松材線蟲病是一種世界性的檢疫性病害,在多個國家造成巨大的經(jīng)濟損失和生態(tài)災難。前期研究發(fā)現(xiàn),松材線蟲在不同的環(huán)境條件下的雌雄性別比例存在顯著的差異,但有關(guān)松材線蟲的性別決定與分化研究國內(nèi)外鮮有報道,引起松材線蟲性別比例變化的內(nèi)在分子機制尚不清楚。對秀麗隱桿線蟲的研究結(jié)果表明,mab-3是調(diào)控性別分化的重要基因,該基因在不同物種之間具有較高的保守性。本文在前期研究的基礎(chǔ)上,對松材線蟲Bxy-mab-3基因的時空動態(tài)表達特性和生物學功能開展了深入系統(tǒng)的研究。研究結(jié)果如下:1、松材線蟲Bxy-mab-3基因編碼410個氨基酸,具有MAB-3家族蛋白兩個保守的DM功能結(jié)構(gòu)域,分別位于第58和101、第124和171個氨基酸之間。2、in situ原位雜交結(jié)果表明,Bxy-mab-3基因在松材線蟲的二齡幼蟲（J2）、三齡幼蟲（J3）、四齡幼蟲（J4）和雄性成蟲中均有表達,但在胚胎期和雌性成蟲中不表達。在J2期,Bxy-mab-3主要在中腸系統(tǒng)中離散式表達,J3期在整個中腸系統(tǒng)中都有表達,J4期雄性和雌性幼蟲的整個身體都有表達,但成蟲期表達出現(xiàn)性別分化,雄性成蟲只在交合刺部位特異性表達,在雌體個體內(nèi)... 

【文章來源】：浙江農(nóng)林大學浙江省

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

松材線蟲成蟲性腺在線蟲內(nèi)部的示意圖

10的性腺中，可以觀察到明顯的卵原細胞、初級卵母細胞和次級卵母細胞。同樣的，在雄蟲性腺內(nèi)也可以清楚地觀察到精原細胞、初級精母細胞和次級精母細胞。圖1.2松材線蟲J4雌雄蟲的區(qū)分示意圖Figure1.2DifferentiationofJ4femaleandmaleofBursaphelenchusxylophilus注：（A）雌性J4幼蟲；（B）雄性J4幼蟲；（A1）雌性J4幼蟲尾部放大圖。紅色圈，雌性J4幼蟲初步發(fā)育的陰戶，箭頭處為雌性J4幼蟲尾部對比雄性J4幼蟲明顯收腰處；（B1）雄性J4幼蟲尾部放大圖。綠色圈，雄性J4幼蟲性腺中次級精母細胞。秀麗隱桿線蟲可以在身體內(nèi)部貯存大量成熟的精子。而在對松材線蟲的形態(tài)觀察中發(fā)現(xiàn)，松材線蟲并不能儲藏大量精子，而是在輸精管靠近交合刺附近可以觀察到有四個精子。但在松材線蟲雄性成蟲的性腺中，可以觀察到有大量的“單個”的細胞緊密排列，這可能是已經(jīng)完成核分裂的松材線蟲的精子，在松材線蟲進行交配的時候迅速分裂分化成成熟的精子注入雌蟲體內(nèi)，完成交配。

23個重復，在體視顯微鏡下8h內(nèi)持續(xù)觀察雌雄蟲的交配行為并記錄分析，在24h后觀察記錄產(chǎn)卵情況，重復5次實驗。圖2.1松材線蟲干擾24h后處女雌雄蟲交配行為實驗設計Fig.1FramworkofbehaviortestinmatingprocessbetweenvirginmaleandfemaleadultsafterbeinginterferencedbyBxy4022genewithsoakingfor24hinBursaphelenchusxylophilus2.11數(shù)據(jù)處理與分析性別比和體型以平均值±標準差表示。在獨立樣本t檢驗的基礎(chǔ)上，用SPSS18.0進行了統(tǒng)計學分析（SPSSInc.，Chicago，IL，UnitedStates）。當p<0.05時，數(shù)據(jù)被認為具有統(tǒng)計學意義。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3057145