四個(gè)精子。但在松材線蟲雄性成蟲的性腺中，可以觀察到有大量的“單個(gè)”的細(xì)胞緊密排列，這可能是已經(jīng)完成核分裂的松材線蟲的精子，在松材線蟲進(jìn)行交配的時(shí)候迅速分裂分化成成熟的精子注入雌蟲體內(nèi)，完成交配。

23個(gè)重復(fù)，在體視顯微鏡下8h內(nèi)持續(xù)觀察雌雄蟲的交配行為并記錄分析，在24h后觀察記錄產(chǎn)卵情況，重復(fù)5次實(shí)驗(yàn)。圖2.1松材線蟲干擾24h后處女雌雄蟲交配行為實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)Fig.1FramworkofbehaviortestinmatingprocessbetweenvirginmaleandfemaleadultsafterbeinginterferencedbyBxy4022genewithsoakingfor24hinBursaphelenchusxylophilus2.11數(shù)據(jù)處理與分析性別比和體型以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。在獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)的基礎(chǔ)上，用SPSS18.0進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)學(xué)分析（SPSSInc.，Chicago，IL，UnitedStates）。當(dāng)p<0.05時(shí)，數(shù)據(jù)被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3057145