發(fā)布時間：2021-02-19 01:29

　　換錦花（Lycoris sprengeri）是石蒜屬（Lycoris）多年生球根類非模式植物,花色多為紅藍復色花,觀賞價值極高,利用基因工程技術探討換錦花花色形成機制對換錦花新品種選育具有重要的指導意義。本研究采用無縫克隆技術構建換錦花LsMYBs病毒介導的基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）載體,利用真空滲透法侵染換錦花花苞,并對侵染后換錦花花瓣花色苷含量和花色形成相關基因的表達進行檢測,建立換錦花VIGS技術體系并初步分析LsMYBs的基因功能。研究結果表明LsMYBs沉默后換錦花花瓣LsMYBs基因的表達明顯下降,而花瓣尖端的藍色加深,花色苷含量明顯增加;VIGS載體的插入片段為400 bp時誘導基因沉默后LsMYBs的表達量相對穩(wěn)定,是未沉默的LsMYBs基因表達量的1/2,而插入cDNA全長片段基因沉默后LsMYBs表達不穩(wěn)定。LsMYB4基因沉默后花色苷形成過程中結構基因（早期形成基因（early biosynthesis gene, EBG）和晚期形成基因（late biosynthesis gene, LBG））查爾酮合成酶基因... 

【文章來源】：農(nóng)業(yè)生物技術學報. 2020,28(06)北大核心

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 實驗方法
        1.2.1 LsMYBs序列分析
        1.2.2 LsMYBs基因克隆和VIGS載體構建
    1.3 換錦花花瓣VIGS體系的建立
    1.4 LsMYB4調(diào)控花色合成相關基因的表達
    1.5 換錦花花瓣花色苷的測定
2 結果與分析
    2.1 LsMYB4和LsMYB5序列分析
    2.2 LsMYBs插入片段的克隆和VIGS載體構建
    2.3 LsMYBs基因VIGS沉默后LsMYBs基因的表達和換錦花花瓣花色苷含量的變化
        2.3.1 LsMYBs基因VIGS沉默后對換錦花花瓣顏色和LsMYBs基因表達的影響
        2.3.2 LsMYBs基因沉默后換錦花花瓣花色苷含量的變化
        2.3.3 LsMYBs基因沉默后對花色苷代謝相關基因的表達分析
3 討論
    3.1 VIGS技術是研究植物基因功能的有力工具
    3.2 LsMYB4和LsMYB5為轉(zhuǎn)錄抑制因子
4 結論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]換錦花LsMYB5基因的克隆與表達分析[J]. 侯朔,高燕會,童再康.  農(nóng)業(yè)生物技術學報. 2019(12)
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[6]基于牡丹類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶基因建立VIGS技術體系[J]. 舒慶艷,朱瑾,門思琦,郝青,王倩玉,劉政安,曾秀麗,王亮生.  園藝學報. 2018(01)
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[8]非洲菊花瓣瞬時表達和病毒誘導的基因沉默（VIGS）系統(tǒng)的建立[J]. 唐宜,李凌飛,王小菁.  植物生理學報. 2017(03)
[9]利用VIGS技術研究草莓FaMYB5的功能[J]. 王玲,湯浩茹,王小蓉,陳清,江雷雨,林源秀.  園藝學報. 2017(01)
[10]VIGS載體在蔬菜作物中的應用研究進展[J]. 季娜娜,閔德棟,邵淑君,李富軍,張新華.  植物生理學報. 2016(06)



本文編號：3040391