羧酸酯酶普遍存在于不同生物中,是生物催化研究的重要酶類。它能夠有效的催化羧酸酯的水解,在臨床、制藥、環(huán)境修復(fù)等方面發(fā)揮著重要的作用。論文研究了貝萊斯芽孢桿菌Bacillus velezensis SYBC H47羧酸酯酶的基因篩選、克隆、表達(dá)、酶學(xué)性質(zhì)及其對(duì)四種常見(jiàn)鄰苯二甲酸酯類（PAEs）塑化劑的降解。主要研究結(jié)果如下:（1）通過(guò)已知的B.velezensis SYBC H47全基因組的功能注釋,篩選到66個(gè)酯酶基因;進(jìn)一步分類后,得到4個(gè)羧酸酯酶基因,分別為:baces01、baces02、baces03、baces04。（2）對(duì)baces01-bace04的核酸序列和氨基酸序列進(jìn)行分析得知,四個(gè)目的基因的開(kāi)放閱讀框分別為603、1449、741和870 bp,分子量大小分別被預(yù)測(cè)為22.4、52.8、28.3和31.9 kDa。BaCEs01、BaCEs02、BaCEs03、BaCEs04氨基酸序列中都含有酯酶家族保守基序Gly-Xxx-Ser-Xxx-Gly和絲氨酸催化三聯(lián)體Ser-Asp-His。通過(guò)構(gòu)建氨基酸序列進(jìn)化樹(shù)得知BaCEs01-BaCEs04分別屬于酯酶第VI、V... 

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羧酸酯酶的催化機(jī)制Fig.1-1Thecatalyticmechanismofcarboxylesterase

江南大學(xué)碩士學(xué)位論文6水解是PAEs降解途徑中最關(guān)鍵的一步。一般情況下，羧酸酯酶可單獨(dú)作用于PAEs中的一個(gè)酯鍵，生成鄰苯二甲酸單酯(Monoalkylphthalate,MNP)，或者同時(shí)作用于兩個(gè)酯鍵，產(chǎn)物為鄰苯二甲酸(Phthalicacid,PTH)，該中間體毒性更低，且極易被自然界中的微生物所利用，生成H2O和CO2，從而加快降解進(jìn)程[70]。圖1-2PAE的結(jié)構(gòu)通式Fig.1-2GeneralstructuralformulaofPAE目前，對(duì)于PAEs水解酶的了解比較有限，且大多數(shù)研究?jī)H定性分析。已報(bào)道的大多數(shù)的PAEs降解酶對(duì)于側(cè)鏈為中等長(zhǎng)度的塑化劑，如DNPP和DBP的降解效率較高,而對(duì)于側(cè)鏈長(zhǎng)度較短的塑化劑(DMP、DEP)降解效率較低。除此之外，目前已知的PAEs水解酶主要分布于酯酶IV,V,VII和VIII家族和一些未知的家族(表1-2)，其中大部分屬于酯酶第IV家族。除了這四個(gè)家族的酯酶外，還未發(fā)現(xiàn)其他家族的酯酶在塑化劑降解中的應(yīng)用研究[67]。表1-2PAEs水解酶Table1-2PAEshydrolase酶登錄號(hào)家族來(lái)源菌株參考文獻(xiàn)TriacylglycerollipaseAEW03609IVSulfobacillusacidophilusDSM10332[71]EsteraseQ6KZ86IVPicrophilustorridus[72]EsteraseAJO67804IVSphingobiumsp.SM42[73]DialkylPEhydrolaseAFK31309IVAcinetobactersp.M673[74]DialkylPEhydrolaseAGY55959IVUnculturedbacterium[59]DialkylPEhydrolaseAGY55960IVUnculturedbacterium[59]MEHPhydrolaseBAE78500VGordoniasp.P8219[75]MEHPhydrolaseAMJ52171VGordoniasp.YC-RL2[76]MEHPhydrolaseBAU22081VRhodococcussp.EG-5[70]CarboxylesteraseAIZ00845VIIBacillussp.K91[77]EsteraseMH513611VIIGordoniapolyisoprenivorans5F[78]

論文研究路線

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[3]桃流膠病拮抗微生物篩選及發(fā)酵產(chǎn)抗菌脂肽研究[D]. 黎循航.江南大學(xué) 2016
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碩士論文
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[2]Picrophilus torridus嗜熱酯酶EstPt 1的性質(zhì)研究以及對(duì)塑化劑的降解研究[D]. 杜曉韻.東華大學(xué) 2019
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[4]塑化劑降解菌Acinetobacter sp.LMB-5的性能及其酯酶酶學(xué)性質(zhì)的研究[D]. 方月.華東理工大學(xué) 2017
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本文編號(hào)：3016472