換錦花（Lycoris sprengeri）是石蒜屬（Lycoris）多年生球根類非模式植物,花色多為紅藍(lán)復(fù)色花,觀賞價(jià)值極高,利用基因工程技術(shù)探討換錦花花色形成機(jī)制對(duì)換錦花新品種選育具有重要的指導(dǎo)意義。本研究采用無縫克隆技術(shù)構(gòu)建換錦花LsMYBs病毒介導(dǎo)的基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）載體,利用真空滲透法侵染換錦花花苞,并對(duì)侵染后換錦花花瓣花色苷含量和花色形成相關(guān)基因的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),建立換錦花VIGS技術(shù)體系并初步分析LsMYBs的基因功能。研究結(jié)果表明LsMYBs沉默后換錦花花瓣LsMYBs基因的表達(dá)明顯下降,而花瓣尖端的藍(lán)色加深,花色苷含量明顯增加;VIGS載體的插入片段為400 bp時(shí)誘導(dǎo)基因沉默后LsMYBs的表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定,是未沉默的LsMYBs基因表達(dá)量的1/2,而插入cDNA全長(zhǎng)片段基因沉默后LsMYBs表達(dá)不穩(wěn)定。LsMYB4基因沉默后花色苷形成過程中結(jié)構(gòu)基因（早期形成基因（early biosynthesis gene, EBG）和晚期形成基因（late biosynthesis gene, LBG））查爾酮合成酶基因... 

【文章來源】：農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2020,28(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 LsMYBs序列分析
        1.2.2 LsMYBs基因克隆和VIGS載體構(gòu)建
    1.3 換錦花花瓣VIGS體系的建立
    1.4 LsMYB4調(diào)控花色合成相關(guān)基因的表達(dá)
    1.5 換錦花花瓣花色苷的測(cè)定
2 結(jié)果與分析
    2.1 LsMYB4和LsMYB5序列分析
    2.2 LsMYBs插入片段的克隆和VIGS載體構(gòu)建
    2.3 LsMYBs基因VIGS沉默后LsMYBs基因的表達(dá)和換錦花花瓣花色苷含量的變化
        2.3.1 LsMYBs基因VIGS沉默后對(duì)換錦花花瓣顏色和LsMYBs基因表達(dá)的影響
        2.3.2 LsMYBs基因沉默后換錦花花瓣花色苷含量的變化
        2.3.3 LsMYBs基因沉默后對(duì)花色苷代謝相關(guān)基因的表達(dá)分析
3 討論
    3.1 VIGS技術(shù)是研究植物基因功能的有力工具
    3.2 LsMYB4和LsMYB5為轉(zhuǎn)錄抑制因子
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]換錦花LsMYB5基因的克隆與表達(dá)分析[J]. 侯朔,高燕會(huì),童再康.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào). 2019(12)
[2]蘋果MdMYB32通過自身EAR抑制序列抑制花青苷的生物合成[J]. 許海峰,楊官顯,王意程,姜生輝,王楠,陳學(xué)森.  中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(24)
[3]應(yīng)用于茄子的病毒誘導(dǎo)的基因沉默體系的建立與優(yōu)化[J]. 劉軍,楊艷,周曉慧,姜懸云,鮑生有,莊勇.  江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2018(04)
[4]植物花青素生物合成與調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 梁立軍,楊祎辰,王二歡,邢丙聰,梁宗鎖.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(21)
[5]基因功能研究工具VIGS在植物中的應(yīng)用[J]. 李志強(qiáng),曹延婷,郭曉龍,徐敏.  基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2018(02)
[6]基于牡丹類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶基因建立VIGS技術(shù)體系[J]. 舒慶艷,朱瑾,門思琦,郝青,王倩玉,劉政安,曾秀麗,王亮生.  園藝學(xué)報(bào). 2018(01)
[7]VIGS實(shí)驗(yàn)技術(shù)體系在月季中的應(yīng)用及優(yōu)化[J]. 丁榕,梁晶,趙和文,張克中,崔金騰.  中國農(nóng)學(xué)通報(bào). 2018(03)
[8]非洲菊花瓣瞬時(shí)表達(dá)和病毒誘導(dǎo)的基因沉默（VIGS）系統(tǒng)的建立[J]. 唐宜,李凌飛,王小菁.  植物生理學(xué)報(bào). 2017(03)
[9]利用VIGS技術(shù)研究草莓FaMYB5的功能[J]. 王玲,湯浩茹,王小蓉,陳清,江雷雨,林源秀.  園藝學(xué)報(bào). 2017(01)
[10]VIGS載體在蔬菜作物中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 季娜娜,閔德棟,邵淑君,李富軍,張新華.  植物生理學(xué)報(bào). 2016(06)



本文編號(hào)：3040391