我國(guó)是蘋果栽植大國(guó),產(chǎn)量居世界首位。由于我國(guó)主栽品種富士為蘋果輪紋病的易感品種,使得該病在我國(guó)廣泛且嚴(yán)重發(fā)生,制約我國(guó)蘋果產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。本研究所用基因是實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)蘋果響應(yīng)輪紋病侵染的轉(zhuǎn)錄組分析篩選而來,分別為4CL、COMT、EDS1和EDS2。本研究以蘋果品種“雞冠”和“富士”的雜交后代中選擇的抗病株系“1-1-46”和感病株系“1-1-40”的葉片為試材接種蘋果輪紋病菌（Botryosphaera dothidea）后,進(jìn)行病情的調(diào)查和4個(gè)抗性相關(guān)基因表達(dá)量的測(cè)定,同時(shí)也對(duì)4個(gè)抗病相關(guān)基因進(jìn)行克隆和生物信息學(xué)分析。利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將蘋果4CL基因進(jìn)行了異源遺傳轉(zhuǎn)化,為后期深入研究其在抗蘋果輪紋病中的作用做準(zhǔn)備,主要研究如下:1.采用室內(nèi)人工接種輪紋病菌后的整個(gè)時(shí)期內(nèi),抗病株系“1-1-46”葉片病斑面積均顯著小于感病株系“1-1-40”。病斑增長(zhǎng)高峰均發(fā)生在接菌后4 d-5 d。根據(jù)6 d時(shí)病斑面積,可以得出抗病株系“1-1-46”為中等抗性,感病株系“1-1-40”為高度感病。2.對(duì)4CL、COMT、EDS1、EDS2進(jìn)行基因相對(duì)表達(dá)量的測(cè)定,發(fā)現(xiàn)接種輪紋病菌后,抗性植株內(nèi)4CL... 

【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１不同抗性蘋果砧木葉片處理后病斑的生長(zhǎng)動(dòng)態(tài)??注：不同的小寫字母表示Ｐ＜〇．〇５水平上差異顯著，下同

?河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位（畢業(yè)）論文???３．２．２．４輪紋病菌侵染對(duì)蘋果［１十片五ＤＳ２基因表達(dá)的影Ｂ向??如圖６所示，Ｏｄ時(shí)，在接菌和接種空白培養(yǎng)基２種處理下，抗病株系“１－１－４６”??葉片中基因表達(dá)量低于感病株系“１－１－４０”，達(dá)到顯著水平（Ｐ＜０．０５）。抗病株??系“１－１－４６”在整個(gè)試驗(yàn)過程中，整體呈現(xiàn)上升－下降－上升的趨勢(shì)，接菌處理五ＡＳ２基因??表達(dá)量高于對(duì)照。除４ｄ時(shí)，接菌處理下抗病株系“１－１－４６”葉片中基因表達(dá)量??高于接種空白培養(yǎng)基（Ｐ＜〇．〇５）。在０．５?ｄ、２?ｄ、４?ｄ時(shí)，接種空白培養(yǎng)基感病株系“１－１－４０”??葉片中五ＡＳ２基因表達(dá)量顯著高于接菌處理，其他時(shí)間差異不顯著（Ｐ＜０．０５）。接菌??處理下，在０．５?ｄ時(shí)，抗病株系“１－１－４６”葉片中五Ｄ幻基因表達(dá)量顯著高于感病株系??“１－１－４０”（Ｐ＜０．０５），之后抗病株系“１－１－４６”葉片中五Ｚ）幻基因表達(dá)量呈現(xiàn)先下降再??上升的趨勢(shì)；ｌｄ－４ｄ時(shí)，感病株系“１－１－４０”葉片中五ＡＳ２基因表達(dá)量不斷上升，并在??２ｄ、４?ｄ時(shí)顯著高于抗病株系“１－１－４６”中的表達(dá)量（Ｐ＜０．０５）?；?６ｄ時(shí)抗病株系“１－１－４６”??葉片中五基因表達(dá)量迅速增加達(dá)到最大值。在接種空白培養(yǎng)基處理下，感病株系??“１－１—４０”葉片中五仍２基因表達(dá)量均顯著高于抗病株系“１－１－４６”（Ｐ＜０．０５）。??，?□感病接菌??３?ｎ?一??ａ?■丨幾病接囷??ＣＭ?７?５?－?ｆｊｌ?ｕ?□感病未接菌??＿議一?？?ｄ?喊病雜菌??２－?Ｈ?ａ??ｍ?Ｂ?１?：?ｉ?Ｔ??ＩＩ?１．５－?：：１??ｉｆ：ｉｉ?ａ

ｅｅ￡?獻(xiàn)以＾??ＫＮＣＹＡＡＬＰＤＮＧＫＶＩＶＡＥＣＩＬＦＶＡＰＤＳＳＬＡＴＫ６ＷＨＩＤＡＩＭＬＡＨＮＰＧ６ＫＥＲＴＥＫＥＦＥＡＬＡＫＧＳＱＦＱ６ＦＲＷ??ｈｈｈｈｈｈｃｃｔｔｔｃｅｅｅｅｅｅｅｃｅｃｃｃｃｃｃｃｃｃｔｔｅｅｅｅｈｈｅｅｅｅｓｃｔｔｃｃｃｃｈｈｈｈｈｈｈｈｈｔｔｔｔｃｃｒｔｅｅｅｅ??ＣＳＡＦＮＴＹＡＩＥＦＬＫＫＮ??ｅｈｈｔｃｈｈｈｈｈｈｈｈｈ??５８?１００?１５８?２６０?２５８?３００??５９?１８０?１５９?２６０?２５８?３８８??圖１６蘋果ＣＯＭｒ蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)??Ｆｉｇ．?１６?ｓｅｃｏｎｄａｒｙ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ａｐｐｌｅ?ＣＯＭＴ?ｐｒｏｔｅｉｎ??（３）蘋果基因編碼蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)??利用ＳＯＰＭ對(duì)￡以＾蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)，可以得出（圖１７）五ＡＳ７主要由四個(gè)結(jié)??構(gòu)模塊組成，有（Ｘ螺旋３４８?jìng)�(gè)，占全結(jié)構(gòu)的５６．３１％；延伸鏈７０個(gè)，占全結(jié)構(gòu)的］１．３３％；??Ｐ－轉(zhuǎn)角４］個(gè)，占全結(jié)構(gòu)的６．６３％；無規(guī)則卷曲１５９個(gè)，占全結(jié)構(gòu)的２５．７３％。??３０??

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3025549