為揭示小麥促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）級(jí)聯(lián)途徑組分基因介導(dǎo)植物抵御低磷逆境的功能,以TaMAPKK3為對(duì)象,利用生物信息學(xué)技術(shù)分析其分子特征;通過設(shè)置低磷處理,檢測小麥中TaMAPKK3基因的表達(dá)模式;將供試基因融合至雙元表達(dá)載體pCAMBIA3301啟動(dòng)子下游,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法遺傳轉(zhuǎn)化煙草,通過qRT-PCR篩選出超表達(dá)TaMAPKK3基因的煙草植株;以轉(zhuǎn)基因煙草為試驗(yàn)材料,通過測定低磷條件下植株的生長狀態(tài)、光合參數(shù)以及含磷量等,鑒定TaMAPKK3介導(dǎo)植株抵御低磷逆境的功能。結(jié)果表明,TaMAPKK3編碼閱讀框1 572 bp,編碼523個(gè)氨基酸殘基,蛋白分子量58.508 ku,等電點(diǎn)為5.72。編碼蛋白含有典型MAPKKs家族蛋白結(jié)構(gòu)域,在其C端含有核轉(zhuǎn)移因子結(jié)構(gòu)域（NTF2）,歸屬于MAPKKs家族中的B亞組;系統(tǒng)進(jìn)化分析顯示,TaMAPKK3與烏拉爾圖小麥TuMAPKK6具有相似的進(jìn)化途徑;與正常供磷相比,低磷處理下,TaMAPKK3表達(dá)量隨處理時(shí)間的延長呈現(xiàn)上調(diào)表達(dá)趨勢,且在處理27 h轉(zhuǎn)錄豐度最高,進(jìn)行復(fù)磷處理后供試基因轉(zhuǎn)錄本減少,在復(fù)磷處理27 h后轉(zhuǎn)錄豐度恢復(fù)初... 

【文章來源】：華北農(nóng)學(xué)報(bào). 2020,35(05)北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 試驗(yàn)材料
    1.2 TaMAPKK3基因克隆及分子特征分析
    1.3 TaMAPKK3應(yīng)答低磷逆境的表達(dá)模式研究
    1.4 低磷處理下TaMAPKK3轉(zhuǎn)化株系植株生長鑒定
    1.5 低磷處理下TaMAPKK3轉(zhuǎn)化株系含磷量和光合參數(shù)測定
    1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 TaMAPKK3分子特征
    2.2 TaMAPKK3低磷逆境下的表達(dá)模式
    2.3 低磷處理下超表達(dá)TaMAPKK3株系的生長特征
    2.4 低磷處理下超表達(dá)TaMAPKK3株系磷素吸收和光合特性
3 討論與結(jié)論



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