寡核苷酸是一類在多種疾病的診斷和治療方面具有極大應(yīng)用前景的生物藥物,其中包括癌癥、神經(jīng)病變和代謝紊亂等難以治愈的疾病。但由于未經(jīng)修飾的寡核苷酸存在易被機體快速清除、酶穩(wěn)定性差、細胞攝取能力低,以及存在激活固有免疫反應(yīng)等風險,寡核苷酸藥物向臨床轉(zhuǎn)化受到嚴重阻礙。為解決上述問題進而發(fā)展了寡核苷酸輸送載體（如陽離子聚合物、脂質(zhì)體、納米顆粒等）和化學修飾的寡核苷酸,但它們均存在細胞毒性、效率低下等問題,因此仍需要開發(fā)安全高效的寡核苷酸輸送體系�；诖�,本論文開展了以下兩方面的研究工作:1.設(shè)計合成了一類分子結(jié)構(gòu)精確,以富勒烯C₆₀為核心,聚乙二醇和寡核苷酸共修飾的雜臂星形聚合物(以下簡稱C₆₀ pacDNA)。選用了表面修飾有12個疊氮基團,分子直徑約為5 nm(假定C₆₀核分子中連接鏈的所有鍵均處于完全拉伸的構(gòu)型)的C₆₀分子為星形聚合物的核心,其表面反應(yīng)位點分布相對緊湊,有利于得到PEG密度高的偶聯(lián)物,同時C₆₀核分子的化合價數(shù)目并不高,可以得到完全官能化的偶聯(lián)物。將二苯基環(huán)辛炔（... 

【文章來源】：湖南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

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摘要
Abstract
本文所用英文縮略詞表
第1章 緒論
    1.1 引言
    1.2 寡核苷酸藥物
        1.2.1 反義寡核苷酸
        1.2.2 小分子干擾RNA
        1.2.3 核酸適配體
    1.3 新型寡核苷酸輸送體系
        1.3.1 球形核酸
        1.3.2 聚合物輔助壓實核酸
    1.4 納米閃光
    1.5 本論文的選題背景及主要工作
第2章 聚乙二醇-寡核苷酸修飾富勒烯核雜臂星形聚合物的制備
    2.1 引言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 實驗儀器和試劑
60核的制備">        2.2.2 C₆₀核的制備
60 pacDNA的制備">        2.2.3 C₆₀ pacDNA的制備
60 pacDNA納米閃光的制備">        2.2.4 C₆₀ pacDNA納米閃光的制備
        2.2.5 凝膠電泳
        2.2.6 DNA定量
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 設(shè)計原理
60核的表征">        2.3.2 C₆₀核的表征
        2.3.3 DNA和偶聯(lián)物的純化與表征
        2.3.4 PEG-DBCO的純化和表征
60 pacDNA的純化與表征">        2.3.5 C₆₀ pacDNA的純化與表征
60 pacDNA粒徑大小表征">        2.3.6 C₆₀ pacDNA粒徑大小表征
60 pacDNA納米閃光的表征">        2.3.7 C₆₀ pacDNA納米閃光的表征
    2.4 小結(jié)
第3章 聚乙二醇-寡核苷酸富勒烯核雜臂星形聚合物在納米閃光和基因調(diào)控方面的研究
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗儀器和試劑
60 pacDNA對寡核苷酸酶的穩(wěn)定性檢測">        3.2.2 C₆₀ pacDNA對寡核苷酸酶的穩(wěn)定性檢測
        3.2.3 納米閃光對寡核苷酸酶的穩(wěn)定性檢測
        3.2.4 納米閃光對目標DNA的響應(yīng)
        3.2.5 細胞的培養(yǎng)
        3.2.6 共聚焦顯微鏡的測定
        3.2.7 流式細胞分析
        3.2.8 蛋白印跡分析
        3.2.9 細胞毒性檢測
    3.3 結(jié)果討論
        3.3.1 反應(yīng)原理
60 pacDNA對寡核苷酸酶的抑制作用">        3.3.2 C₆₀ pacDNA對寡核苷酸酶的抑制作用
60 pacDNA納米閃光的體外檢測">        3.3.4 C₆₀ pacDNA納米閃光的體外檢測
60 pacDNA納米閃光對細胞的響應(yīng)">        3.3.5 C₆₀ pacDNA納米閃光對細胞的響應(yīng)
60 pacDNA的細胞攝取研究">        3.3.6 C₆₀ pacDNA的細胞攝取研究
60 pacDNA的基因調(diào)控">        3.3.7 C₆₀ pacDNA的基因調(diào)控
60 pacDNA的細胞毒性研究">        3.3.8 C₆₀ pacDNA的細胞毒性研究
    3.4 小結(jié)
結(jié)論與展望
參考文獻
附錄 攻讀碩士期間所發(fā)表的學術(shù)論文
致謝



本文編號：3057066