目的:通過(guò)小干擾RNA（siRNA）沉默NOK基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá),研究NOK基因在人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251增殖、凋亡及侵襲中的調(diào)控作用。方法:合成NOK siRNA（si-578和si-996）,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞,qRT-PCR、Western blot檢測(cè)其對(duì)NOK基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)的抑制效果,MTS法及平板克隆形成實(shí)驗(yàn)研究其對(duì)細(xì)胞增殖的影響,Transwell試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力,Annexin V-FITC/7-AAD雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,Western blot檢測(cè)Cyclin D1及AKT的蛋白表達(dá)。結(jié)果:si-578和si-996可顯著降低NOK基因轉(zhuǎn)錄和表達(dá)（P<0.05）。抑制U251細(xì)胞NOK基因表達(dá),可顯著抑制細(xì)胞增殖和侵襲（P<0.05）,凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯增加（P<0.05）,G₁期U251細(xì)胞數(shù)量顯著增加（P<0.05）,S期細(xì)胞明顯減少（P<0.05）,Cyclin D1表達(dá)和AKT磷酸化水平明顯降低。結(jié)論:NOK在腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖、侵襲和凋亡過(guò)程中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2020,36(14)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

轉(zhuǎn)染NOK siRNA對(duì)U251細(xì)胞中NOK mRNA和蛋白表達(dá)的影響

NOK siRNA對(duì)U251細(xì)胞增殖和克隆形成的影響

24 h穿過(guò)基質(zhì)膠并貼于聚碳酸脂膜底面的細(xì)胞數(shù)分別為si-NC(14.2±4.6)個(gè)/HP,si-578(4.1±2.2)個(gè)/HP和si-996(6.4±3.7)個(gè)/HP,與si-NC組相比,si-578和si-996組細(xì)胞侵襲能力顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,圖5)。表1 各組別細(xì)胞凋亡指數(shù)比較 ( x ˉ ±s,n=9) Tab.1 Apoptotic index of each group ( x ˉ ±s,n=9) Groups Annexin V-FITC/7-AAD double staining method AI(%) t P si-NC 3.45±2.04 - - si-578 17.73±5.08 3.84 <0.001 si-996 15.17±4.24 4.36 <0.001


本文編號(hào)：3030266